屈洪波
- 作品数：25 被引量：120H指数：6
- 供职机构：郴州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默HIF-2α表达对低氧下乳腺癌干细胞微球体富集的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨沉默低氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)表达对低氧下乳腺癌干细胞(breast cancerstem cells,BCSCs)微球体富集的影响。方法:构建HIF-2αRNA干扰慢病毒载体,并转染至MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot检测HIF-2αmRNA及蛋白表达;MTT检测MCF-7细胞在不同氧浓度下增殖活性;显微镜下观察低氧下BCSCs微球体形成情况;有限稀释法检测微球体细胞单克隆形成能力;RT-PCR检测微球体细胞干细胞相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达。结果:成功构建了HIF-2α基因siRNA慢病毒表达载体,RT-PCR和Western blot结果显示干扰组细胞HIF-2αmRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与未转染组及空载体组比较,低氧下RNA干扰组细胞增殖活性及BCSCs单克隆形成能力明显降低(P<0.05);RT-PCR结果亦显示RNA干扰组BCSCs相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:低氧能够诱导和强化MCF-7细胞乳腺癌癌干细胞样特性,而沉默HIF-2α表达可抑制低氧下BCSCs富集,提示HIF-2α有望成为乳腺癌治疗新的靶点。
- 屈洪波范原铭韩明利陈鑫吴诚义汤为学
- 关键词：MCF-7
- 胰高血糖素瘤的诊治现状被引量：3
- 2014年
- 胰高血糖素瘤是一种罕见的消化道神经内分泌肿瘤,发病率约为13.5/2000万,占所有神经内分泌肿瘤的1％以下.自本病被发现至2012年,我国仅有61例被报道.因其罕见,临床医生对本病认识不足,极易漏诊、误诊,为此作者对相关文献进行复习并作一综述.
- 刘毫吴诚义朱之坤屈洪波韩明利曾妮
- 关键词：胰高血糖素瘤神经内分泌肿瘤诊治临床医生消化道发病率
- 胰高血糖素瘤1例报道及文献复习
- 2014年
- 目的探讨胰高血糖素瘤的临床特征及诊治方法。方法报道重庆医科大学附一院新发胰腺胰高血糖素瘤临床案例1例,并对该病相关文献进行复习。结果胰高血糖素瘤主要来源于胰腺α2细胞,少数来自于胃或十二指肠的氨前体摄取和脱羧细胞,以坏死性溶解性游走性红斑、糖尿病、消瘦、贫血等为主要临床表现,手术疗效理想。结论胰高血糖素瘤是一种临床上罕见的消化道神经内分泌肿瘤,手术切除是其最为有效的治疗手段。
- 刘毫吴诚义朱之坤屈洪波
- 关键词：糖尿病胰高血糖素瘤胰腺
- FOXC2介导Hedgehog/Gli信号通路对乳腺癌侵袭及迁移的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨FOXC2介导Hedgehog/Gli信号通路通过调控上皮间质转化(EMT)途径参与乳腺癌侵袭及迁移的机制。方法应用不同浓度环靶明(Cyclopamine)处理乳腺癌MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率及计算药物半数抑制浓度(IC50);采用Cyclopamine或沉默FOXC2基因表达以阻断Hedgehog/Gli信号通路活化;通过Transwell小室体外侵袭实验及划痕实验分别检测阻断Hedgehog/Gli信号通路对MDA-MB-231细胞侵袭及迁移影响;Western blotting检测阻断前后Hedgehog/Gli信号通路分子Smoothened(Smo)、Gli1和EMT相关标志物FOXC2,E-cadherin及Vimentin蛋白表达变化。结果与空白对照组比较,Cyclopamine可显著地抑制MDA-MB-231细胞增殖并呈现时效-量效关系,48 h的IC50为25μmol/L。Transwell小室体外侵袭实验及划痕实验均显示,与未转染组及Control-siRNA组相比,FOXC2-siRNA组和Cyclopamine组细胞穿膜数及迁移率均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting显示,与未转染组及Control-siRNA组相比较,FOXC2-siRNA组及Cyclopamine组Smo、Gli1及FOXC2蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。而沉默FOXC2表达可显著降低Vimentin蛋白表达及增加E-cadherin蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FOXC2通过介导Hedgehog/Gli信号通路从而调控EMT促进乳腺癌侵袭及迁移,提示阻断该信号通路有望成为乳腺癌靶向治疗新线索。
- 屈洪波罗迪贤段丽丽胡雄强吴诚义
- 关键词：FOXC2上皮间质转化
- 沉默FOXC2对TGF-β_1诱导的MCF-7细胞上皮-间质转化的逆转作用被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨沉默叉头框C2(FOXC2)表达对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人乳腺癌MCF-7细胞上皮-间质转化(EMT)的逆转作用和对乳腺癌侵袭性的影响。方法:将体外培养的MCF-7细胞用5μg/L TGF-β1处理,相差显微镜观察细胞形态学变化;免疫荧光检测EMT相关标志物表达。慢病毒介导的FOXC2-siRNA载体转染至TGF-β1诱导成功的MCF-7细胞,以RT-PCR和Western blotting方法检测FOXC2及EMT相关标志物上皮性钙黏蛋白(E-cad)、紧密连接蛋白1(CLDN1)、纤维连接蛋白1(FN1)mRNA及蛋白表达;Transwell小室模型检测沉默FOXC2表达对TGF-β1诱导的MCF-7细胞侵袭性的影响。结果:TGF-β1可诱导MCF-7细胞向间质样细胞表型转换,并上调间质样标志物FN1表达和下调上皮样标志物E-cad及CLDN1表达;而沉默FOXC2表达可逆转已间质化的MCF-7细胞恢复至上皮表型,并降低其侵袭性。结论:TGF-β1可诱导人乳腺癌MCF-7细胞发生EMT并增加其侵袭性,且TGF-β1这种诱导作用能被FOXC2-siRNA所逆转,并降低细胞的侵袭能力。
- 屈洪波吴诚义范原铭韩明利陈鑫汤为学
- 关键词：上皮-间质转化FOXC2MCF-7细胞转化生长因子Β
- 上皮间质转化与乳腺癌的研究进展被引量：2
- 2012年
- 在肿瘤演进中,原发性肿瘤中的一些细胞再次激活调控胚胎发育被称之为上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的潜在途径,使得上皮细胞获得间质细胞特征,更易发生侵袭和转移。EMT的异常激活与高侵袭基底型乳腺癌相关,提高了细胞生存能力、获得干细胞潜能及增强其侵袭转移能力,EMT化的癌干细胞对常规治疗更具有抵抗性。本文总结了与EMT相关的调控因子及癌干细胞在乳腺癌进展中的作用。
- 屈洪波吴诚义
- 关键词：上皮间质转化癌干细胞乳腺癌
- 沉默HIF-2α对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨RNA干扰（RNAi）沉默HIF-2α表达对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响。方法将慢病毒介导HIF-2α基因RNAi载体质粒和空载体质粒转染至MCF-7细胞株，G418筛选获得稳定转染细胞株。将空载体组及干扰组MCF-7细胞注射接种至裸鼠左右侧背部近后肢皮下，比较成瘤时间，肿瘤体积及瘤体重量等；Western印迹检测移植瘤组织中HIF-2α、CIM4、OCT-4及KLF4蛋白表达。结果成功构建HIF-2α基因RNAi慢病毒载体，沉默HIF-2α表达降低乳腺球的形成；与空载体组比较，干扰组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低（P〈0．05）。Western印迹显示干扰组HIF-2α蛋白表达量（0．42±0．01）明显低于空载体组（0．89±0．03，P〈0．05），CD44蛋白表达量（0．21±0．01）明显低于空载体组（0．78±0．03，P〈0．05），OCT-4蛋白表达量（0．134-0．01）明显低于空载体组（0．68±0．03，P〈0．05），KLF4蛋白表达量（0．34±0．01）明显低于空载体组（0．72±0．03，P〈0．05）。结论RNAi沉默HIF-2α表达明显抑制低氧下乳腺球细胞裸鼠移植瘤生长，其机制可能通过下调干细胞标志物表达抑制乳腺癌细胞自我更新和增殖，HIF-2α有望成为乳腺癌基因治疗新的靶点。
- 屈洪波范原铭韩明利曾妮朱之坤刘红谢佳吴诚义汤为学
- 关键词：RNA干扰移植物
- 基底型和HER2过表达型BCSCs裸鼠移植瘤生物学特性的比较
- 2013年
- 目的建立基底型及HER2过表达型乳腺癌干细胞(BCSCs)裸鼠移植瘤模型,比较两亚型BCSCs生物学特性。方法以临床乳腺癌组织标本为研究对象,通过无血清悬浮培养筛选原代BCSCs;有限稀释法检测BCSCs自我更新能力;体内裸鼠移植瘤实验比较两亚型BCSCs成瘤时间、瘤体体积及瘤体质量,绘制生长曲线;Western blot检测肿瘤组织E-cadherin、N-cadherin、MMP2及MMP7蛋白表达。结果无血清悬浮培养能有效筛选出BCSCs;有限稀释实验显示HER2过表达型及基底型BCSCs含量分别为(4.55±0.19)%和(0.90±0.04)%,前者是后者的5.0倍;两亚型BCSCs成瘤率均为100%;HER2过表达型移植瘤生长速率、瘤体体积和质量均高于基底型乳腺癌(P<0.05)。Western blot显示HER2过表达型乳腺癌间质样标志物N-cadherin及侵袭相关标志物MMP2、MMP7蛋白表达明显上调(P<0.05),上皮样标志物E-cadherin蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论成功建立基底型及HER2过表达型乳腺癌裸鼠移植瘤模型,HER2可能通过调控EMT增强HER2过表达型BCSCs体外自我更新能力、体内致瘤性及侵袭性。
- 屈洪波吴诚义汤为学
- 关键词：乳腺癌干细胞移植瘤分子亚型生物学特性
- FOXC2在乳腺癌侵袭迁移及BCSCs“干性”维持中的作用及机制探讨
- 第一部分FOXC2在不同分子亚型的乳腺癌组织和不同侵袭潜能的乳腺癌细胞中的表达 FOXC2是属于叉头框（Forkhead Box, FOX）家族蛋白成员之一，其功能涉及胚胎发育、细胞周期调控、糖类、脂类代谢等多种生物学过...
- 屈洪波
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞上皮间质转化干性
- 文献传递
- 阻断PI3K/Akt信号通路对低氧微环境中BCSCs微球体细胞增殖的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨LY294002特异性阻断磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信号通路对低氧条件下乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)微球体细胞增殖的影响。方法:通过无血清悬浮培养技术从人乳腺癌MCF-7细胞中筛选BCSCs微球体,应用免疫荧光染色检测BCSCs相关标志物CD44及CD133的表达,MTT法检测不同浓度LY294002处理后BCSCs微球体细胞的增殖情况,RT-PCR法检测BCSCs微球体细胞中缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)mRNA的表达,蛋白质印迹法检测BCSCs微球体细胞中HIF-2α、PI3K和磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白的表达。结果:筛选获得的微球体细胞高表达BCSCs相关标志物CD44和CD133。LY294002能有效抑制低氧条件下BCSCs微球体细胞的增殖,抑制效应在药物作用后72～96h最为明显(P<0.05)。与低氧组比较,低氧+LY294002组微球体细胞中HIF-2αmRNA及PI3K、p-Akt和HIF-2α蛋白表达水平均明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LY294002通过特异性阻断PI3K/Akt信号通路而有效抑制低氧条件下BCSCs微球体细胞的体外增殖能力。
- 屈洪波韩明利范原铭曾妮朱之坤吴诚义汤为学
- 关键词：乳腺肿瘤细胞低氧微球体乳腺癌干细胞
