王宝松
- 作品数：14 被引量：21H指数：2
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省“泰山学者”建设工程项目山东省科技攻关计划'泰山学者'建设工程专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- N-acetyl-tryptophan对新生鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
- 蒋吉英于树娜王宝松姜栋栋赵金岭
- HepG2及其克隆形成细胞端粒酶活性的异质性研究
- 2012年
- 目的研究端粒酶在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达,探讨不同增殖能力的肝癌细胞中端粒酶活性的异质性,为肝癌的诊断以及治疗提供新的思路。方法利用软琼脂克隆形成实验富集分离人肝癌HepG2细胞的克隆形成细胞;常规培养HepG2及其克隆形成细胞,利用免疫细胞化学、Western blotting和RT-PCR检测hTERT蛋白和mRNA在HepG2细胞及其克隆形成细胞中表达的异质性。结果①HE染色显示,克隆形成细胞的胞核较HepG2细胞大,核仁明显;细胞伸出较多的细长突起,并连接形成网状。②免疫细胞化学染色显示,hTERT在HepG2细胞的表达以细胞质为主,克隆形成细胞则以细胞核为主。③Western blotting和RT-PCR结果显示,克隆形成细胞中hTERT蛋白质和mRNA的表达均高于HepG2细胞。结论①hTERT在HepG2细胞及其克隆形成细胞中的表达存在异质性,且在克隆形成细胞中表达较高。②hTERT在HepG2细胞及其克隆形成细胞中的表达模式提示克隆形成细胞具有肝癌干细胞的特征。
- 于树娜王宝松姜红心史才兴郑洁蒋吉英
- 关键词：肝癌HTERT肿瘤干细胞
- Wnt信号通路在人肝癌HepG2细胞及其克隆形成细胞中表达的异质性研究
- 于树娜王宝松姜栋栋赵金岭蒋吉英
- ABC转运蛋白在肝细胞癌中的表达及意义被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨P-gp、MRP1、BCRP等ABC转运蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测P-gp/MDR1、MRP1、BCRP等mRNA及蛋白在34例的肝细胞癌、19例癌旁肝组织中的表达。结果:MDR1、MRP1、BCRP等mRNA在肝癌组的相对表达水平分别为1.15±0.24、0.64±0.33、1.07±0.32,在癌旁肝组织组的相对表达水平分别为0.36±0.14、0.19±0.06、0.31±0.09。MDR1、MRP1、BCRP在肝细胞癌中低分化组(Ⅲ、Ⅳ级)为1.38±0.26、0.73±0.35、1.34±0.21,在高分化组(Ⅰ、Ⅱ级)分别为0.74±0.32、0.30±0.11、0.45±0.13。P-gp、MRP1、BCRP等的阳性反应产物主要分布于细胞膜和胞浆内;在肝癌组和癌旁肝组织组的阳性表达率分别为82.35%、58.82%、79.4l%和42.11%、26.32%、36.84%。P-gp、MRP1、BCRP在肝细胞癌中低分化组(Ⅲ、Ⅳ级)的阳性表达率分别为100%、81.25%、100%,在高分化组(Ⅰ、Ⅱ级)的阳性表达率分别为66.67%、38.89%、61.11%。RT-PCR及免疫组织化学均显示,P-gp、MDR1、MRP1、BCRP mRNA和蛋白在肝癌组的表达均高于癌旁肝组织组,且在低分化(Ⅲ、Ⅳ级)肝癌组织的表达高于高分化者(Ⅰ、Ⅱ级),差异有统计学意义(P<0.05)。MDR1、MRP1、BCRP之间的表达无线性相关。结论:在肝细胞癌中存在原发性多药耐药现象,且多种耐药机制并存。P-gp、MDR1、MRP1、BCRP等与肝细胞癌的耐药有关,在肝癌组的表达高于癌旁肝组织组,且在肝细胞癌中的表达随着肿瘤分化程度的增高而降低,可作为肝细胞癌多药耐药性作用的靶点。
- 于树娜蒋吉英赵世福魏德全丁洁王宝松姜栋栋
- 关键词：多药耐药肝细胞癌免疫组织化学染色
- C/EBPα在肝细胞癌中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的检测肝细胞癌(HCC)标本中肝细胞核因子C/EBPα的表达,探讨其在肝癌发生、发展中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组化方法检测C/EBPα mRNA和蛋白质在肝癌组织和癌旁肝组织中的表达。结果 C/EBPα mRNA在癌旁肝组织中的相对表达量(0.737±0.268)明显高于肝细胞癌组织(0.258±0.190),差异有显著性(P<0.05)。C/EBPα mRNA的表达与肿瘤分化程度有关(P<0.05)。C/EBPα蛋白在癌旁肝组织中的阳性率(100.0%)明显高于肝细胞癌组织(38.4%),差异有显著性(P<0.05)。C/EBPα蛋白的表达与肿瘤分化程度有关(P<0.05)。结论 C/EBPα在肝细胞癌中表达下调在肝癌的发展过程中起重要作用。
- 郑洁魏志新王宝松姜栋栋赵金岭于树娜蒋吉英
- 关键词：肝细胞癌RT-PCR免疫组织化学
- LRP、GST-π在肝细胞癌中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨LRP、GST-π在肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测LRP和GST-πmRNA及蛋白在34例的肝细胞癌、19例正常肝组织中的表达。结果:LRP和GST-πmRNA的表达在肝癌组为0.53±0.28、0.75±0.19,正常肝组织组为0.22±0.10、0.26±0.12,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,LRP和GST-π的阳性表达率在肝癌组为55.88%、67.65%,在正常肝组织组为21.05%、31.58%,差异有统计学意义(P<0.05)。LRP、GST-πmRNA和蛋白在肝癌组的表达高于正常肝组织组,且低分化(Ⅲ、Ⅳ级)肝癌组织的表达高于高分化者(Ⅰ、Ⅱ级)(P<0.05),LRP与GST-π之间的表达无线性相关。结论:在肝细胞癌中存在原发性多药耐药现象,且多种耐药机制并存。LRP、GST-π在肝细胞癌中高表达,且随着肿瘤分化程度的增高而降低。
- 于树娜蒋吉英赵世福魏德全丁洁王宝松姜栋栋
- 关键词：多药耐药肝细胞癌免疫组织化学染色
- HepG2及其克隆形成细胞的耐药特征和对奥沙利铂的药敏异质性研究
- 2011年
- 目的 探讨HepG2细胞及克隆形成细胞的耐药特征及其对奥沙利铂的药敏异质性.方法利用软琼脂克隆形成实验分离克隆形成细胞,检测奥沙利铂对HepG2及其克隆形成细胞的抑制率和P-gp的表达.结果HepG2细胞的生长较克隆形成细胞慢；奥沙利铂对HepG2细胞的抑制作用高于克隆形成细胞；P-gp蛋白在HepG2细胞的表达较克隆形成细胞低.结论①P-gp蛋白的表达以及HepG2细胞对奥沙利铂的反应存在异质性.②克隆形成细胞具有肿瘤干细胞的耐药特征.
- 赵金岭姜红心丁洁史才兴于树娜王宝松蒋吉英
- 关键词：多药耐药HEPG2细胞奥沙利铂
- 三种因子联合诱导对大鼠胎盘间充质干细胞向肝细胞分化的研究
- 王晓萃丁洁王宝松姜栋栋赵金岭
- Wnt信号通路在HepG2细胞株及其克隆形成细胞中表达的异质性被引量：2
- 2011年
- 目的:研究Wnt信号传导通路的关键因子β-catenin和COX-2在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达,探讨Wnt信号传导通路在不同增殖能力细胞中表达的异质性.方法:以HepG2细胞为研究对象,采用软琼脂克隆形成实验筛选克隆形成细胞,应用RT-PCR、免疫化学和Westernblot等技术,检测Wnt信号传导通路的关键因子β-catenin和COX-2在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达.结果:β-cateninmRNA和蛋白质在克隆形成细胞中的表达水平高于HepG2细胞(0.905vs0.549;1.021vs0.700;均P<0.05).β-catenin的阳性信号在HepG2细胞中主要分布于细胞质,克隆形成细胞中主要分布于细胞核.COX-2mRNA和蛋白质在HepG2细胞中的表达高于克隆形成细胞(0.857vs0.527;0.731vs0.434;均P<0.05).大多数HepG2细胞中表达COX-2蛋白,阳性反应沉淀物主要位于细胞质,少数克隆形成细胞中有COX-2蛋白弱表达.结论:Wnt信号传导途径的关键因子β-catenin和COX-2与肝癌分化程度相关.β-catenin和COX-2等Wnt信号传导通路的关键因子在肝癌细胞HepG2及其克隆形成细胞的分布模式支持克隆形成细胞具有肝癌干细胞的特征.
- 王宝松魏德全于树娜姜栋栋赵金岭史才兴蒋吉英
- 关键词：WNTΒ-CATENINCOX-2HEPG2
- 三种因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化
- 2009年
- 背景:间充质干细胞的生物学特性及影响分化调控因子的研究认为,体外原代培养的间充质干细胞自然分化为肝细胞的比例较低,选择一种合适的诱导剂提高其分化为肝细胞的比例尤为必要。目的:以肝细胞生长因子、表皮生长因子及成纤维生长因子体外联合,验证其诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-08在潍坊医学院实验中心完成。材料:Sprague-Dawley大鼠40只,由潍坊医学院实验动物中心提供。方法:采用贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,取传至第3代细胞,设立2组:空白对照组加入含体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养基;联合诱导组在此基础上,另加入10μg/L成纤维生长因子、8μg/L肝细胞生长因子、8μg/L表皮生长因子。主要观察指标:倒置显微镜观察诱导后细胞形态变化,免疫荧光染色观察甲胎蛋白及白蛋白的表达,PAS检测糖原的表达,靛青绿摄入情况,酶学检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶的水平。结果:联合诱导组细胞呈多角形、卵圆形或圆形细胞的特征性改变,空白对照组骨髓间充质干细胞仍保持梭形或纺锤形。联合诱导组培养14d可见白蛋白和甲胎蛋白免疫反应阳性细胞;诱导7d时偶见PAS阳性细胞与靛青绿阳性细胞,随诱导时间延长,阳性细胞逐渐增多;诱导14d时开始检测到谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶的合成,21d达高峰,之后下降。上述各指标空白对照组细胞均呈阴性。结论:成纤维生长因子、肝细胞生长因子与表皮生长因子体外联合应用,能够成功诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化。
- 吴金生朱建祥蒋吉英王晓萃丁洁于树娜魏德全王宝松
- 关键词：骨髓间充质干细胞成纤维生长因子肝细胞生长因子表皮生长因子肝细胞
