胡清泉
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
- 供职机构：西南大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 含有Rubisco小亚基启动子和转运肽序列的通路克隆入门载体的构建和应用(英文)被引量：3
- 2011年
- Gateway(通路克隆)技术是最近开发出来的一种分子克隆技术,其特点是操作简单、省时高效,已经成功应用于很多基因表达载体的构建.然而,现有的通路克隆植物表达载体不包含任何将表达蛋白定位到叶绿体中的序列.将通路克隆入门质粒载体pENTR-2B的XmnⅠ位点改造成HindⅢ位点,产生入门载体pENTR*-2B,然后将番茄1,5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)小亚基3C的启动子(PrbcS)及其转运肽序列(*T)和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因亚克隆到pENTR*-2B中,构建通路克隆入门载体pENTR*-PrbcS-*T-GFP.实验结果证实,用pENTR*-PrbcS-*T-GFP和通路克隆的植物表达载体进行LR反应,构建GFP的光诱导型植物表达载体,可以成功地将表达的GFP定位到转基因植物的叶绿体中.利用β-葡糖苷酸酶(GUS)报告基因替代该入门载体中的GFP基因做试验也得到相似的结果.这说明用目的基因替换该入门载体中的GFP可以构建目的基因的入门载体,然后用通路克隆技术可以快速构建其光诱导型植物表达载体,将表达的目的蛋白定位到转基因植物或组织细胞的叶绿体中.
- 马莉宋中邦胡清泉赵玥年洪娟玉永雄李昆志陈丽梅
- 关键词：植物表达载体
- 提高植物同化和吸收甲醛能力的植物表达载体及其应用
- 本发明公开了一种提高植物同化和吸收甲醛代谢能力的植物表达载体pK2－35S－PrbcS－*T－hps/phi，为含有番茄1，5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)3C小亚基基因的光诱导型启动子(PrbcS)及其转移肽序列...
- 陈丽梅宋中邦殷飞李昆志马莉胡清泉陈红梅
- 文献传递
- 一种通路克隆入门载体及其构建方法和应用
- 本发明公开一种通路克隆(Gateway)技术入门质粒载体(Entry vector)，该载体含有1，5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)小亚基基因的光诱导型启动子(PrbcS)和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因。本发明还...
- 陈丽梅李昆志马莉宋中邦胡清泉
- 文献传递
- 光诱导和组成型启动子控制柠檬酸合酶基因过量表达对转基因烟草耐铝性影响的比较被引量：5
- 2011年
- 分别用光诱导型启动子（PrbcS）和组成型启动子（Ca MV35S）驱动柠檬酸合酶基因（cs）在转基因烟草中过量表达,比较转基因烟草中柠檬酸的含量和分泌量及其铝耐受性的变化.结果表明：诱导型转基因株系的CS酶活性是野生型的2.3~2.4倍,组成型转基因株系的酶活性是野生型的1.6~2倍;在30μmol·L-1铝胁迫下,诱导型转基因植株的根相对伸长量是野生型的2.8~2.9倍,组成型的根相对伸长量是野生型的2~2.3倍;在无铝或300μmol·L-1铝胁迫下,转基因烟草叶片和根中柠檬酸含量均高于野生型,其中诱导型转基因植株叶片中柠檬酸含量高于组成型转基因植株,转基因烟草柠檬酸的分泌量分别是野生型的1.8~2.0倍和3.0~3.3倍;在有铝胁迫的珍珠岩基质上培养时,转基因烟草的生长情况好于野生型.这些结果证明,与Ca MV35S相比,采用PrbcS启动子控制cs基因的过量表达可更有效地增加转基因烟草中CS的酶活性及叶片中柠檬酸的合成量,同时也能更有效地提高转基因烟草柠檬酸的分泌量,从而增强其对铝毒害的抵御能力.
- 王奇峰胡清泉赵玥易琼李昆志玉永雄陈丽梅
- 关键词：柠檬酸合酶转基因烟草组成型启动子
- 拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶基因的植物表达载体及其构建方法和应用
- 拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶基因的植物表达载体pH2－35S－PrbcS－adh，为含有番茄1，5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)3C小亚基基因的光诱导型启动子(PrbcS)和拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶(glu...
- 陈丽梅宋中邦李昆志马莉胡清泉陈红梅
- 文献传递
- 苜蓿中光诱导型启动子柠檬酸合成酶基因的过量表达及其对铝耐受力的提高
- 柠檬酸合成酶是调控TCA循环中的关键酶,柠檬酸合成酶基因的过量表达可促进植物中柠檬酸的过量分泌。已有的研究表明,柠檬酸的过量分泌能增强植物对酸性土壤中铝毒的耐受性。本研究以农杆菌介导法将携带光诱导特性的rbcs启动子的烟...
- 张丽甘智才胡清泉玉永雄
- 关键词：耐铝性农杆菌介导法紫花苜蓿
- 文献传递
- 烟草柠檬酸合成酶基因的克隆及其光诱导型植物表达载体的构建被引量：10
- 2009年
- 紫花苜蓿为多年生优质豆科牧草。我国南方地区酸性土壤分布比较广,铝害比较严重,限制了紫花苜蓿在南方地区的推广利用。提高有机酸合成酶基因的表达活性,增加有机酸的合成与分泌,有利于增强植物的耐铝性。本研究根据Genebank中已知的烟草柠檬酸合成酶(Citrate Synthase,cs)基因的序列,通过RT-PCR从烟草总RNA中扩增cs基因的cDNA,亚克隆于T载体得到重组载体pMD18-cs,对pMD18-cs中的插入片断进行核酸序列分析确认为cs基因的cDNA全长。用光诱导型启动子(Rubisco,小亚基的启动子)和双元载体pPZP211构建了cs基因的光诱导型植物表达载体pPZP211-PrbcS-cs,为利用基因工程手段提高紫花苜蓿耐铝毒能力,促进其在南方地区推广利用奠定了物质基础。
- 胡清泉王奇峰李昆志陈丽梅玉永雄
- 关键词：植物表达载体耐铝性
- 提高紫花苜蓿（Medicago sativa L.）耐铝毒能力的遗传操作
- 苜蓿是优良的豆科牧草，因其突出的优点而被广泛用做家畜、家禽的饲料及水土保持的重要的作物。苜蓿喜中性或微碱性土壤，pH值6～8为宜，所以在我国北方地区种植广泛。由于它有很高的饲用价值，人们试图将其引种到我国南方地区。但在我...
- 胡清泉
- 关键词：紫花苜蓿植物基因工程耐铝毒植物表达载体
- 文献传递
- 拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶基因的植物表达载体及其构建方法和应用
- 拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶基因的植物表达载体pH2-35S-PrbcS-adh，为含有番茄1，5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)3C小亚基基因的光诱导型启动子(PrbcS)和拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶(glu...
- 陈丽梅宋中邦李昆志马莉胡清泉陈红梅
- 文献传递
