徐小明
- 作品数:32 被引量:187H指数:7
- 供职机构:西北农林科技大学动物医学院国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 人类胚胎生殖细胞体外分化为心肌细胞的研究被引量:7
- 2006年
- 胚胎生殖(EG)细胞是来源于胚胎原始生殖细胞(PGCs)的多潜能干细胞。采用无饲养层细胞、无细胞因子等的基础培养液(DMEM+20%NBS+0.1mM 2Me)培养EG细胞,部分在基础培养液添加10μmol/LRA+0.75%DMSO或10μmol/L 5-氮胞苷(5-AZA)诱导人类EG细胞向心肌细胞分化,以检测其是否具有向心肌细胞自发分化的能力。9例(8.49%,9/106)胎儿EG细胞在体外分化得到20个节律性心脏跳动样细胞团,其搏动节律为20~120次/min,体外维持节律性搏动最短2d,最长至15d,呈PAS,Myoglobin,α-actin阳性;对K^+、Ca^+、肾上腺素等具有与在体心脏相似的反应性;透射电镜观察具有心肌细胞样结构。添加DMSO和RA或5-AZA诱导未得到跳动样心肌细胞,但可提高心肌α-actin免疫组织化学染色阳性率;表明人类胚胎生殖细胞具有向心肌细胞分化的潜能。
- 华进联徐小明窦忠英
- 关键词:原始生殖细胞胚胎生殖细胞心肌细胞
- 牛和人类胚胎干细胞的研究
- 窦忠英华进联钱永胜常万存雷安民高志敏李松安立龙杨奇杨春荣冯秀亮徐小明樊敬庄
- 课题建立了牛和人类胚胎干细胞分离克隆体系。在分离源于牛原始生殖细胞的胚胎干细胞的实验中,首次采用同源的牛胎儿成纤维细胞共培养的方法。在对牛胚胎干细胞进行体外分化实验,得到上皮细胞、软骨细胞、神经细胞和心脏跳动样细胞团。建...
- 关键词:
- 关键词:胚胎干细胞
- 猪卵母细胞体外成熟及电激活后发育能力的研究被引量:7
- 2006年
- 探讨了不同的成熟培养液及外源激素对猪卵母细胞体外成熟培养及电激活后孤雌胚胎发育能力的影响.结果表明:(1)改良M199(mM199)组猪卵母细胞成熟率显著高于M199组,且这两组又较NCSU-23组能极显著提高卵母细胞的成熟率.(2)孕马血清(PMSG)+人绒毛膜促性腺激素(hCG)+促卵泡素(FSH)组卵母细胞成熟率略高于FSH+促黄体素(LH)组,两者卵母细胞成熟率极显著高于尿促性腺激素(hMG)组.(3)含胎牛血清(FBS),猪卵泡液(PFF),表皮生长因子 (EGF)的培养液较对照组在卵母细胞成熟率上无显著差异,但均能显著提高电激活后的卵裂率.添加EGF组桑囊率明显高于不添加组.但分别添加FBS和PFF组较对照组在桑囊率上均无显著差异.(4)卵丘细胞扩散与卵母细胞第一极体排出之间无直接相关性,但扩散程度好能提高电激活后的卵裂率.
- 徐小明杨春荣胡军和窦忠英
- 关键词:卵母细胞体外成熟电激活
- 猪卵母细胞不同孤雌激活方法被引量:4
- 2005年
- 研究了离子霉素、电场强度、电脉冲次数和电刺激-化学联合激活对猪卵母细胞孤雌激活的影响,以出现分裂球为激活的标准。结果表明:(1)10μmol/L离子霉素处理5min的激活率62.97%(17/27)与处理10min、15min的激活率62.50%(15/24)、65.21%(15/23)差异不显著(P>0.05)。(2)以电场强度120V/mm,脉冲次数3次处理猪卵母细胞的激活率66.67%(30/45)与60V/mm、80V/mm、100V/mm的激活率40.98%(17/42)、44.11%(15/34)、46.19%(18/39)有显著差异(P<0.05),但与140V/mm、160V/mm的激活率63.89%(23/36)、64.10%(25/39)无显著差异(P>0.05)。(3)以电场强度120V/mm,不同电脉冲次数进行激活。以2次电脉冲激活猪卵母细胞的激活率67.40%(31/46)与1次、3次电脉冲的激活率62.80%(27/43)、68.30%(28/41)无显著差异(P>0.05)。(4)以电场强度120V/mm,2次电脉冲与10μmol/L离子霉素处理5min联合激活猪卵母细胞的激活率84.84%(29/33)与只用电场强度120V/mm,2次电脉冲的激活率67.64%(23/34)差异显著(P<0.05)。实验结果表明:电场强度120V/mm,2次电脉冲与10μmol/L离子霉素处理5min联合处理激活能有效提高猪卵母细胞孤雌激活的激活率。
- 胡军和徐小明杨春荣窦忠英
- 关键词:卵母细胞孤雌激活电场强度体外受精
- 影响小鼠胚胎干细胞和牛胚胎生殖细胞分离克隆的因素
- 该研究以BALB/c小鼠为材料,建立免疫外科分离克隆小鼠ES细胞方法;并以牛胎儿为材料,从牛原始生殖细胞中分离克隆出牛EG细胞.对影响小鼠ES细胞、牛EG细胞分离与克隆的影响因素进行了探讨,为进一步建立小鼠ES及牛EG细...
- 徐小明
- 关键词:胚胎干细胞胚胎生殖细胞原始生殖细胞
- 文献传递
- 雌激素受体及其作用机制被引量:35
- 2004年
- 目前对雌激素受体结构和功能的研究比较深入,雌激素受体与肿瘤发生机制、雌激素受体在体内的表达调控及其分子作用机理已引起人们的广泛关注。针对这一现状,对雌激素受体的结构和功能,雌激素受体在体内的分布及其作用机制、应用前景等方面的研究进展进行了综述。
- 赵晓民徐小明
- 关键词:雌激素受体甾体激素
- 胎猪骨髓间充质干细胞核移植及核移植胚胎干细胞的分离
- 本研究以猪不同类型的细胞为供核细胞,体外成熟去核卵母细胞为受体胞质在体外构建胚胎,建立了体外生产体细胞核移植胚胎的技术体系,为体细胞克隆猪及核移植源胚胎干细胞(ntESCs)系的分离提供良好的平台。论文主要从以下5个方面...
- 徐小明
- 关键词:体细胞核移植骨髓间充质干细胞胚胎干细胞胎儿成纤维细胞
- 文献传递
- 牛胚胎干细胞的研究
- 窦忠英华进联李松徐小明钱永胜雷安民高志敏安立龙杨奇杨春荣樊敬庄
- 胚胎干细胞(ES细胞)是自附置前早期胚胎或附置后胚胎原始生殖细胞分离克隆的一种具有自我更新和全向分化能力的细胞。ES细胞既象培养的一般体细胞一样可扩增、遗传操作选择和冻存,又类似于早期胚胎细胞,含有正常的二倍体核型,具有...
- 关键词:
- 关键词:分离克隆体外分化胚胎克隆
- 胚胎干细胞与胚胎生殖细胞被引量:7
- 2002年
- 胚胎干细胞与胚胎生殖细胞同属于胚胎源的多潜能干细胞。胚胎干细胞是从附置前胚胎内细胞团分离而来的,而胚胎生殖细胞来自胎儿原始生殖细胞。二者在现代生命科学的各个领域都有着广阔的应用前景。对胚胎生殖细胞的特性,胚胎干细胞与胚胎生殖细胞的异同以及二者的应用前景作一综述。
- 徐小明杨炜峰窦忠英华进联
- 关键词:胚胎干细胞胚胎生殖细胞多潜能干细胞
- 牛胎儿成纤维细胞分离与体外培养被引量:3
- 2004年
- 本研究以 4 5d牛胎儿为材料 ,使用 0 .2 5 %胰酶 + 0 .0 4 %EDTA消化液 ,分离得到牛胎儿成纤维细胞 ,体外培养传代至第 2 8代。本实验描绘出牛胎儿成纤维细胞生长曲线 ,并发现α MEM是一种适合牛胎儿成纤维细胞生长的培养基。分离得到的牛胎儿成纤维细胞传至第 1 8代时核型仍然正常 ,冷冻。
- 徐小明窦忠英华进联葛秀国
- 关键词:畜牧兽医科学基础学科胎儿成纤维细胞体外培养