李兰玉 作品数:21 被引量:199 H指数:7 供职机构: 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
犬种布鲁菌病病原学和遗传特征分析 被引量:3 2016年 目的 分析相对封闭群体中犬种布鲁菌病的病原学和遗传特征.方法 对北京一个实验动物基地饲养的犬进行布鲁菌病检测,包括血清学实验[试管凝集法(TAT)]、菌株鉴定(噬菌体实验和生化检测方法).采集犬组织(肝、脾和睾丸)标本进行病理组织学检查,对菌株进行基因特征分析[16S rRNA基因测序、荧光定量PCR(RT-PCR)检测血液标本核酸DNA、基因组DNA多位点序列分型(MLST)、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析、多位点可变数目串联重复序列(MLVA)分析和IS711插入序列Southern杂交分析].结果 51.25%(41/80)的比格犬血清中存在高滴度(≥1:50)的犬种布鲁菌抗体.80份血液样本的RT-PCR核酸检测全部阳性.病犬肝、脾和睾丸组织中发现有明显的病变和病菌样细胞.血液组织分离出10株细菌,经生化检测和噬菌体实验证实为犬种布鲁菌.对菌株16S rRNA基因测序分析,结果与数据库中犬种布鲁菌完全吻合.MLST、PFGE和IS711插入序列Southern杂交分析10株菌株,基因型完全相同.MLVA分析发现,10株菌株分为2个不同的基因型.结论 通过血清学、细菌学、组织学、16S rRNA基因测序、MLST、PFGE、MLVA和IS711插入序列Southern杂交全面分析一起犬种布鲁菌病爆发疫情,经MLVA分析发现,犬种布鲁菌在自然环境中,进化为两个相对稳定的MLVA基因型. 田国忠 郑敏 崔步云 朴东日 赵鸿雁 李兰玉 姜海 李军延关键词:基因 从海洋哺乳动物中分到的布鲁氏菌研究近况 被引量:5 2006年 李兰玉 尚德秋关键词:布鲁氏菌病 哺乳动物 布氏菌 布病 从北京某地分离的2株犬种布氏菌的鉴定报告 被引量:11 2006年 目的对从北京某地分离的2株布氏菌进行鉴定。方法布氏菌常规鉴定分型方法,布氏菌噬菌体裂解试验,同时辅以脉冲场电泳基因分型方法。结果2株待测菌株均为犬种布氏菌,2株待测菌的脉冲场电泳图谱与国际标准犬种布氏菌RM6/66株的图谱完全一致。结论采用传统布氏菌分型方法同时辅以脉冲场电泳基因分型方法对布氏菌进行分型鉴定,可以增加鉴定工作的稳定性与正确性。 朴东日 赵鸿雁 李兰玉 崔步云 李元凯关键词:布氏菌 噬菌体 脉冲场电泳 用MLVA技术和多重PCR对犬种布氏菌基因分型 被引量:10 2009年 目的:对犬种布氏菌的遗传关系进行不同分子分型方法的对比研究,为犬布病分子流行病溯源提供有效方法。方法:采用多重PCR和多位点可变数量串联重复序列分析(MLVA)方法对24株犬种布氏菌的遗传关系进行比较研究。结果:多重PCR只鉴定出1株犬种布氏菌,其余23株均鉴定为猪种鲁氏菌,但不能鉴定型别;MLVA方法对已鉴定为猪种的布氏菌仍可再细分为型,87%(20/23)为猪3型,13%(3/20)为猪1型。结论:MLVA可以对布氏菌种(生物型)进行基因分型鉴定,可以作为传统表型鉴定方法的补充。 姜海 崔步云 李兰玉 赵鸿雁 朴东日关键词:多重PCR 布鲁杆菌XbaⅠ酶切脉冲场凝胶电泳基因分型方法的条件优化 2013年 目的优化布鲁杆菌XbαI酶切脉冲场凝胶电泳基因分型方法。方法通过测试不同厂家生产的XbaI限制性内切酶。优化脉冲场凝胶电泳条件和脉冲时间,所得凝胶电泳图谱用BioNumericsV4.0软件和UPGMA方法进行聚类分析,获得脉冲场凝胶电泳分型结果。结果优化后的条件为:XbaI限制性内切酶为美国Promega公司产品;脉冲时间为21h,包括第一脉冲时间0.5—8.0s,16h,第二脉冲时间10.0—56.0s,5h;电压为6.0V/cm;电场夹角120。;电泳温度为14℃。利用优化后的脉冲场凝胶电泳条件对布鲁杆菌6个菌种19个生物型菌株进行试验,经聚类分析能够将牛种、羊种、猪种和绵羊附睾种菌株归为不同的4大群,但是犬种菌株归在猪种群内,沙林鼠种菌株归在牛种群中。聚类分析结果与生物学分型方法具有一致性。结论布鲁杆菌XbaI酶切脉冲场凝胶电泳基因分型方法得到优化,并能够反映布鲁杆菌种群间的亲缘关系,建议应用到监测网络系统。 赵鸿雁 田国忠 王衡 姜海 李兰玉 杜小莉 崔晶花 朴东日关键词:脉冲场凝胶电泳 分子分型 布鲁杆菌 山西省天镇县人畜布鲁氏菌病血清学监测分析 被引量:7 2008年 目的了解家畜布鲁氏菌病布病感染率与职业人群布病感染率的关系。方法通过对天镇县6个自然村的人及家畜的布病血清学抽样调查,分析人布病感染率和家畜布病感染率的关系。结果人布病感染率和家畜布病感染率呈直线正相关,统检验差异有统计学意义(r=0.88425,P=0.0193<0.05),其直线回归方程为Y^=9.866+18.54x。结论家畜布病的血清学监测可以预测布病疫情,同时家畜感染率可以考虑作为预警指标;另外降低人布病感染率,首先应该控制家畜布病的流行。 陈文婧 崔步云 吴美和 李兰玉 李凯 赵鸿雁关键词:布鲁氏菌病 感染率 相关系数 1952—2007年内蒙古自治区布鲁杆菌病疫情分析 被引量:5 2009年 目的分析内蒙古自治区布鲁杆菌病疫情,探讨不同时期影响疫情的可能因素,为制订内蒙古自治区当前布鲁杆菌病防治对策提供依据。方法收集1952—2007年内蒙古自治区布鲁杆菌病监测数据和已发表文献中相关数据,对布鲁杆菌病在不同时期、不同人群、不同地区分布情况进行描述性统计分析。结果1952—2007年间内蒙古自治区出现2次布鲁杆菌病流行高峰,20世纪50年代末60年代初出现第1次发病高峰,范围波及全区12盟(市),其中1961年发病率最高,达55.28/10万;病例职业构成中牧民最高,占72.9%;2000年后出现第2次发病高峰,其中2005年发病率最高,达38.44/10万,以中、东部地区最为严重;病例职业构成中以农民和牧民为主,分别占51.9%和28.7%。结论随着畜牧养殖业的快速发展,牲畜交易频繁,使得内蒙古自治区布鲁杆菌病疫情从90年代中期开始快速上升,2004—2007年达流行高峰。 朴东日 李兰玉 赵鸿雁 崔步云关键词:流行病学研究 猪种布鲁氏菌生物1型野毒株和2号菌苗的鉴别诊断 被引量:4 2009年 目的寻找猪种布鲁氏菌生物1型野毒株(1330S)和猪种布鲁氏菌2号菌株(S2)的鉴别诊断方法。方法采用牛、羊、绵羊、猪种型聚合酶链反应(AMOS-PCR)、脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点可变数量串联重复序列(MLVA)3种方法对21株1330S菌株进行鉴别。结果AMOS-PCR和PFGE方法未能区分两类菌株;MLVA方法发现1330S和S2菌株在Bru9和Bru16两位点存在差异。结论MLVA方法可以作为两类菌株鉴别诊断的方法之一。 姜海 崔步云 赵鸿雁 朴东日 李兰玉双抗原夹心酶联免疫试验检测布鲁杆菌病患者方法的评价研究 被引量:3 2010年 [目的]在检测不同临床期的布病患者时,评价布鲁氏菌双抗原夹心酶免疫试验(DAgS-ELISA)真实性和诊断效能。[方法]采用病例对照的实验研究方法,布鲁氏菌试管凝集试验(SAT)为标准,比较DAgS-ELISA、快速双抗原夹心ELISA(QDAgS-ELISA)、虎红平板凝集试验(RBPT)、补体结合试验(CFT)以及间接酶联免疫试验(I-ELISA)5种血清学筛检方法。[结果]应用以上5种方法同时检测急性期病例组和对照组血清,DAgS-ELISA的总一致性和约登指数最高,为96.49%和93.44%,其假阴性率最低为2.27%,U检验显示DAgS-ELISA与CFT、Ⅰ-ELISA灵敏度差异有统计学意义(P<0.05),CFT诊断效能最高,为100.00%。对慢性期布病患者和对照组血清进行检测,QDAgS-ELISA、RBPT、Ⅰ-ELISA灵敏度均为100.00%,DAgS-ELISA为93.33%,CFT为40%,U检验显示DAgS-ELISA与RBPT、Ⅰ-ELISA灵敏度间差异无统计学意义(P>0.05),而与CFT间差异有统计学意义(P<0.05)。DAgS-ELISA与Ⅰ-ELISA、CFT间特异度差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]以SAT方法为金标准,DAgS-ELISA方法在检测急性期布病患者时,其敏感度高、特异度强、一致性均较好。 寇增强 冯开军 李忠 丁淑军 鲁齐发 李兰玉 赵鸿雁 张晓梅 王显军关键词:布鲁氏菌病 可靠性 我国羊种3型布鲁氏菌的多位点序列分型研究 被引量:46 2011年 目的对2004-2009年从病人标本中分离的羊种3型布鲁氏菌进行遗传多态性分析,了解菌株的遗传特征及遗传进化关系。方法采用多位点序列分型(Multiple locus sequence typing,MLST)技术,对47株布鲁氏菌菌株的7个管家基因、1个外膜蛋白基因及1个基因间区的序列进行测定,将各个基因的序列与标准菌株的等位基因型进行比对,确定其等位基因谱型及菌株序列型(STS),分析与其它ST型间的遗传关系。结果 47株布鲁氏菌中,19株omp25基因与目前已有的等位基因型不同,被定义为1个新的等位基因型,即ST28。其余28株与已知的ST8型的各等位基因型一致。结论我国流行的羊种布鲁氏菌主要是羊3型菌株,国内的菌株与国外菌株遗传背景上有差异。MLST分型可以作为研究布鲁氏菌进化关系的重要手段之一。 周晓艳 陈燕芬 崔步云 陈泽良 姜海 赵鸿雁 朴东日 李兰玉 王金桃关键词:布鲁氏菌 MLST