刘建
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 大规模提取体内治疗用单克隆抗体的工艺被引量：1
- 1998年
- 用两步法从WuT3细胞培养上清中提取WuT3单克隆抗体（McAb），首先将培养上清直接上SP离子交换柱，再上DEAE柱，获取提纯的McAb。该工艺的确定及放大均在Pharmacia产Biopilot中试纯化系统上进行。一次投料20L，纯化规模达2g，纯化的McAb经SDS－PAGE测定，纯度基本达到95％，免疫荧光活性为66±9％。热原质合格，支原体、残余DNA均为阴性，达到体内制剂质控要求。
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- 关键词：单克隆抗体
- 应用生物反应器大规模培养杂交瘤细胞生产体内治疗用WuT3单克隆抗体被引量：6
- 1998年
- 用3．5L和14L生物反应器培养WUT3杂交瘤细胞，结果表明用人血清可以代替牛血清培养WuT3细胞，在1％人血清培养液中添加适当营养成分，可达到10％小牛血清浓度下的细胞浓度（1．5×106／ml）和单抗产量（大于50μg／ml）。放大到75L生物反应器中采用半连续方式培养，建立了中试培养工艺流程和质控点，收获时细胞浓度为1.0×106～1．5×106／ml，单抗产量为40～70μg／ml，平均日产单抗达1g。在3．5L、14L、75L逐级放大培养过程中，细胞支原体为阴性，收获上清中单抗免疫活性合格，热原试验合格。
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- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体生物反应器
- 康赛宁对体外培养的人肝癌细胞的影响及与乙肝疫苗联合免疫对小鼠的免疫增强作用
- 2006年
- 目的研究A群溶血性链球菌制剂(康赛宁)对体外培养的人肝癌细胞系Hep3B和HepG22.2.15的影响及与乙肝疫苗联合免疫对小鼠的免疫增强作用。方法用不同浓度的康赛宁作用于人肝癌细胞Hep3B和HepG22.2.15,观察细胞形态学,MTT比色法检测细胞活性,EIA法检测培养上清HBsAg、HBeAg含量,吖啶橙直接染色检测细胞凋亡,Southernblot分析细胞DNA片段。给NIH小鼠腹腔注射康赛宁和乙肝疫苗,检测血清中HBs抗体、转氨酶水平。给普通小鼠腹腔注射康赛宁和乙肝疫苗,观察注射前后的体重变化。结果康赛宁可抑制HBsAg及HBeAg的分泌,使染色体DNA发生有规律的断裂,促使细胞发生凋亡。与乙肝疫苗联合免疫,可提高小鼠血清中HBs抗体水平。无论单用或合用康赛宁,对小鼠均无明显毒副作用。结论康赛宁对体外培养的人肝癌细胞系有影响,与乙肝疫苗联合免疫对小鼠有免疫增强作用。
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- 关键词：康赛宁人肝癌细胞免疫增强作用体外培养
