马莉
- 作品数：12 被引量：28H指数：3
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- 相关领域：生物学文化科学经济管理农业科学更多>>
- 通过遗传操作提高植物代谢甲醛的能力
- 植物转基因操作中常用到组成型启动子自花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子和光诱导型启动子1,5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)小亚基基因启动子(PrbcS)。使用通路克隆(Gateway)技术能快速构建表达载体,但...
- 马莉
- 关键词：甲醛丝氨酸羟甲基转移酶
- 文献传递
- 提高植物同化和吸收甲醛能力的植物表达载体及其应用
- 本发明公开了一种提高植物同化和吸收甲醛代谢能力的植物表达载体pK2－35S－PrbcS－*T－hps/phi，为含有番茄1，5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)3C小亚基基因的光诱导型启动子(PrbcS)及其转移肽序列...
- 陈丽梅宋中邦殷飞李昆志马莉胡清泉陈红梅
- 文献传递
- 洋桔梗的转基因研究被引量：2
- 2010年
- 以叶盘为外植体,通过农杆菌菌株C58Cl(pPMP90)介导,开展了用植物表达载体pK2-35S-GFP(含GFP基因)转化洋桔梗(Eustoma russellianum)的研究。洋桔梗叶盘用农杆菌浸染15-20min,在共培养基上与农杆菌共培养2d后,转移到分化培养基上诱导愈伤组织。10d后选取部分叶盘在紫外灯下观察GFP的荧光亮点,结果80%以上的叶盘都有GFP的荧光亮点,说明农杆菌对叶盘的感染效率很高。在分化培养基上红花洋桔梗叶盘不定芽分化频率约为30%,把分化培养基上形成的小苗转移到含有Km(20mg/L)的生根培养基上,进行生根诱导筛选具有Km抗性的转基因植株,统计结果说明红花洋桔梗的转化效率为2.4%。随机选取4株具有Km抗性的洋桔梗植株进行PCR检测,结果均为阳性,证明GFP基因已整合到洋桔梗基因组中,选取经PCR检测为阳性的植株叶片,用激光共聚焦显微镜观察,结果发现有GFP的绿色荧光出现在叶片细胞质中,说明叶片中有GFP蛋白的表达,转化试验成功。
- 陈奇王阁奇马莉陈丽梅
- 关键词：洋桔梗农杆菌介导转基因GFP基因
- 含有Rubisco小亚基启动子和转运肽序列的通路克隆入门载体的构建和应用(英文)被引量：3
- 2011年
- Gateway(通路克隆)技术是最近开发出来的一种分子克隆技术,其特点是操作简单、省时高效,已经成功应用于很多基因表达载体的构建.然而,现有的通路克隆植物表达载体不包含任何将表达蛋白定位到叶绿体中的序列.将通路克隆入门质粒载体pENTR-2B的XmnⅠ位点改造成HindⅢ位点,产生入门载体pENTR*-2B,然后将番茄1,5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)小亚基3C的启动子(PrbcS)及其转运肽序列(*T)和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因亚克隆到pENTR*-2B中,构建通路克隆入门载体pENTR*-PrbcS-*T-GFP.实验结果证实,用pENTR*-PrbcS-*T-GFP和通路克隆的植物表达载体进行LR反应,构建GFP的光诱导型植物表达载体,可以成功地将表达的GFP定位到转基因植物的叶绿体中.利用β-葡糖苷酸酶(GUS)报告基因替代该入门载体中的GFP基因做试验也得到相似的结果.这说明用目的基因替换该入门载体中的GFP可以构建目的基因的入门载体,然后用通路克隆技术可以快速构建其光诱导型植物表达载体,将表达的目的蛋白定位到转基因植物或组织细胞的叶绿体中.
- 马莉宋中邦胡清泉赵玥年洪娟玉永雄李昆志陈丽梅
- 关键词：植物表达载体
- 一种通路克隆入门载体及其构建方法和应用
- 本发明公开一种通路克隆(Gateway)技术入门质粒载体(Entry vector)，该载体含有1，5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)小亚基基因的光诱导型启动子(PrbcS)和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因。本发明还...
- 陈丽梅李昆志马莉宋中邦胡清泉
- 文献传递
- 植物丝氨酸羟甲基转移酶及其生理作用研究进展被引量：5
- 2008年
- 丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)在自然界中普遍存在,它的生理学功能是催化丝氨酸和甘氨酸之间可逆的互换。SHMT的催化反应是氨基酸和核酸代谢的连接点,在氨基酸的工业生产和植物的光呼吸过程中,SHMT也是一个关键酶。最近通过使用核磁共振(NMR)技术和基因工程技术阐明了SHMT的很多酶学性质以及它在植物不同组织中的生理作用,对这些研究成果进行了总结。
- 马莉陈丽梅刘迪秋李昆志
- 关键词：丝氨酸羟甲基转移酶光呼吸酶学性质生理作用
- 来源于大肠杆菌的6-磷酸己酮糖合成酶和6-磷酸果糖异构酶的原核表达与活性测定
- 2009年
- 同源性搜索显示大肠杆菌中存在核酮糖单磷酸途径关键酶6-磷酸己酮糖合成酶(HPS)和6-磷酸果糖异构酶(PHI)基因的同源序列,但没有其相关活性和功能方面的报道。本研究利用PCR方法从大肠杆菌的基因组中扩增hps和phi的同源序列(分别简称为Ehps和Ephi),构建了大肠杆菌Ehps和Ephi基因的原核表达载体pDEST17-Ehps和pDEST17-Ephi,表达和纯化了重组蛋白EHPS和EPHI,酶活性检测结果表明EHPS和EPHI具有活性。
- 马莉陈丽梅年洪娟
- 关键词：原核表达重组蛋白纯化
- 拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶基因的植物表达载体及其构建方法和应用
- 拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶基因的植物表达载体pH2－35S－PrbcS－adh，为含有番茄1，5二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)3C小亚基基因的光诱导型启动子(PrbcS)和拟南芥谷胱苷肽依赖型甲醛脱氢酶(glu...
- 陈丽梅宋中邦李昆志马莉胡清泉陈红梅
- 文献传递
- 在天竺葵叶绿体中过量表达人工构建的HPS/PHI融合蛋白安装甲醛的光合作用固定途径
- ＜正＞甲醛是一种强致癌物质,目前已成为一种主要的室内污染气体。植物修复是清除室内甲醛污染的一种非常环保的方式,但植物自身甲醛代谢能力较弱影响了修复效果。核酮糖单磷酸途径（RuMP）是广泛存在于甲基
- 宋中邦殷飞马莉陈红梅李昆志陈丽梅
- 关键词：天竺葵叶绿体光合作用
- 文献传递
- 植物丝氨酸羟甲基转移酶基因研究进展被引量：13
- 2008年
- 丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)是一个含有磷酸吡哆醛(PLP)的四聚体的蛋白质,在亚甲基四氢叶酸(CH2-THF)存在时催化丝氨酸和四氢叶酸生成甘氨酸和N5,N10-亚甲基四氢叶酸的可逆反应。SHMT在高等植物的一碳代谢和光呼吸中起着非常重要的作用,最近随着植物SHMT纯化技术的进步和重要模式植物基因组测序的完工,使很多植物SHMT基因被克隆出来,并对它们的结构和功能及表达调控进行研究。
- 马莉陈丽梅
- 关键词：丝氨酸羟甲基转移酶基因克隆光呼吸基因表达调控
