任瑞文
- 作品数：76 被引量：237H指数：7
- 供职机构：广州军区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 登革病毒单克隆抗体制备及其生物学性状分析
- 目的筛选鉴定抗登革1~4型病毒单克隆抗体,并对其亚型、免疫学交叉反应及病毒中和能力进行分析。方法登革1~4型病毒乳鼠脑悬液混合后免疫BALB/c小鼠,经PEG融合、免疫荧光筛选及3轮有限稀释法单克隆化后,筛选抗登革病毒单...
- 杨柳张培任瑞文朱明星王吉江王焕峰刘建伟
- 关键词：登革病毒单克隆抗体中和抗体
- 文献传递
- 提高RAPD稳定性的几点经验与探讨被引量：71
- 2001年
- 任瑞文卢强徐晓立
- 关键词：RAPD技术稳定性
- 微孔杂交检测登革病毒及其分型方法的建立被引量：3
- 2006年
- 目的建立特异、敏感、实用的登革病毒检测及分型方法。方法分析登革1￣4型病毒基因组序列,分别设计针对登革病毒1￣4型的特异性包被探针,扩增、克隆测序后包被聚乙烯微孔板。PCR上游引物5'端标记生物素,对待检样品进行扩增后用作检测探针进行微孔杂交(PCR-ELISA)反应,并通过设定不同的包被DNA浓度、包被时间、杂交温度、杂交时间,对PCR-ELISA反应进行优化。结果建立了快速、特异、敏感的登革病毒快速检测及分型方法,试验结果直观,阳性标本吸光度值在0.5以上,阴性结果吸光度值在0.1以下,S/N值在10以上。结论所建立的方法可用作登革病毒感染的早期诊断及分型。
- 任瑞文徐晓立李建军方美玉刘建伟马安德
- 关键词：登革热病毒聚合酶链反应酶联免疫吸附测定杂交
- Establishment of Rapid Detection Methods of important Arboviruses in South China
- <正>Introduction 1.Arboviruses A large group of enveloped RNA virus primarily transmit by Arthropod vectors Mos...
- 任瑞文
- 文献传递
- TaqMan荧光定量PCR检测1型登革热病毒及临床应用被引量：1
- 2010年
- 目的建立登革热1型病毒(DV1)TaqMan荧光定量PCR快速检测方法及应用于临床诊断。方法根据DV15′端非编码区基因保守序列,设计一套特异性引物和TaqMan探针。用4个血清型DV标准毒株为对照,收集40份DV1临床血清为检测标本。通过对DV1标准毒株RT-PCR后,采用体外转录方式获得RNA模板作为阳性对照,检测所建立TaqMan荧光定量PCR方法的特异性。取DV-IgM/IgG用ELISA检测患者血清,将TaqMan荧光定量PCR和DV-IgM/Ig GELISA进行敏感性比较。结果所建立方法的最低检测限约为每反应10个基因拷贝。发病后不同时间采集的登革热患者血清标本检测结果为:发病1～3d的患者RT-PCR阳性检出率最高(81.25%);4～6dELISA-IgM检出率最高(85.00%);7d后ELISA-IgG检出率最高(75.00%)。结论在登革热的早期诊断中建立的RT-PCR具有较高的敏感性、特异性和重复性,可作为DV1的快速诊断方法。
- 白志军刘建伟洪文艳任瑞文陈万山卢业成张复春方美玉林立辉
- 关键词：荧光定量RT-PCRTAQMAN探针
- 登革2型病毒广东流行株结构蛋白基因序列测定及分析
- 登革热为广东省重要虫媒传染病,90年代以来共发生9次登革热的流行,其中3次流行是由登革2型病毒(DEN2)感染所致,这3次流行的时间地点分别为:1993年在佛山市流行、1998年在南海市流行、2001年在江门地区流行.其...
- 方美玉任瑞文洪文艳刘建伟蒋廉华田小东林立辉
- 关键词：登革热登革2型病毒结构基因
- 文献传递
- 4株蚊媒病毒多重RT-PCR快速检测方法的建立被引量：2
- 2010年
- 目的建立登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒的多重RT-PCR快速检测方法。方法参照病毒核酸序列设计多重RT-PCR引物,并检索GenBank国际基因序列数据库初步验证其特异性,随后对Mg2+、dNTP及引物浓度,RT-PCR反应条件进行优化,建立稳定、特异的多重RT-PCR快速检测4株病毒方法 ,并以同属于黄病毒科的登革3型病毒、登革4型病毒及甲病毒属基孔肯亚病毒、辛德毕斯病毒为对照,验证其特异性。结果应用多重RT-PCR反应体系,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果 ;采用多重RT-PCR引物对登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒进行扩增,分别获得574、251、879、422 bp片段,与设计相符,而对照病毒组均无非特异性扩增条带。结论实验证明,所建立的多重RT-PCR方法能够快速地检测登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒,为其检测提供了一种方便易行的方法 。
- 王军军李歆任瑞文
- 关键词：登革病毒黄热病毒流行性乙型脑炎病毒多重RT-PCR
- 南方地区重要虫媒病毒病免疫学快检方法的研究
- 目的针对近年来新发或再发的虫媒病毒性传染病病原,筛选、鉴定其诊断用原核表达抗原,并初步建立其免疫学快速侦检方法,为该类疾病的防控及流行病学调查提供技术储备。方法分别利用DNAStar及ANTHEPROT软件对登革病毒1-...
- 任瑞文唐博恒胡文龙沓世远王一超马美茵杨虹
- 关键词：虫媒病毒抗原表位ELISA
- 文献传递
- 广东省流行的3株登革热2型病毒基因组全序列测定及分析被引量：6
- 2013年
- 目的测定广东省3株登革热2型病毒的全序列,探讨其来源及基因型。方法运用RT PCR法扩增来自广东省的登革热2型GD09/93、GD05/98和GD19/2001病毒株的全序列,采用遗传距离法构建进化树。结果3株登革热2型病毒的全基因组长度均为10 723 nt,5′及3′端各有一非编码区,结构基因和非结构基因位于基因组97~10 269 nt之间,共编码3391个氨基酸,读码结构完全相同。GD05/98与GD09/93、GD05/98与GD19/2001、GD09/93与GD19/2001之间的碱基序列同源性分别为93.3%、92.4%和97.6%,氨基酸序列同源性分别为96.7%、96.5%和98.5%。结论3株登革热2型病毒均对乳鼠致病,与对乳鼠不致病的参考株（DEN2-04株）比较共有18个氨基酸位点的差异引起极性或电荷变化,PrM-134、NS2A-153、NS4B-102所带电荷的变化对抗原性影响较大。GD05/98株与泰国分离株同为Ⅱ基因型,GD09/93和GD19/2001株与印度尼西亚、澳大利亚、台湾株分在Ⅳ基因型;表明我国登革热2型病毒有不同的基因型,而不同时期也存在同一种基因型传播。
- 白志军张培洪文艳刘建伟狄飚杨智聪任瑞文方美玉林立辉
- 关键词：登革热病毒全序列系统发生树基因型聚合酶链反应
- 登革2型病毒特异性抗原片段的筛选及验证
- 2012年
- 目的筛选、鉴定登革2型病毒特异性抗原,为进一步研究其生物学功能奠定基础,并利用纯化抗原建立检测登革2型病毒抗体的ELISA方法。方法分别利用DNAStar及ANTHEPROT软件对登革病毒1-4型、流行性乙型脑炎及黄热病毒M、E蛋白进行分析,分析登革2型病毒型特异性抗原表位,并参考GenBank中的序列信息进行比对,分析其在不同登革2型病毒株中的保守性。然后选择预测得分值较高的表位,利用pET32a原核表达系统进行原核表达,Western blotting验证其免疫学反应特异性,特异性片段经亲和层析纯化后,包被ELISA微孔板,并对ELISA反应条件进行系统优化。结果经系统的生物信息学分析,初步预测获得登革2型病毒特异性抗原表位8个,并对其中得分值较高的6段进行了高效表达,经Western blotting分析,获得登革2型病毒特异性抗原片段1段。经纯化后作为检测用抗原,建立了检测登革2型病毒抗体的ELISA方法。初步应用表明,所建立方法具备良好的特异性,可检测1～200倍稀释的患者血清,S/N比值均在10以上。结论获得登革2型病毒特异性抗原片段1段,并建立检测登革2型病毒抗体的ELISA方法。
- 任瑞文唐博恒张培胡文龙洪文艳刘建伟
- 关键词：登革2型病毒抗原表位原核表达ELISA
