刘佳文 作品数:11 被引量:57 H指数:5 供职机构: 首都医科大学附属北京胸科医院 更多>> 发文基金: 军队杰出人才基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
hsp65基因序列PCR-RFLP法鉴定130株临床分枝杆菌研究 被引量:3 2006年 目的探讨hsp65基因序列PCR-RFLP法用于临床分枝杆菌鉴定的诊断价值。方法用hsp65基因序列PCR-RFLP法鉴定经过传统方法鉴定过的130株临床分枝杆菌。结果130株临床分枝杆菌中,鉴定出结核分枝杆菌105株,戈登分枝杆菌4株、瘰痢分枝杆菌3株、耻垢分枝杆菌1株。用PCR-RFLP法,偶然分枝杆菌复合群和鸟胞分枝杆菌复合群进一步鉴定,偶然分枝杆菌2株、脓肿分枝杆菌2株、龟分枝杆菌4株、鸟分枝杆菌5株、胞分枝杆菌4株。结论hsp65基因序列PCR-RFLP法比传统方法有更高的准确性、敏感性、特异性和重复性,具有很好的临床应用价值。 刘佳文 吴雪琼 杨京灵关键词:PCR-RFLP 分枝杆菌 embB基因突变与结核分支杆菌耐乙胺丁醇的关系 被引量:8 2001年 吴雪琼 梁建琴 李洪敏 张俊仙 由昆 金关甫 刘佳文 闫国蕊关键词:EMBB基因突变 结核分支杆菌 耐药性 乙胺丁醇 结核病 RIFO杂交和限制性片段长度多态性检测耐利福平和异烟肼的结核分枝杆菌 被引量:2 2007年 目的评价利福平寡核苷酸探针杂交技术(RIFO 杂交)和 PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)在结核分枝杆菌(MTB)耐利福平(RIF)和异烟肼(INH)快速检测中的应用价值。方法选取121株北京地区 MTB 菌株,分别采用 RIFO 杂交技术和 PCR-RFLP 检测 RIF 耐药相关基因 rpoB 核心区和 INH 耐药相关基因 katG315位点突变,并对所有菌株的 rpoB 基因核心区进行测序验证。结果 RIFO 杂交检测发现,91.5%(65/71)的 RIF 耐药株和92.9%(52/56)的耐多药菌株(至少对 RIF 和 INH 耐药)存在 rpoB 基因核心区突变,而 RIF 敏感株中未发现突变;RIFO 杂交与测序结果完全一致,测序结果中有突变的位点在 RIFO 杂交中均有相应的野生型杂交信号缺失;PCR-RFLP 结果显示,INH 耐药株中 katG315突变率为60.6%(40/66)。结论 rpoB 基因核心区可作为 RIF 耐药检测的分子标志及耐多药的筛选指标;RIFO 杂交技术是检测 MTB 耐 RIF 的快速、准确的实验方法,具有推广及潜在的临床应用价值;PCR-RFLP 可检测出大部分 INH 耐药株,可作为临床 INH 耐药性检测的辅助手段。 焦伟伟 Igor Mokmusov 孙桂芝 李墨 刘佳文 Olga Narvskaya 申阿东关键词:分枝杆菌 结核 利福平 异烟肼 无细胞短棒状杆菌纳米级制剂抗结核作用及机理研究 被引量:5 2003年 目的:研究无细胞短棒状杆菌纳米级制剂(NCPP)体内抗结核作用及机理。方法:NCPP各剂量组与乌体林斯组豚鼠皮下攻击结核杆菌H37RV后,第3,10,17d肌肉注射给药,于5,7,9周分3批处死动物,取脾查活菌分离数,并做病理镜检。另取小鼠腹腔注射NCPP 10d后测定腹腔巨噬细胞(Mφ)吞噬率、吞噬指数、过氧化氢(H2O2)和一氧化氮(NO)水平及脾T细胞增殖指数。结果:NCPP各剂量组豚鼠脾活菌数于5,7,9周时明显低于对照模型组(P<0.05),与对照药乌体林斯组相近。亦可减轻结核特异性病理改变。此外,NCPP各剂量组小鼠腹腔Mφ上述各项指标均显著提高(P<0.01),但脾脏T细胞增殖指数无明显变化。结论:NCPP对结核杆菌感染的豚鼠模型具有明显的免疫治疗作用,其机理主要是通过激活Mφ,且使其产生过氧化氢、一氧化氮水平明显提高.达到杀灭结核杆菌的目的。 高尚先 马海战 马淑萍 郭威 康国华 米增仁 刘佳文 宋静 张利宁 李守悌关键词:结核病 免疫调节剂 巨噬细胞 耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株耐药基因突变及其分子流行病学调查研究 被引量:4 2007年 目的阐明结核分枝杆菌耐异烟肼临床分离株katG基因突变特点以及Spoligotyping分型和结核病流行关系。方法对123株结核分枝杆菌临床分离株,其中有药敏结果的98株,(耐异烟肼菌株45株;异烟肼敏感株53株)的katG基因进行DNA片断扩增然后进行SSCP分析;同时对其中的121株菌株进行Spoligotyping分型。结果45株耐INH结核杆菌株中,27株(60%)第315位点突变,低耐药菌株(1mg/L)第315位点突变率显著高于高耐药菌株(10mg/L;53株敏感株中无KatG基因315位密码子突变。对121株临床株的SpoligotypingDNA指纹分析,1型,(北京型)103株占84%(103/121),其它基因型18株,分散在13种基因型中。结论本项研究进一步证实了结核分枝杆菌耐异烟肼与katG基因突变之间的关系;北京型感染是北京地区结核病流行的重要原因。 刘佳文 申阿东 孙桂芝关键词:异烟肼 KATG基因 扶正益气合剂抗结核分枝杆菌活性的初步研究 被引量:5 2001年 郭威 刘佳文 马伟路关键词:结核病 中医药治疗 抗结核分枝杆菌 应用反向线性杂交技术快速检测结核分枝杆菌利福平耐药性研究 被引量:4 2007年 探讨反向线性杂交技术(reverse line blot assay,RLB)在结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药性快速检测中的应用价值。采用RLB将包含rpoB基因核心区的扩增产物与标记特异性探针的膜进行杂交,共对121株结核分枝杆菌进行RFP耐药性检测,并将结果与常规药敏实验进行比较。结果发现,121株中有71株对RFP耐药,56株为多重耐药株;采用RLB共检测到65株RFP耐药株rpoB基因核心区存在突变,其灵敏度为91.5%(65/71);50株RFP敏感株中均未检测到突变,则特异性为100%(51/51);56株多耐药菌株中,92.9%(52/56)存在rpoB基因核心区突变。因此,用RLB检测结核分枝杆菌RFP耐药株具有快速,高效,特异性和灵敏度高的优点,且可用于多耐药菌株的筛选,具有推广和潜在的临床应用价值。 焦伟伟 李墨 Igor Mokrousov 孙桂芝 刘佳文 Olga Narvskaya 申阿东关键词:分枝杆菌 利福平 耐药 RPOB基因 分枝杆菌特殊DNA序列检测及其在分类鉴定中的应用进展 被引量:1 2001年 分子生物学技术已应用于分枝杆菌菌种快速鉴定。目前分子鉴定靶序列主要有四种 :即hsp6 5基因、dnaj基因、16SrRNA基因、16S 2 3SrDNA间隔区序列。其他一些序列如IS6 110、mce基因内 45 3bp重复序列、SenX3 RegX3IR、mtp40、DT1/DT6 ,属于种特异性或群特异性DNA序列。 刘佳文 庄玉辉关键词:分枝杆菌 菌种鉴定 DNA序列 聚合酶链反应 住院肺结核病人并嗜肺军团杆菌肺炎的临床观察 2001年 目的 了解住院肺结核病人嗜肺军团杆菌感染的情况及探讨肺结核合并军团菌肺炎的特点。方法 对 2 85例住院肺结核病人并肺内感染者 ,进行嗜肺军团菌血清抗体法检查 (血试管凝集法 )。结果 住院肺结核病人嗜肺军团杆菌感染占肺结核并肺内感染中的 2 .5 % (7 2 85 ) ,所有患者均采用红霉素治疗 ,疗程为 3~ 4周 ,同时服用利福平 (其中 1例因为耐多药结核 ,未服用RFP) ,均临床治愈出院。结论 住院肺结核病人并军团菌肺炎患者虽较少 ,确诊后治疗效果也较好 ,但也应引起重视 ,以减少误诊。 夏东 刘佳文 罗智关键词:肺结核 嗜肺军团杆菌 分支杆菌 肺炎 16SrRNA基因序列在分枝杆菌分类鉴定的研究进展 被引量:15 2001年 16SrRNA基因序列高度保守 ,其核苷酸位点的变化具有种的特异性 ,用分子生物学技术分析 16SrRNA基因 ,能够将分枝杆菌鉴定到种的水平。本文就用 16SrRNA基因进行PCR扩增、DNA直接测序、限制性酶切片段长度多态性 (RFLP)分析。 刘佳文 吕红艳 等关键词:RRNA基因 分枝杆菌 PCR 核糖核酸