刘成刚 作品数:69 被引量:249 H指数:9 供职机构: 空军总医院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 “首都临床特色应用研究”专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人内皮抑素基因克隆及在大肠杆菌中的表达 2000年 目的 :获得具有抑制血管内皮细胞生长活性的重组人内皮抑素蛋白。 方法 :从人胎肝中分离总 RNA,经反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)得到 endostatin全基因。用原核细胞表达载体构建了 p BV2 2 0 /endostatin重组质粒 ,经 DNA测序确认后 ,将其转化大肠杆菌 DH5 a进行表达、初步纯化及活性测定。 结果 :经 SDS- PAGE电泳分析表达产物分子量约 2 0 Kda,薄层扫描显示表达产物可达细菌总蛋白的 30 %。 结论 :经生物学活性测定 ,表达蛋白能够抑制 b FGF(碱性成纤维细胞生长因子 )对牛毛细血管内皮细胞 (BCEC)的增殖作用。 李文 朱美财 王荫静 占志 刘成刚 向培德关键词:人内皮抑素 基因克隆 大肠杆菌 血管内皮生长因子 聚合酶链反应 基因表达 全文增补中 肝癌单克隆抗体F(ab′)_2段与葡萄球菌肠毒素A结合物的制备及其活性 被引量:1 1998年 目的:制备超抗原(SAg)葡萄球菌肠毒素A(SEA)与抗人肝细胞癌单克隆抗体(McAb)HAb18F(ab′)2段的结合物,并对其活性进行鉴定.方法:提取MCAbHAb18并用木瓜蛋白酶切取其F(ab′)2段,用SPDP制备HAb18F(ab′)2-SEA结合物,凝胶色谱柱纯化后用SDS-PAGE鉴定各收集峰,免疫组化ABC法鉴定结合物中的HAb18F(ab′)2的抗体活性,MMT法鉴定结合物中的SEA活化T细胞的活性.结果:成功地制备了HAb18F(ab′)2-SEA结合物,并且制备的结合物具有肝癌抗体活性和活化外周血单个核细胞的功能.结论:SPDP是一种很好的蛋白质交联剂,本实验制备的HAb18F(ab′)2-SEA结合物可用于McAb与SAg结合物导向治疗肝癌的实验研究. 杨连君 隋延仿 陈志南 刘成刚 王文学关键词:肝癌 单克隆抗体 葡萄球菌肠毒素 超抗原 2型糖尿病肾病患者血清25-OH-VD水平与相关因素分析 被引量:3 2016年 目的分析不同阶段糖尿病肾病患者的25-羟基维生素D(25-hydroxyvitamin D,25-OH-VD)水平与β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、血肌酐(serum creatinine,Scr)等指标的相关性。方法将112例糖尿病患者按尿微量白蛋白/肌酐比值和Scr水平分为正常蛋白尿组(A组)、微量蛋白尿组(B组)、大量蛋白尿组(C组)及肾功能不全组(D组)各28例,检测其血清25-OH-VD水平和相关生化指标并对结果进行统计学分析。以25-OH-VD为分组依据分为维生素D缺乏组(25-OH-VD<25nmol/L)和维生素D不足组(25nmol/L≤25-OH-VD<75nmol/L),比较两组白蛋白尿的发生率。结果 25-OH-VD水平在A组、B组、C组、D组呈逐渐减少趋势,组间各均数比较具有统计学意义(P<0.05);25-OH-VD与Scr、β2-MG呈负相关(P<0.01);维生素缺乏组与不足组的蛋白尿发生率分别是98%、55%(P<0.01)。结论25-OH-VD水平与糖尿病肾病相关,并对糖尿病肾病的治疗监测具有重要意义。 孙立美 马红雨 朱美财 董磊 刘成刚关键词:2型糖尿病 一种新型纤溶酶原激活剂(TPA)突变体的结构与用途 本发明是根据TPA的结构特点,在将TPA分子中指状区和Kringlel区去掉的基础上,将TPA分子中PAI-1结合位点氨基酸进行突变,构建具有TPA活性且其活性不被PAI-1抑制的新一代TPA突变体。主要内容是扩增出天然... 朱美财 李文 占志 王荫静 刘成刚文献传递 歼击机飞行员心血管疾病谱分析 被引量:40 2006年 郑军 徐先荣 陈立君 刘成刚 王露今 王勇关键词:飞行员 心血管疾病 疾病谱分析 白癜风患者血清免疫球蛋白、补体、自身抗体检测及分析 被引量:12 2017年 目的检测白癜风患者血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4,抗核抗体(ANA)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(A-TPO)、抗甲状腺球蛋白抗体(A-TG)的水平并进行比较分析。方法收集门诊确诊为白癜风的患者血清168例和正常体检人群血清88例,性别、年龄分布无统计学差异,采用速率散射比浊法检测白免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4,采用ELISA法检测抗核抗体,采用电化学发光免疫分析法检测A-TPO、A-TG,结果用SPSS19.0统计软件进行分析。结果白癜风患者组血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4表达水平与正常人对照组差异不具有统计学意义(P>0.05);白癜风组与正常对照组ANA阳性率分别为8.1%和5.7%,经比较差异不具有统计学意义(P>0.05);两组间A-TPO的阳性率分别为18.8%和10.2%,差异有统计学意义(P<0.05);两组A-TG阳性率分别为25.8%和4.5%,经比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论部分白癜风患者存在体液免疫紊乱,在发病机制上可能与自身免疫性甲状腺疾病有相似之处;免疫球蛋白、补体及抗核抗体等免疫指标的检测在白癜风诊治中评价的意义不大。 刘成刚 杨慧 李建标 任曲 朱美财关键词:白癜风 免疫球蛋白 补体C3 抗核抗体 抗甲状腺过氧化物酶抗体 抗甲状腺球蛋白抗体 高效凝胶色谱一步法制备级纯化单克隆抗体 被引量:4 1995年 作者采用PharmaciaSephacrylS—300凝胶色谱柱,建立了IgG类McAb的一步法制各级纯化方法。该法是将McAb腹水直接上样,用pH7.410mmol/LPBS洗脱(流速0.5ml/min),即得到纯化的McAb。一次上样量40~50ml腹水,回收率为85%-90%.整个纯化周期4h。纯化的McAb经SDS—PAGE测定,纯度>90%,免疫组化ABC法测定活性为1:80000(7.8×10-11mol/L)。该法操作简单、快速,只要有一台核酸/蛋白检测仪,便可进行制备级水平的纯化。 刘利 刘智广 刘成刚 陈志南 隋延仿 徐力青关键词:单克隆抗体 纯化 抗肝癌抗巨噬细胞双功能抗体对荷人小鼠的抑瘤作用 1996年 抗肝癌抗巨噬细胞双功能抗体对荷人小鼠的抑瘤作用王茜王文亮陈志南刘智广刘成刚米力徐力青肝癌对化学药物治疗及放射治疗均不敏感。近年来,许多学者致力于肝癌导向治疗的研究。双功能抗体(BsAb)能同时识别两种抗原,将药物、毒素或细胞毒性细胞直接射向瘤细胞,因... 王茜 王文亮 陈志南 刘智广 刘成刚 米力 徐力青关键词:肝肿瘤 巨噬细胞 抑瘤作用 中等水平+G_z暴露对飞行员尿微量白蛋白、尿α1微球蛋白及尿常规检测指标的影响 被引量:1 2007年 目的观察中等水平+G_z 暴露对飞行员尿微量白蛋白(MA)、尿α_1微球蛋白(α_1M)及尿常规10项检测指标的影响。方法33名歼击机飞行员接受离心机基础+G_z 耐力检查,最高加速度暴露水平为+4.25 G/10 s,观察10名飞行员+G_z 暴露后2 h 和23名飞行员+G_z 暴露后24 h尿液指标中 MA、α_1M 和尿常规10项指标的变化情况。结果离心机检查前,33名飞行员尿液指标检测结果均正常。离心机检查完毕所有飞行员均无明显不适主诉。离心机检查后2 h 有1名飞行员尿 MA 高于正常值,1名飞行员尿α_1M 高于正常值,次日复查正常,尿常规10项检测结果均正常,但+G_z 暴露后2 h 尿比重略有减小(t=4.129,P<0.01),pH 值略有增加(t=6.530,P<0.01)。离心机检查后24 h,有1名飞行员尿 MA 升高,1名飞行员尿α_1M 升高,1名飞行员尿常规10项检测检出少量红细胞,+G_z 暴露后24 h 尿比重及 pH 值与暴露前比较差异不显著。与离心机检查前比较,检查后2 h、24 h 尿 MA 和α_1M 均无明显差异(t=1.616、0.376、0.640、0.422,P>0.05)。结论中等水平+G_z 暴露对少部分飞行员肾功能指标有轻微影响,个别人员可出现短暂异常,应注意加强+G_z 暴露后飞行员肾功能的监测和保护。 刘成刚 李建标 朱美财 郑军关键词:肾功能试验 尿分析 微量白蛋白 Α1微球蛋白 感光受体外周蛋白结合蛋白对虫荧光素酶体外折叠的促进作用 探讨感光受体外周蛋白结合蛋白(PBP)在体外是否有促进变性蛋白质复性的作用。虫荧光素酶用盐酸胍变性,然后在PBP、HSP70、HSP60存在下进行体外复性,用虫荧光素酶分析系统检测该酶的复性程度。结果显示PBP对虫荧光素... 刘成刚 朱美财 占志 王荫静 李文 刘亚宁关键词:热休克蛋白 虫荧光素酶 复性 文献传递