晏永波
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:温州医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 新型眼用盐酸羟甲唑啉即型凝胶的制备工艺及其药物含量检测被引量:1
- 2012年
- 目的:探讨盐酸羟甲唑啉眼用即型凝胶的制备及其药物含量的测定方法。方法:采用冷溶法,以泊洛沙姆407(F127)为主要眼用即型凝胶载体材料,0.6%的泊洛沙姆188(F68)为促渗剂,制备盐酸羟甲唑啉眼用即型凝胶溶液;采用高效液相色谱(HPLC)法测定眼用即型凝胶中盐酸羟甲唑啉的含量。结果:盐酸羟甲唑啉眼用即型凝胶最佳处方组成为21%F127,胶凝温度为27.6℃;盐酸羟甲唑啉在线性范围为50~500 mg.L-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),日内和日间精密度良好,平均回收率为100.48%。结论:本滴眼剂处方工艺简单,质量容易控制,热可逆性好。
- 吴明钗晏永波黄鹏林洁苏泉董邦铃王敏
- 关键词:盐酸羟甲唑啉眼用即型凝胶
- N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶基因的克隆、表达及产物纯化
- 2010年
- 目的:从猪肾中提取RNA,从中克隆出N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶(GNE)基因,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达。方法:从猪肾中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出GNE基因,经测序,感受态大肠杆菌E.coli DH5a转化,质粒抽提,鉴定以及大肠杆菌BL21(DE3)转化表达,通过His-tag亲和纯化(Ni Sepharose 6 Fast Flow),G-25柱脱盐,SDS-PAGE电泳检测。结果:RNA提取物经紫外分光光度计检测OD260/OD280=1.77,说明无明显的蛋白质和酚污染。RT-PCR扩增目的片段,测序证明该基因的ORF为1 206 bp,编码402个氨基酸组成的酶蛋白(GNE)。SDS-PAGE显示,纯化蛋白为45 kD的单一条带,与基因序列推测值一致。结论:GNE基因已被成功地克隆和表达。
- 余云彦张卫星闫欣欣唐琴琴刘乃华晏永波李校林绍强
- 关键词:基因克隆纯化