何英华
- 作品数：14 被引量：24H指数：3
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝与肝癌基因表达谱差异的研究被引量：2
- 1999年
- 筛选肝癌与正常肝基因表达差异克隆。方法应用Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ膜片分别与肝癌和正常肝组织ｍＲＮＡ进行杂交，比较杂交信号，获得表达差异克隆。结果在正常肝中共有９９０个基因表达，其中２５５个较高表达。４２５个ｃＤ┐ＮＡ克隆在正常肝中的表达高于肝癌，其中３３个有较大差异。１９０个ｃＤＮＡ克隆在肝癌中的表达高于正常肝，其中６０个有较大差异。在这些差异克隆中，鉴定出有些是已被他人证实在其它癌中有差异的已知基因。结论应用大规模筛选表达差异的Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ方法，获得了肝与肝癌表达差异的基因克隆。
- 赵新泰何英华黄戈张萍萍万大方蒋惠秋顾健人
- 关键词：肝肿瘤基因克隆MICROARRAY
- 染色体17p13.3区段肝癌等恶性肿瘤相关基因群的分离与功能研究
- 顾健人万大方赵新泰何玫覃文新李锦军何英华黄薇
- 1996年10月-2003年7月，由国家“863”高新技术发展规划资助，进行了研究。以中国高发肿瘤之一的肝癌为材料，用微卫星(MSA)和比较基因组杂交(CGH)法完成了60例肝癌样本的全基因组扫描，确定基因组不稳定的最高...
- 关键词：
- 关键词：染色体肝癌恶性肿瘤
- 肝癌中具有高突变率位于染色体17p13.3区的新抑癌基因被引量：2
- 2002年
- 目的 以往研究表明肝癌中染色体 1 7p1 3 .3区有高频率的杂合性缺失。其最小杂合性缺失范围已被确定在D1 7S643至D1 7S1 574位点间 ,而且其中的D1 7S92 6位点有最高的杂合性缺失率。含有该位点的基因组克隆P579已被测序分析 ,在P579范围共有 1 3个新基因。这里报告其中的一个新基因 (命名为肝癌抑癌基因 1 ,HCCS1 )的克隆和特性研究结果。方法 利用直接杂交筛选方法获得基因组克隆P579中的基因克隆。根据HCCS1基因克隆的cDNA序列与基因组序列进行比较确定基因的外显子与内含子。应用RT PCR扩增组织中的HCCS1基因 ,序列测定检查突变。应用免疫组化检测HCCS1在组织中的表达。应用克隆形成试验和裸鼠成瘤试验检测HCCS1的生物学功能。结果 HCCS1有 1 8个外显子 ,cDNA全长约2 .0kb ,蛋白产物定位于线粒体。HCCS1在肝癌组织中有高频率的突变 ,免疫组化检测表明HCCS1在癌旁组织的表达明显高于癌组织。HCCS1转染肝癌细胞明显抑制其克隆的形成及在裸鼠体内的成瘤。
- 赵新泰李锦军何英华过建英赵瑞皎叶芸万大方顾健人
- 关键词：肝细胞癌抑癌基因染色体基因克隆免疫组化法
- 肝癌染色体17p13.3区的杂合性缺失分析及缺失区连续克隆群的构建被引量：6
- 2000年
- 目的 检测原发性肝癌在染色体 17p13.3区的杂合性缺失状况 ,确定其共同缺失范围和最小热点缺失范围 ,并获得缺失范围内基因组克隆和构建连续克隆群。方法 应用Southern杂交分析VNTR(variablenumberoftandemrepeat,VNTR)和RFLP标志在肝癌中杂合性缺失 (LOH)状况。应用PCR扩增微卫星标志 ,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析各个微卫星标志的LOH状况。以微卫星标志为引物 ,经过 3轮PCR筛选阳性基因组克隆。通过检测各位点标志对基因组克隆的反应 ,构建连续克隆群。结果 检测了 5 4份原发性肝癌样品在染色体 17p13.3区 16个位点标志和染色体 17p13.1区的p5 3基因的TP5 3位点标志的LOH情况 ,发现从D17S5位点至D17S34位点间的各个标志都有较高LOH ,频率 >6 3%。而从D17S5位点起、近着丝粒方向的 3个标志LOH率都较低或无LOH。染色体17p13.1的TP5 3标志只有 31%的LOH ,低于染色体 17p13.3区的D17S5至D17S34位点间各标志的LOH率。有 2例肝癌样品在近端粒的D17S34、D17S186 6位点和近着丝粒的D17S5、D17S15 74位点均无LOH ,但在D17S849至D17S15 74间的各位点上均呈LOH或为纯合子。在缺失范围内 ,共筛选了 18个位点的基因组克隆 ,获得了相对应的阳性基因组克隆 ,经过检测各位点对基因组克隆的反应性 ,构建了覆盖
- 赵新泰万大方蒋惠秋何英华覃文新Paul Watkins顾健人
- 关键词：肝癌杂合性缺失
- 肝癌中Sall3基因甲基化的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:检测Sall3基因在肝癌细胞系和肝癌组织中的甲基化状况及其表达水平。方法:对7株肝癌细胞系、142对肝癌组织和6例正常肝组织进行Sall3基因启动子区域甲基化检测。甲基化研究使用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP),基因表达水平研究采用实时定量反转录PCR(real-time RT-PCR)。结果:MSP结果显示,7株肝癌细胞株中有6株Sall3基因的启动子区域为纯合甲基化,1株为纯合去甲基化;在6例正常肝组织中Sall3均为纯合去甲基化;在142对肝癌组织标本中,癌旁组织Sall3基因启动子区域甲基化率为18.31%,在癌组织中为64.79%。real-time RT-PCR结果显示,肝癌肿瘤细胞系Sall3mRNA的表达水平明显低于去甲基化的正常肝组织。结论:Sall3基因启动子甲基化在正常肝组织、肝癌组织(和肝癌细胞系)中有明显差异。
- 夏卫倪唯益费琦孙晋枫赵仰星张宏宇顾峻何英华余坚
- 关键词：肝癌甲基化特异性聚合酶链反应
- ABCC8、CHFR、BMP3B、LOX、PRSS21和RASSF1A基因启动子的甲基化状态可能与3种乳腺癌细胞株对5-FU的敏感性相关被引量：6
- 2009年
- 目的:寻找与乳腺癌细胞株间药物敏感性差异相关的基因启动子CpG岛甲基化异常,为DNA甲基化异常作为临床化疗敏感性预测手段提供依据。方法:用MTT法测定3种乳腺癌细胞株(Bcap-37、T47D和ZR-75-30)对9种化疗药物(紫杉醇、紫杉特尔、长春瑞宾、5-氟尿嘧啶(5-FU)、双氟去氧胞苷、表阿霉素、丝裂霉素、依立替康和顺铂)的敏感性;同时用甲基化特异性PCR检测23个基因在3种乳腺癌细胞株中的甲基化状态。结果:受试的3种乳腺癌细胞株仅对5-FU的敏感性有明显差异。其中Bcap-37(IC50:317.386μg/mL)对5-FU相对耐药,而ZR-75-30(IC50:6.676μg/mL)和T47D(IC50:73.076μg/mL)对5-FU相对敏感。23个基因中,有6个基因:ABCC8、CHFR、BMP3B、LOX、PRSS21和RASSF1A在敏感和耐药细胞株中的甲基化状态有差异。其中ABCC8、CHFR和BMP3B在5-FU耐药细胞株中呈相对高甲基化状态,而LOX、PRSS21和RASSF1A则在对5-FU敏感的细胞株中呈相对高甲基化状态。结论:本研究所发现的6个基因的甲基化状态可能与乳腺癌细胞株对5-FU化疗敏感性相关,为下一步进行临床评估和机制探讨提供了依据。
- 蔡飏孙晋枫黄朝晖余坚何英华戴信兰周小羽徐慧莉顾峻张红宇胡夕春朱景德
- 关键词：甲基化特异性聚合酶链反应
- 尿液诊断膀胱癌患者复发危险性的方法和试剂盒
- 本发明涉及尿液诊断膀胱癌患者复发危险性的方法和试剂盒。本发明公开了2个甲基化敏感基因，它们是LMX1A、VAX1基因。在检测膀胱癌病人手术前留存尿样，上述基因特定CpG位点在随访确定的复发人群中发生高度甲基化。因此，这2...
- 余坚王红阳顾健人赵仰星孙晋枫张红宇顾峻王韦何英华郭士成
- 文献传递
- 一种高通量多样本多靶点单碱基分辨率的甲基化水平检测方法
- 本发明涉及一种高通量多样本多靶点单碱基分辨率的甲基化水平检测方法。本发明还提供了适用于进行人基因组CpG甲基化水平测序的BSP引物。本发明的方法适用于微量样品的基因组DNA检测，本发明的方法不仅可实现高通量检测，而且检测...
- 余坚高维强赵仰星孙晋枫张红宇顾峻何英华王韦
- 文献传递
- 尿液诊断膀胱癌患者复发危险性的方法和试剂盒
- 本发明涉及尿液诊断膀胱癌患者复发危险性的方法和试剂盒。本发明公开了2个甲基化敏感基因，它们是LMX1A、VAX1基因。在检测膀胱癌病人手术前留存尿样，上述基因特定CpG位点在随访确定的复发人群中发生高度甲基化。因此，这2...
- 余坚王红阳顾健人赵仰星孙晋枫张红宇顾峻王韦何英华郭士成
- hedgehog信号通路的负调控基因在早期非小细胞肺癌中的甲基化状态及其意义被引量：2
- 2013年
- 目的:研究hedgehog信号通路的负调控基因生长停顿特异蛋白1(growth arrest specific1,GAS1)、人类hedgehog相互作用蛋白(human hedgehog interacting protein,HHIP)和patched1(PTCH1)在早期非小细胞肺癌(NSCLC)中的甲基化状态并初步探讨此3个基因对早期NSCLC的诊断价值。方法:收集Ⅰ期NSCLC患者85例(NSCLC组)并以同期住院的23例非肿瘤性肺部疾病患者作为对照组。采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)检测GAS1、HHIP和PTCH1在5个NSCLC细胞株A549、NCI-H1299、NCI-H460、LTEP-a-2、SPC-A-1中的甲基化状态及其在NSCLC组患者的肺癌组织中、对照组的肺部病变组织中的甲基化状态;分析3个基因诊断Ⅰ期NSCLC的敏感性和特异性。结果:hedgehog信号通路的3个负调控基因除在NCI-H1299中均呈去甲基化状态外,在其他4个肺癌细胞株中均有1～2个基因呈甲基化状态。GAS1、HHIP和PTCH1在NSCLC组的甲基化率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。GAS1用于临床Ⅰ期NSCLC诊断时敏感性和特异性分别为69.41%、69.57%;HHIP分别为49.41%、82.61%;PTCH1则分别为34.12%、100.0%。结论:PTCH1、HHIP和GAS1在Ⅰ期NSCLC中存在显著的异常甲基化,提示hedgehog的异常激活可能参与了NSCLC的发生和发展。对3个基因在早期NSCLC患者血浆游离DNA中甲基化状态的进一步研究可望为NSCLC的早期诊断提供新的肿瘤分子学标志物。
- 耿峻峰孙晋枫林强顾峻赵仰星王韦张红宇何英华余坚
- 关键词：非小细胞肺癌HEDGEHOG信号通路甲基化
