温红玲
- 作品数：106 被引量：218H指数：8
- 供职机构：山东大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学建筑科学一般工业技术更多>>
- 人副流感病毒3型HN糖蛋白受体结合位点突变分析
- 目的确定人副流感病毒3型(human parainfluenza type3virus,hPIV3)血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)受体结合位点的功能。方法采用定点突变与同源重组相结合的方法将HN基因的7个氨基酸突变为丙氨酸...
- 褚福禄温红玲王志玉
- 关键词：细胞融合
- 文献传递
- 山东部分乙型脑炎患者中西尼罗病毒感染的研究
- 2015年
- 目的 研究山东省是否存在西尼罗病毒（WNV）感染.方法 收集山东省部分地区2013年242例临床诊断为流行性乙型脑炎（JE）患者的样本共计272份（急性期血清和脑脊液214份、恢复期血清58份）.利用逆转录PCR检测急性期样本中乙型脑炎病毒（JEV）和WNV的RNA,并对阳性样本进行病毒分离,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测样本中JEV和WNV的IgM和IgG抗体.对JEV-IgM和WNV-IgM、JEV-IgG和WNV-IgG抗体出现交叉反应的样本进一步检测其抗体效价.将下列两种结果视为WNV感染可疑病例：①两种病毒抗体检测均阳性的样本：抗体效价WNV-IgM/JEV-IgM≥4或WNV-IgG/JEV-IgG≥4者.②WNV-IgM（＋）、JEV-IgM（-）或WNV-IgG（＋）、JEV-IgG（-）的样本.结果 214份急性期样本中有4份JEV RNA的RT-PCR结果（＋）,未扩增出WNVRNA,未分离到病毒.急性期样本中,JEV-IgM阳性率为99.07％（212/214）,WNV-IgM阳性率为35.05％ （75/214）,交叉反应率为34.58％ （74/214）;恢复期样本中,JEV-IgG阳性率为55.17％ （32/58）,WNV-IgG阳性率为46.55％ （27/58）,交叉反应率为为31.03％ （18/58）;WNV感染可疑病例15例.结论 山东部分地区2013年JE患者中可能存在WNV感染病例,但本次研究的结果不能完全支持山东省存在WNV流行的情况,提示在该地区加强JE防控的同时应增加WNV的监测.
- 苏祥刘志荣刘建伟刘长梅温红玲宋艳艳宋修光于学杰赵丽
- 关键词：西尼罗病毒酶联免疫吸附测定抗体效价
- 新城疫病毒F蛋白细胞融合活性位点中保守氨基酸基因突变分析被引量：10
- 2006年
- 为了确定新城疫病毒融合蛋白(F)分子上活性位点中保守氨基酸在F蛋白的细胞融合作用,弄清F细胞融合的分子机理,采用基因定点突变法,创造一个酶切位点,用酶切反应初步筛选突变株,然后用DNA序列分析进一步确定,并于真核细胞内进行表达,Giemsa染色定性和指示基因法定量检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS)检测表达效率情况。结果表明,NDV F第117位苯丙氨酸(F)突变成亮氨酸(L)时对细胞融合作用没有显著影响。R112和K115同为保守序列,分别突变为G时,细胞融合活性只有原来的44%,下降了56%。细胞表面表达效率没有明显的改变。N147突变为K时,细胞融合活性明显下降,只有原来的15%,而细胞表面表达效率没有明显的改变。L154为保守序列,突变为K时,细胞融合活性消失,说明L154是一个非常关键的氨基酸,对维持F蛋白的细胞融合活性非常重要。细胞表面表达效率也有所下降(为原来的94%)。D462属于高度保守氨基酸,当突变为N时,细胞融合活性消失,但经细胞表面表达效率分析证明,此突变蛋白未表达于细胞表面,证明在细胞浆转运至细胞表面的过程中发生了问题。当突变为R和E时,细胞融合活性未发生改变,但细胞表面表达效率有所下降,分别为野毒株的63%和44%。说明NDV F分子上与HN相互作用的特异性区域中的某些保守氨基酸在细胞融合中发挥着重要作用,对F蛋白的折叠、加工、转运等,发挥着不同作用,从而影响F蛋白的细胞融合作用和/或在细胞表面的表达量。
- 王志玉任桂杰温红玲宋艳艳王桂亭姚苹许洪芝张文强
- 关键词：副粘病毒融合蛋白细胞融合基因新城疫病毒
- 肠道病毒71型山东临沂分离株全基因组序列分析被引量：11
- 2011年
- 目的自1例死亡患儿的标本中分离EV71，并分析其全基因组序列特点，研究其基因序列的改变是否与其神经毒力有关。方法咽拭子标本采自山东临沂市人民医院1例死亡患儿，在人横纹肌瘤细胞（RD）上分离EV71，分段扩增获得EV71的全序列，用BLAST、Bioedit和MEGA4进行序列分析。结果获得1株EV71分离株SDLY107，基因组全长7405bp，全基因组核苷酸序列与2008年的阜阳株Fuyang．Anhui．P．R．C／17．08／2同源性最高，为98．6％，与原型株BrCr／70的同源性为80．O％，与神经毒型株MS／87的同源性为86．5％。系统进化分析表明，SDLY107与中国大陆的北京株、河南株、广西株、深圳株、兰州株、阜阳株、重庆株、浙江株的亲缘关系较近，按照传统的VP1基因分型方法，可归为C4亚型，是近年来我国大陆流行的主要基因亚型。氨基酸序列分析发现，SDLY107与其他毒株相比，有2个特有的突变（E947D，K1873R）。结论SDLY107分离株属于C4亚型，氨基酸突变E947D和K1873R可能与EV71的致病性有关。
- 温红玲郝树彬高峰赵丽司鲁莹袁晓晶王东旭王志玉
- 关键词：手足口病肠道病毒71型
- 风疹病毒包膜糖蛋白E1酵母表达载体的构建被引量：1
- 2004年
- 目的:构建风疹病毒包膜糖蛋白E1的全基因片段的克隆载体和酵母表达载体。方法:应用PCR方法扩增糖蛋白E1的全长基因,并在基因两端创建相应的酶切位点。E1基因与pBluscriptⅡSK+载体均经双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109,经氨苄筛选和蓝白斑筛选并测序,建立了克隆载体pBluscriptⅡSK+鄄E1;克隆载体与表达载体pGAPZαA双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109熏经Zeocin筛选并测序。结果:PCR扩增后出现一条1.5kb的条带,体外重组技术重组于重组质粒pBluscriptⅡSK+和pGAPZαA后,经PCR、EcoRⅠ及XbaⅠ双酶切均出现相应长度的片段,测序证实为包膜糖蛋白E1的基因。结论:成功构建了含有风疹病毒包膜糖蛋白E1全基因的克隆载体及酵母表达载体。
- 温红玲王志玉王战勇任桂杰
- 关键词：风疹病毒糖蛋白类克隆载体酵母菌
- SARS病毒E蛋白基因与EGFP基因在BHK-21细胞中的融合表达
- 2004年
- 目的:构建SARS病毒E蛋白基因的真核表达载体,观察E蛋白基因在BHK鄄21细胞中的正常表达及定位。方法:用PCR方法扩增E蛋白基因,上、下游引物两端分别设计EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点,产物双酶切后定向克隆于pEGFP鄄N1载体,构建真核表达载体pEGFP鄄E,脂质体法转染BHK鄄21细胞,荧光显微镜观察E蛋白基因的表达。结果:经酶切和DNA序列测定鉴定,E蛋白基因正确插入到增强绿荧光蛋白EGFP基因上游,荧光显微镜显示E蛋白表达于细胞浆内,包膜上也有分布。结论:在BHK鄄21细胞中成功表达了SARSCovE鄄EGFP融合蛋白,蛋白定位于细胞浆内。
- 陶泽新王志玉温红玲任桂杰宋艳艳王桂亭姚苹许洪芝
- 关键词：严重急性呼吸道综合征E蛋白转染
- 2012年3月～2013年2月青岛市黄岛区肾综合征出血热流行特征
- 2016年
- 目的分析2012年3月-2013年2月青岛市黄岛区肾综合征出血热（HFRS）发病率和流行特征,为HFRS防控提供依据。方法采集黄岛地区HFRS疑似患者急性期血清106份,ELISA法检测汉坦病毒（HV）-Ig M抗体,巢式RT-PCR检测HV RNA并进行基因分型。结果在106份急性期血清中,HV-Ig M阳性20份,HV RNA阳性2份,均为汉滩型病毒（HTNV）,其中1份为双阳性,总阳性21份（19.8%）;阳性标本中,男14例,女7例;以45-59岁中壮年患者最多,有13例;秋季为发病高峰,共16例,其他季节存在散发病例;黄岛区2012年3月-2013年2月以藏南镇发病人数最多,有5例,其他各个乡镇基本均有散发病例。结论青岛市黄岛区HFRS流行主要是秋冬型,患者以中壮年男性为主。
- 张振堂方立竹薛在峰赵丽马东强温红玲刘建伟张笑爽于学杰
- 关键词：汉坦病毒血清学检测肾综合征出血热逆转录聚合酶链反应
- 不同年龄多囊卵巢综合征患者性激素结合球蛋白与激素指标、血脂指标的相关性被引量：12
- 2021年
- 目的分年龄阶段探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清性激素结合球蛋白(SHBG)与空腹胰岛素(FINS)、硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)及血脂指标的相关性。方法回顾性分析2017年1月1日至2019年8月30日在山东大学生殖医学研究中心就诊的3349例PCOS患者的FINS、性激素和血脂指标,按照SHBG的参考值下限(32.4 nmol/L)分为SHBG低值组(SHBG<32.4 nmol/L,n=1780)和SHBG高值组(SHBG≥32.4 nmol/L,n=1569),并且分别对每组进行年龄分层(<25岁、25~<30岁、30~<35岁、≥35岁)研究,分析其血清SHBG、FINS、DHEA-S及血脂指标特征。结果在<25岁、25~<30岁、30~<35岁几个年龄阶段PCOS患者中,SHBG低值组患者FINS、DHEA-S水平明显高于SHBG高值组患者,差异有统计学意义(P<0.05);且随着年龄的增长,SHBG低值组中FINS及两组中DHEA-S呈现递减趋势(P<0.05)。在<25岁、25~<30岁、30~<35岁几个年龄阶段PCOS患者中,SHBG低值组患者总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平明显高于SHBG高值组患者,差异有统计学意义(P<0.05);SHBG低值组患者高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平明显低于SHBG高值组患者,差异有统计学意义(P<0.05);且两组TC、TG、LDLC随着年龄的增长呈现递增趋势(P<0.05)。<25岁、25~<30岁和30~<35岁PCOS患者血清SHBG水平与HDLC呈正相关(P<0.05),而与FINS、DHEA-S、TC、TG、LDLC呈负相关(P<0.05)。结论PCOS患者SHBG与FINS、DHEA-S及血脂指标关系密切,SHBG水平的变化也可以作为FINS、DHEA-S和血脂变化的提示指标,为临床提早诊断及及时治疗PCOS提供重要的参考依据。
- 王鑫王鑫赵丽娟赵丽娟邹洋高选杨文荣
- 关键词：多囊卵巢综合征性激素结合球蛋白空腹胰岛素硫酸脱氢表雄酮血脂年龄
- 汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上融合肽的初步确定被引量：1
- 2009年
- 目的初步确定汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上潜在的融合肽区域。方法采用基因定点突变技术将潜在融合肽区域的十个关键氨基酸突变成性质相左的氨基酸,转染Vero E6细胞后,间接免疫荧光(IFA)检测糖蛋白表达,采用Giemsa染色法观察细胞融合现象。结果在Vero E6细胞中成功表达出糖蛋白,IFA显示关键氨基酸突变前后细胞中均有荧光信号,呈胞浆分布,但细胞融合现象在突变后消失。结论潜在融合肽区域的十个氨基酸突变均对细胞融合产生明显的影响,提示该段区域很可能是病毒的融合肽。
- 曹海霞陶泽新郑晓民刘晓丽王桂亭许洪芝温红玲宋艳艳赵丽姚苹王志玉
- 关键词：汉坦病毒包膜糖蛋白细胞融合融合肽
- 艾滋病痴呆综合征病人HIV-1tat基因多态性及氨基酸序列分析被引量：2
- 2011年
- 目的 研究艾滋病痴呆综合征患者体内HIV-1 tat第一外显子基因序列的特征和变异情况,为艾滋病痴呆综合征发病机制的研究提供依据.方法 提取1例艾滋病痴呆综合征病例尸检标本的外周组织（淋巴结、脾脏）和中枢神经组织（脑膜、额叶灰质、额叶白质、颞叶、基底核）共7个部位的基因组DNA,巢式PCR扩增HIV-1 tat第一外显子基因,与克隆载体pGEM-T连接,经转化、氨苄青霉素和蓝白斑筛选出阳性克隆,每个部位挑取5个菌落测序,测序结果利用BioEdit、MEGA4软件比对并生成系统进化树、计算基因距离和同义/非同义替换值（ds/dn）,分析氨基酸位点的改变.结果 该病例感染的病毒是HIV-1 B亚型,分离自不同组织的HIV-1 tat第一外显子基因序列存在差异;与标准序列相比,该病例的HIV-1tat第一外显子基因编码的氨基酸序列有16个位点发生了变异,并且中枢各部位部分氨基酸位点的变异与外周不同,特别是中枢基底核5个序列及颞叶1个序列Q54R的变异值得关注.结论 艾滋病痴呆综合征患者体内,HIV-1 tat第一外显子序列与标准序列存在差异,并且在外周和中枢不同部位中存在的变异不同,这些变异是否与艾滋病痴呆综合征的发病机制有关,还有待进一步研究.
- 蒲双双闫玉芬高文花温红玲王志玉宋艳艳许洪芝赵丽
- 关键词：HIV-1TAT基因多态性氨基酸序列
