曾庆平
- 作品数：83 被引量：317H指数：9
- 供职机构：广州中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家中医药管理局基金资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 重组人细胞因子基因在转基因中药细胞中的瞬时表达被引量：9
- 2003年
- 目的 利用转基因中药表达人细胞因子基因 ,探讨培育基因修饰 (GM)中药的可行性。方法 将体外扩增分别获得的人 α-干扰素基因与 RANTES基因酶切回收后插入中间载体 ,用 Eco R 和 H ind 双酶切鉴定重组子。由大肠杆菌分离重组质粒并导入根癌农杆菌 Agrobacterium tumefaciens,通过加入卡那霉素 (Km)和利福平(Rif)筛选含重组双元载体的转化子 ,用叶盘共培养法转化苦瓜和夏枯草外植体。结果 经 RT- PCR检测到人 α-干扰素基因与 RANTES基因在中药转化愈伤组织中的瞬时表达。结论 首次报道了重组人 α-干扰素基因与RANTES基因在转基因苦瓜和夏枯草细胞中的表达 ,为探讨利用转基因中药抗病毒尤其是抗艾滋病开创了新途径。
- 曾庆平冯丽玲杨瑞仪符林春郭兴伯
- 关键词：RANTES基因
- 青蒿素类药物治疗神经胶质瘤的用途
- 本发明公开了青蒿素类药物的一种新的医药用途，即可以作为一种高效、低毒、价廉的新型化疗药治疗神经胶质瘤。对神经胶质瘤患者和神经胶质瘤手术后复发的患者口服或者注射给药，每天使用10－2000mg(优选50－500mg)的剂量...
- 符林春胡英杰曾庆平
- 文献传递
- 黄花蒿Dbr2基因的分离与诱导表达特性分析
- 2011年
- 目的：从黄花蒿中分离鉴定青蒿素生物合成途径关键酶——青蒿醛双键还原编码基因（Dbr2）并研究其表达特性，藉此探索提高该基因表达量并进一步促进青蒿素合成的途径。方法：采用PCR法从黄花蒿总RNA中分离Dbr2基因编码序列，并采用实时荧光定量PCR法定量检测Dbr2基因在多种人工模拟环境中的转录表达模式。结果：从黄花蒿中分离出1179bp的Dbr2基因编码序列。经过低温、紫外辐射、淹水、脱水、复水、真菌诱激子、葡萄糖、水杨酸处理，Dbr2 mRNA水平分别提高2.5、3.7、10.8、6.0、34.5、28.7、6.3和8.5倍。结论：黄花蒿Dbr2基因可能具有环境诱导表达特性。
- 杨瑞仪杨雪芹冯丽玲曾庆平
- 关键词：黄花蒿青蒿素
- 转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用研究被引量：5
- 2008年
- 目的研究转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用,观察药物作用后细胞凋亡情况。方法采用MTT法检测青蒿琥酯单用或与转铁蛋白合用对鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制作用,DAPI染色观察CNE2细胞凋亡,流式细胞术分析细胞凋亡率变化。结果青蒿琥酯对CNE2细胞的IC50值为116μg/mL,青蒿琥酯合用转铁蛋白后IC50值降为17.4μg/mL,DAPI染色显示青蒿琥酯合用转铁蛋白作用CNE2细胞24h后,细胞出现明显凋亡现象,流式细胞分析结果显示,与对照组相比,青蒿琥酯合用转铁蛋白组作用24h后,细胞出现明显凋亡现象,而平行进行的青蒿琥酯100μg/mL组相同作用时间没有出现凋亡。结论转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性有较强增效作用,转铁蛋白与青蒿琥酯合用加速了青蒿酯诱导的细胞凋亡,是转铁蛋白增强青蒿琥酯作用的重要机制之一。
- 郑青郭建红周仲楼曾庆平赵文
- 关键词：转铁蛋白青蒿琥酯鼻咽癌CNE2细胞细胞凋亡
- 黄花蒿ADS启动子的分离及表达特性分析被引量：1
- 2011年
- 目的:从黄花蒿中分离鉴定青蒿素生物合成途径关键酶——紫穗槐二烯合酶编码基因(ADS)的启动子序列并研究其表达特性,藉此探索提高该基因表达量并进一步促进青蒿素合成的途径。方法:采用PCR法从黄花蒿DNA中分离ADS 5'端非翻译区(5'UTR)序列,构建与GUS报告基因融合的植物表达载体,通过农杆菌介导转化烟草。GUS组织化学染色法和分光光度法分别定性和定量检测ADS 5'UTR序列调控GUS基因在正常条件和胁迫条件下的表达。结果:从黄花蒿中分离出2 448 bp的ADS 5'UTR序列,获得与GUS基因融合表达的转基因烟草并检测到GUS活性。GUS活性定量检测结果显示,在4℃和紫外辐射条件下,转化烟草GUS活性分别提高1.6,2.2倍。结论:从黄花蒿分离出的ADS 5'UTR序列具有启动子功能并且可能具有环境诱导表达特性。
- 杨瑞仪杨雪芹冯丽玲曾庆平
- 关键词：黄花蒿ADS启动子青蒿素
- 青蒿素模拟热量限制延长酵母寿命的双期响应模式全转录组谱解析被引量：1
- 2015年
- 热量限制(CR)可延长酵母及哺乳动物等多种生物的寿命.尽管CR延寿被认为与呼吸活动增强有关,但营养摄取不足反而加大能量消耗显然不符合逻辑.在解决食物供应减少与代谢消耗增加这对矛盾的过程中,本研究揭示了1种基于CR的"双期响应"模式,它包括1个"线粒体增强期"(ME)与1个"后线粒体增强期"(PME),两者可依据线粒体标志蛋白的表达模式及活性动态加以区分.ME以整体抗氧化活化为特征,PME则以系统代谢调整为标志.抗疟药青蒿素的半合成衍生物青蒿琥酯通过烷化血红素蛋白可重现CR的衰老延缓效果,提示青蒿琥酯-血红素结合可以在功能上模拟一氧化氮-血红素相互作用,据此已建立青蒿琥酯-血红素结合物形成与细胞色素c氧化酶活性升高之间的相关性.外源过氧化氢也能模拟CR诱导抗氧化基因,改变代谢节律,延长酵母寿命,暗示过氧化氢与延寿有关.青蒿琥酯可模拟CR激发的一氧化氮及过氧化氢诱导的抗氧化反应,清除活性氧,降低氧化应激,指导机体由合成代谢向分解代谢转变,维持必要的代谢功能,延长酵母的期望寿命.
- 汪大婷吴明李思明高倩曾庆平
- 关键词：热量限制青蒿琥酯酿酒酵母
- 白花蛇舌草对肝内胆汁淤积模型大鼠的保护作用被引量：8
- 2018年
- 目的:研究白花蛇舌草对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)诱导肝内胆汁淤积模型大鼠保护作用。方法:采用灌服ANIT法建立肝内胆汁淤积大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组、模型组、白花蛇舌草组、熊去氧胆酸阳性对照组。连续给药5 d后,测定大鼠胆管胆汁排泄量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、胆红素(TB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、肝组织病理学变化及其胆盐输出泵(BSEP)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)表达等指标,研究白花蛇舌草对肝内胆汁淤积大鼠肝功能、胆汁酸排泄、炎症因子及肝组织病理学变化的影响。结果:与模型组比较,白花蛇舌草能显著促进胆汁排泄,降低大鼠血清中ALT、AST、TBA、TB、TNF-α、IL-1β水平(P<0.01),诱导肝内BSEP、MRP2蛋白表达,改善大鼠肝组织病理学。结论:白花蛇舌草具有保护ANIT诱导肝内胆汁淤积模型大鼠肝损伤的作用。
- 刘若轩李阿荣郭洁文曾庆平李晚君蔡银连
- 关键词：白花蛇舌草胆汁淤积多药耐药相关蛋白2
- 马兜铃酪氨酸脱羧酶基因克隆、测序及同源性分析被引量：8
- 2005年
- [目的]从中草药马兜铃中获得酪氨酸脱羧酶基因(tyrDC)互补DNA(cDNA)序列并进行同源性分析,以进一步达 到敲除tyrDC,减轻该药肾毒性的目的。[方法]参照已知的植物酪氨酸脱羧酶的保守性氨基酸序列设计简并引物,并通过 反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从马兜铃中扩增出cDNA片段。将扩增的cDNA序列克隆并测序,用以设计特异引物,并 通过cDNA末端快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)从马兜铃中扩增出全长tyrDC cDNA。[结果]该克隆的 tyrDC cDNA的总长度为1 678 bp,包括一个编码516个氨基酸的1 551bp开读框(ORF)和一段127 bp的下游非翻译区 (3'UTR)。序列比较结果表明,由马兜铃tyrDC核苷酸序列推导的氨基酸序列分别与已发布的罂粟酪氨酸脱羧酶和唐松草酪 氨酸／多巴脱羧酶享有76％和79％的同源性。[结论]从马兜铃中扩增得到tyrDC cDNA全序列,且对酪氨酸脱羧酶的同源检 索显示,不同植物的酪氨酸脱羧酶之间都存在普遍的序列相似性。为去除马兜铃肾毒性奠定了基础。
- 杨瑞仪曾庆平
- 关键词：基因扩增
- 灰色预测控制器
- 曾庆平
- 青蒿素合成cDNA和新EST的克隆及其低温诱导表达的定量分析被引量：3
- 2008年
- 为了开展基于青蒿发育特异及环境诱导转录物组学的新基因分离与鉴定,本研究采集经低温处理的盛花期青蒿(Artemisia annua)叶片提取总RNA,并进行全长cDNA表达序列标签(expres sedsequence tags,EST)克隆,经测序和同源性检索后提交GenBank.在已注册的75个序列中,共有4个全长cDNA与青蒿已知基因高度同源,其余71个EST在青蒿基因中无测序记录,但其中有34个序列与其他植物基因同源,包括24个已知蛋白编码序列和10个未知蛋白编码序列,另外37个序列在任何植物基因中均无测序记录,为首次克隆的植物新基因.为了研究青蒿基因对极端环境胁迫的响应模式,采用半定量PCR(semi-quantitative PCR,SQ-PCR)对冷处理前后青蒿试管苗中青蒿素合成基因ADS,CYP71AV1和CPR的表达水平进行了测定.结果显示,ADS和CYP71AV1基因受冷胁迫强烈诱导,但CPR基因未受明显影响.同时还发现这种冷胁迫诱导作用可被Ca2+通道抑制剂氯化镧(LaCl3)或Ca2+螯合剂EGTA所阻遏,表明Ca2+-CaM信号转导通路可能参与冷胁迫诱导ADS和CYP71AV1基因的表达.对冷胁迫青蒿试管苗的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RFQ-PCR)测定结果表明,CaM基因的表达水平上调2.5倍,从而印证了上述CaM介导信号转导与冷胁迫诱导基因表达之间相关的推论.利用RFQ-PCR对7个新分离青蒿EST进行了功能注释,结果显示,D/LTSRP,UBE,AR/DAP和POD1基因的冷胁迫诱导表达水平分别上调约8.0,5.0,2.3和1.5倍,而CHI和RGP基因的表达无明显上调或下调.本研究首次在转录水平上对青蒿素合成基因及青蒿新EST的冷胁迫诱导表达模式进行了初步探讨,有助于深入了解青蒿素合成与累积的内在规律及其协同调节机制,为促进青蒿的遗传性状改良及代谢工程指导的育种工作打下基础.
- 曾庆平赵昌尹录录杨瑞仪曾晓梅黄瑛冯丽玲杨雪芹
- 关键词：表达序列标签非生物胁迫荧光定量
