何智妍
- 作品数：34 被引量：68H指数：5
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市青年科技启明星计划上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程建筑科学更多>>
- 牙龈素提取物对小鼠脑神经炎症的影响被引量：1
- 2022年
- 目的·观察牙龈素提取物对小鼠脑神经炎症的影响。方法·采用超声破膜结合低温超速离心,并通过超滤浓缩的方法从牙龈卟啉单胞菌ATCC33277获得牙龈素提取物。对牙龈素提取物进行蛋白定量后行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,经湿转法转移至聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)膜,封闭后分别使用赖氨酸特异性牙龈素(lysine-gingipain,Kgp)抗体和精氨酸特异性牙龈素(arginine-gingipain,Rgp)抗体对样本进行孵育,以检测提取物中的牙龈素免疫原性。通过向C57BL/6N小鼠腹腔注射牙龈素提取物建立小鼠牙龈素急性感染模型。在小鼠腹腔注射牙龈素提取物后的不同时间点,分别采用针对Kgp和Rgp的特异性荧光底物Z-His-Glu-Lys-MCA和Boc-Phe-Ser-Arg-MCA检测小鼠血浆中2种牙龈素的活性。将40只C57BL/6N小鼠随机分为4组,分别为对照组、牙龈素组、牙龈素+Kgp抑制剂(COR388)组和COR388组。预先给予COR388处理1 h后,再腹腔注射牙龈素提取物,24 h后麻醉下取材,脑组织经固定、脱水、包埋、切片等步骤后,分别使用离子钙适配分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)抗体和神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)抗体标记小鼠大脑皮层小胶质细胞和星形胶质细胞,采用免疫组织化学技术观察上述4组小鼠大脑皮层小胶质细胞及星形胶质细胞的激活情况。采用酶联免疫吸附测定检测大脑皮层肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平。结果·蛋白质印迹分析显示,该牙龈素提取物在截留分子量50000和70000附近有较清晰的条带,表明该提取物具有牙龈素免疫原性。此牙龈素提取物具有生物活性,腹腔注射牙龈素提取物后,小鼠血浆牙龈素活性呈现先升后降的趋势。腹腔注射牙龈素提取物后4~8 h,小鼠血浆牙龈素活性达到峰值,随后逐渐下降。免疫组织化学结�
- 张桓瑜江旖婷朱晓晨何智妍周薇宋忠臣
- 关键词：牙龈卟啉单胞菌神经炎症
- 不同方法提取和测定粪肠球菌生物膜总蛋白含量的比较被引量：1
- 2013年
- 目的:以标准菌株ATCC33186为例,用超声破碎法提取粪肠球菌生物膜中总蛋白,结合3种不同方法测定总蛋白的含量,确定一种简单快速有效的检测细菌生物膜中总蛋白含量的方法。方法:将培养24h的生物膜加入PBS缓冲液清洗后,使用超声破碎法提取生物膜中总蛋白,选择作用时间、振幅Amp、超声和间隔时间等参数进行超声破碎,结合SDS-PAGE凝胶电泳分析蛋白电泳图谱确定最佳超声条件后,确定最佳超声条件后,使用BCA法、考马斯亮蓝Bradford法和Lowry法测定生物膜中总蛋白含量,对结果进行比较分析。结果:最佳超声破碎条件参数:作用时间2min,振幅Amp20%,超声2s间隔2s。用BCA法测得总蛋白含量每皿为2299.1μg,考马斯亮蓝Bradford法测得含量为每皿3793.8μg,Lowry法测定含量为每皿1858.0μg。结论:确定超声破碎提取粪肠球菌生物膜蛋白的最优化条件,是一种简单可行测定细菌生物膜中总蛋白含量的方法。
- 何智妍梁景平黄正蔚姜云涛姜葳
- 关键词：粪肠球菌生物膜超声蛋白
- 呋喃C-30对变异链球菌生物膜早期形成的影响
- 2012年
- 目的:探讨密度感应拮抗剂呋喃C-30对变异链球菌生物膜早期形成的影响。方法:将体外合成的密度感应拮抗剂呋喃C-30按终浓度10、100μmol/L分别配制于含变异链球菌的牛心脑浸液培养基,37℃微需氧培养24h,形成生物膜后,用生物膜定量分析仪检测生物膜形成的量。结果:100μmol/L呋喃C-30组变异链球菌生物膜的形成受到显著抑制,磁珠成像开始减弱和完全消失的时间均迟于对照组;生物膜开始形成后,其生物膜形成指数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:呋喃C-30在100μmol/L浓度时能有效抑制变异链球菌生物膜的形成,其应用可能为龋病防治提供新的思路。
- 王玉霞王倩胡曰健马瑞唐子圣朱彩莲何智妍黄正蔚
- 关键词：变异链球菌生物膜
- 干细胞表面标志物在牙髓干细胞中的表达被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨磁珠分选后培养的人牙髓干细胞的表面标记抗原随培养代数增加的变化情况。方法:改良组织块法培养的人牙髓细胞,至第2代(P2)时,用磁珠方法分选出STRO-1阳性细胞,用流式细胞术分别检测P2、P3、P4、P5、P6、P7、P8代的干细胞表面标志物CD73、CD90、CD105、CD166、STRO-1。取P3代细胞,分别进行成骨诱导和成脂诱导。21 d后,分别行茜素红染色和油红O染色,观察矿化物形成情况和脂滴形成情况,同时以未诱导细胞为对照。结果:STRO-1在牙髓干细胞表面随代数增加而下降,CD73、CD90、CD105、CD166的表达比较稳定,茜素红染色可见矿化结节形成,油红O染色显示形成大量脂滴。结论:STRO-1在牙髓干细胞表面随代数增加而下降,其他干细胞标志物比较稳定。
- 高丽江文欣牛晨光何智妍朱彩莲黄正蔚
- 关键词：牙髓干细胞磁珠分选间充质干细胞表面标志物
- 密度感应拮抗剂C-30对变异链球菌生物膜的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:研究密度感应拮抗剂呋喃C-30对变异链球菌生物膜形成的影响。方法:将已合成的密度感应拮抗剂呋喃C-30用BHI培养基配制至终浓度分别为2.0,4.0μg/mL,再加入新鲜培养的变异链球菌液,37℃微需氧培养24 h,在96孔板上形成体外生物膜,用MTT法检测生物膜的量。激光共聚焦显微镜观察不同浓度呋喃C-30处理后的生物膜结构。实验中以不含呋喃C-30的BHI培养基作为阴性对照。结果:实验发现呋喃C-30不会对变异链球菌的生长产生影响,但随着呋喃C-30的浓度增加,变异链球菌形成生物膜的量显著降低(P<0.05);激光共聚焦显微镜的结果也表明呋喃C-30浓度的增加使生物膜菌间结构变得稀疏,集聚程度明显减轻。结论:密度感应拮抗剂呋喃C-30能有效抑制变异链球菌生物膜的形成。
- 何智妍黄正蔚
- 关键词：变异链球菌生物膜
- 慢性根尖周炎感染根管内中间普氏菌基因多态性研究被引量：13
- 2012年
- 目的:研究慢性根尖周炎感染根管内中间普氏菌是否存在基因多态性。方法:选择13例慢性根尖周炎患者,分别取其感染根管内样本,分离培养,经中间普氏菌特异引物PCR鉴定的克隆,再利用随机引物PCR(AP-PCR)检测其基因多态性。结果:13例慢性根尖周炎样本中3例分离出中间普氏菌,共95株,并检测出3种基因型,其中A、B、C样本各检出一种基因型。结论:慢性根尖周炎患者感染根管内中间普氏菌存在基因多态性。
- 邹岩漆正楠尹君黄正蔚何智妍朱彩莲唐子圣
- 关键词：慢性根尖周炎中间普氏菌基因多态性
- 变异链球菌社会欺骗行为规避模式的观察研究
- 2011年
- 目的:研究生物膜内变异链球菌及其欺骗株密度感应社会欺骗行为的规避模式。方法:通过接种不同比例的欺骗株与野生株进行共同培养构成生物膜,以及将不同细胞量的欺骗株接种入由野生株结成的生物膜中,在混合群体中观察欺骗株定植情况,从而了解欺骗株对整个群体的影响程度。结果:按1∶1000、1∶100、1∶10、1∶1的比例接种欺骗株与野生株菌液,共同培养构成的生物膜中各菌株的活菌计数之比分别为1∶10477、1∶36、1∶28、1∶11;选择细菌密度约为2×106、2×107、2×108、2×109 CFU/ml的欺骗株,接种80μl菌液至野生株已形成的生物膜中,共培养24 h后欺骗株与野生株的活菌计数之比分别为1∶29878、1∶15、1∶13、1∶8。结论:变异链球菌的欺骗株未能在自然生态中获得定植,该菌形成的生物膜种群可有效规避社会欺骗行为。
- 何智妍黄正蔚
- 关键词：变异链球菌生物膜
- 变异链球菌luxS基因对牙菌斑生物膜的影响
- <正>目的:研究致龋菌变异链球菌luxS基因对口腔常见细菌混合培养形成牙菌斑生物膜的影响。方法:将变异链球菌野生株(UA159)及其两种lux S基因突变株(lux S基因高表达株和lux S基因缺陷株)与口腔常见细菌粪...
- 何智妍周薇姜葳黄正蔚
- 关键词：口腔细菌变异链球菌LUXS基因牙菌斑生物膜
- 文献传递
- 碱性环境对粪肠球菌生物膜胞外蛋白和多糖的影响
- 目的：比较不同碱性条件对粪肠球菌生物膜胞外蛋白和多糖的影响。材料及方法：(1)将过夜培养的新鲜粪肠球菌菌液接种至pH值分别为9、10和ii的培养基37度体外培养生物膜,24小时后得到不同碱性条件下形成的粪肠球菌生物膜；(...
- 何智妍梁景平黄正蔚姜云涛姜葳
- 关键词：粪肠球菌碱性条件生物膜
- 粪肠球菌luxS基因缺陷菌株的构建
- 目的：通过同源重组方法构建粪肠球菌密度感应调控基因luxS基因缺陷突变菌株.方法：利用PCR扩增粪肠球菌luxS基因的上下游片段(up、dn)口红霉素抗性基因片段(erm),通过1％琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物,用胶...
- 何智妍周薇程岚王玉霞黄正蔚
- 关键词：粪肠球菌生物膜LUXS基因
