- 人肾小管上皮细胞在转化生长因子β_1诱导下桩蛋白表达研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨不同浓度重组人转化生长因子β1(humanrecombinanttransforminggrowthfactorβ1,rhTGFβ1)对人近端肾小管上皮细胞株(humankidneyproximaltubularepithelialcellline,HKC)表达桩蛋白(paxillin,Pax)的影响。方法将体外培养的HKC随机分为3组:对照组(C组):无血清培养基(freeserummudium,FSM)培养;TGFβ1培养组(T1、T2组):分别用含不同浓度的TGFβ1(T1组:5ng/ml,T2组:10ng/ml)的FSM培养,48h后分别用逆转录多聚酶链式反应(RT PCR)、免疫组化方法和Westernblot检测HKC的PaxmRNA及蛋白表达情况。结果①C组:PaxillinmRNA及蛋白有基础的表达;②T1和T2组:PaxmRNA及蛋白表达均明显增加,T2组和T1组相比,Pax的mRNA及蛋白表达量增加更显著(P<0.01)。结论TGFβ1能呈剂量依赖性地诱导HKC合成Pax。
- 韩敬张璟
- 关键词：肾小管上皮细胞桩蛋白转化生长因子Β1
- 桩蛋白与肾脏
- 2006年
- 桩蛋白(paxillin,Pax)作为细胞骨架蛋白的关键调节蛋白之一,具有对细胞外刺激发应的潜能,在多种信号转导途径中起到结构和信号转导的承接作用.近年来有关Pax在细胞黏附与迁移中的作用备受关注,同时与肾脏发育及肾脏疾病发生的关系也日渐受到重视,现将目前相关研究作简单综述.
- 韩敬张璟
- 关键词：桩蛋白肾脏信号转导上皮-间充质转分化
- ILK在TGFβ_1诱导HKCs转分化过程中的表达和意义被引量：2
- 2007年
- 目的观察TGFβ1诱导的肾小管上皮细胞转分化过程中,整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的表达及其在TEMT中所起的作用。方法以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系为对象,分别用TGFβ1(40ng/ml)及TGFβ1(40ng/ml)加HGF(100ng/ml)刺激,免疫组化方法检测ILK、E钙黏蛋白(E-cadherin)及纤维连接蛋白(FN)的蛋白表达,并用计算机真彩色图像分析系统对其进行半定量,并用Western Blot进一步检测ILK蛋白的表达。结果TGFβ1能以时间依赖的方式诱导ILK在肾小管上皮细胞中的表达;增加的ILK能介导肾小管上皮细胞发生表型变化,即使小管上皮细胞E钙黏蛋白的表达减少,而纤维连接蛋白的表达增多,用HGF能抑制上述作用。结论ILK参与TGFβ1诱导的人近端肾小管上皮细胞向间叶细胞的转分化。
- 张璟陈秋韩敬
- 关键词：转化生长因子Β1整合素连接激酶
- TGFβ_1对人肾小管上皮细胞表达糖原合成酶激酶-3β的影响被引量：8
- 2007年
- 目的研究转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞株(human kidney proximal tubular epithelial cell line,HKCs)表达糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的影响。方法将体外培养的的HKCs随机分为4组:正常对照组(C组):无血清培养基(free serum medium,FSM)培养;Ta组、Tb组和Tc组:用含不同浓度TGFβ1(Ta组:5ng/ml,Tb组:10ng/ml,Tc组:20ng/ml)的FSM培养。12h后,分别用RT-PCR、Western blot检测HKCs GSK-3β的mRNA、总蛋白表达量以及蛋白磷酸化水平。结果(1)GSK-3β mRNA和总蛋白在各组间表达量差异无统计学意义(P>0.05),和C组相比各T组GSK-3β蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01);(2)Tb组与Tc组相比,GSK-3β磷酸化水平更高(P<0.01);(3)Tb组与Tc组相比,GSK-3β磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论TGFβ1虽不影响HKCs的GSK-3β mR-NA和总蛋白表达量,但能提高GSK-3β蛋白磷酸化水平,后者可能参与TGFβ1诱导的HKCs转分化过程。
- 郑颖张璟卓文磊敖绪军韩敬张勇
- 关键词：肾小管上皮细胞转化生长因子Β1糖原合成酶激酶3Β
- 转化生长因子β_1对人肾小管上皮细胞表达桩蛋白的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨重组人类转化生长因子β1(rhTGF-β1)对人近端肾小管上皮细胞(HKC)桩蛋白(Pax)表达时相的影响。方法将体外培养的HKC随机分为4组。对照组(C组)无血清培养基(FSM)培养;rhTGF-β1培养组(T1、T2、T3组)分别用含10ng/mlTGF-β1的FSM培养,取不同时相点(T1组24h,T2组48h,T3组72h)终止培养。MTT法检测rhTGF-β1诱导HKC增殖的时效关系,RT-PCR检测HKC的PaxmRNA表达,免疫组化和Westernblot检测Pax蛋白的表达。结果C组可检测到PaxmRNA和蛋白表达;PaxmRNA和蛋白表达T组明显高于C组,且T2、T3组明显高于T1组(P<0.01)。结论TGF-β1诱导HKC合成Pax具有时间依赖性。
- 韩敬张璟
- 关键词：肾小管上皮细胞桩蛋白转化生长因子Β
- 桩蛋白在TGFβ1诱导人肾小管上皮-间充质转分化中的表达及意义
- 2007年
- 目的探讨不同浓度重组人转化生长因子β1（rhTGFβ1）诱导人近端肾小管上皮细胞（HKCs cells）发生小管上皮-间充质转分化（TEMT）过程中桩蛋白（Pax）的表达及金雀异黄素（Gen）干预来探讨Pax在此过程中的意义。方法将体外培养HKCs细胞随机分为3组：⑴对照（C）组：无血清培养基（FSM）培养;⑵TGFβ1培养（T）组：分别用含不同浓度的TGFβ1（T5组：5ng/ml,T10组：10ng/ml）的FSM培养;⑶T＋G组：TGFβ110ng/ml＋Gen50μmol/L共同培养。48h后用半定量逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）或免疫组化方法检测HKCs细胞E-cadherin、alpha-smooth muscle（α-SMA）和Pax的mRNA或蛋白表达;Western blot分析Pax蛋白表达变化。结果⑴C组：E-cadherin大量表达,αSMA表达阴性,Pax有基础的表达;⑵T组：E-cadherin表达减少,αSMA及Pax表达增加较C组差异均有统计学意义（P〈0.01）,且T10组较T5组差异有统计学意义（P〈0.01）。⑶T＋G组：E-cadherin表达减少及αSMA和Pax表达增加较T10组差异均有统计学意义（P〈0.01）,较C组差异有统计学意义（P〈0.01）。结论TGFβ1启动并介导HKCs细胞发生TEMT过程中能呈剂量依赖性诱导Pax表达增加;Pax参与TGFβ1诱导的TEMT部分是通过酪氨酸激酶（PTK）途径进行信号转导。
- 韩敬张勇张璟
- 关键词：细胞支架蛋白质类转化生长因子Β肾小管
