刘丹丹
- 作品数：14 被引量：54H指数：4
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目黑龙江省科技攻关计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- Asia1型FMDV非结构蛋白3A基因的克隆、表达与抗原性鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了研究Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3A的抗原性,试验对Asia1型口蹄疫病毒非结构蛋白3A基因进行扩增、亚克隆及测序,将3A克隆至表达载体pET-32a(+)中,选取阳性克隆转化Rosetta(DE3)pLysS大肠杆菌感受态细胞,用IPTG诱导表达和纯化3A蛋白,并进行SDS-PAGE鉴定与Western-blot分析。结果表明:在大肠杆菌中成功地表达了3A蛋白,表达的目的蛋白能与Asia1型FMDV阳性血清发生特异性反应。说明非结构蛋白3A具有较好的抗原活性。
- 宋军高明春宋鸽刘丹丹王君伟
- 关键词：非结构蛋白
- 刈割次数对紫花苜蓿根系中保护酶活性的影响被引量：12
- 2006年
- 在哈尔滨地区对当年种植的紫花苜蓿进行不同刈割次数处理,越冬期间取样测定其根系中过氧化物酶(POD)和超氧化物岐化酶(SOD)活性。结果表明:不同刈割次数对越冬期间紫花苜蓿的POD和SOD活性具有显著的影响,超过1次的刈割会显著降低紫花苜蓿的POD和SOD活性及抗寒能力,并且随着刈割次数的增加紫花苜蓿的POD和SOD活性及抗寒能力随之下降。
- 迟文峰刘丹丹李钢崔国文
- 关键词：紫花苜蓿刈割次数过氧化物酶活性
- 复合性水稻秸青贮专用添加剂
- 本发明提供的是一种复合型水稻秸青贮专用添加剂及其制备方法。将新鲜的青绿植株20g-40g加100-200g的无菌蒸馏水，在混合搅拌机中充分磨碎搅拌，用无菌纱布过滤得到绿汁液，绿汁液在30℃厌氧发酵48小时，然后将发酵液稀...
- 张永根华金玲刘丹丹张新慧
- 文献传递
- 不同浓度绿汁发酵液和脱氢乙酸钠对青贮水稻秸品质和有氧稳定性的影响
- 本研究进行的水稻秸青贮技术的探索，首次采用机械割前脱粒后的水稻秸，采用两种新型添加剂(绿汁发酵液和脱氢乙酸钠)进行青贮，不仅可以解决粗饲料不足的问题，还可以有效地改善由于焚烧或者处理不当而造成的环境污染。
试验...
- 刘丹丹
- 关键词：青贮饲料发酵品质
- 文献传递
- 牛IFN-γ单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2011年
- 为进一步研究牛IFN-γ(BoIFN-γ)单克隆抗体在牛免疫学以及牛疫病诊断中的应用,用原核表达的重组牛IFN-γ(rHis-BoIFN-γ)免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,免疫3次后取其脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。用建立的间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经3～5次亚克隆,最终获得12株能稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株。Ig亚类鉴定结果显示这12株杂交瘤细胞均为IgG,其中5株为IgG1,3株为IgG2a,4株为IgG2b。这12株杂交瘤细胞在体外具有稳定分泌抗牛IFN-γ单克隆抗体的能力。Western-blot及间接ELISA证明这12株单克隆抗体均可特异性地结合rBoIFN-γ蛋白。间接免疫荧光试验显示,这12株单抗均与真核细胞BHK-21表达的rBoIFN-γ产生荧光反应,证明这些单抗能够与接近天然的BoIFN-γ反应,证实了单抗的特异性。ELISA叠加试验表明,3C2与1H4、1G6与1G4针对不同表位,1A10、1B2、2B9、3C4四株和1C1与1G6、1G4与3C2、1A10与1G8针对相同或相近的表位。
- 曹黎黎刘丹丹卫娜高明春王君伟
- 关键词：单克隆抗体特异性鉴定
- 口蹄疫病毒非结构蛋白3AB单克隆抗体的制备及其对应表位区分析被引量：1
- 2011年
- 为鉴定口蹄疫病毒(FMDV)的非结构蛋白3AB的抗原表位,本研究以原核表达并纯化的FMDV 3AB重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,获得6株能够稳定分泌抗3AB蛋白特异性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞。这6株MAbs亚类鉴定均为IgG1型,轻链均为κ链。间接免疫荧光试验结果表明,这6株MAbs均能够识别FMDV 3AB蛋白。采用制备的MAb对分段表达的3AB蛋白进行western blot分析,结合位点分别位于3AB的第aa 55～aa 70、aa 64～aa 79、aa 130～aa 145区段。该结果为进一步探索3AB蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。
- 刘丹丹高明春宋军宋鸽曹永生张润祥李爽于力王君伟
- 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体
- 复合性水稻秸青贮专用添加剂
- 本发明提供的是一种复合型水稻秸青贮专用添加剂及其制备方法。将新鲜的青绿植株20g－40g加100－200g的无菌蒸馏水，在混合搅拌机中充分磨碎搅拌，用无菌纱布过滤得到绿汁液，绿汁液在30℃厌氧发酵48小时，然后将发酵液稀...
- 张永根华金玲刘丹丹张新慧
- 文献传递
- 一种紫薯薏米乳饮料的制作方法
- 本发明公开了一种紫薯薏米乳饮料的制作方法，本发明以紫薯、薏米和牛乳为主要原料，添加白砂糖、柠檬酸及增稠剂等组分，经科学调配，制得紫薯薏米乳饮料。采用本发明的方法可以直接制得紫薯薏米乳饮料产品为淡紫色，口感细腻，酸甜适中，...
- 孙冬雪李天齐马灵李桐刘丹丹
- 文献传递
- 替代农药的加热式高效除虫装置
- 替代农药的加热式高效除虫装置，属于害虫防治技术领域，替代农药的加热式高效除虫装置由黑色塑料薄膜（1）、膜绵腔（2）、海绵层（3）、导热体（4）、导热体帽（5）、导热体杆（6）、散热片（7）、导热体杆孔（8）、导热体杆尖（...
- 刘大伟刘丹丹
- 文献传递
- 牛口蹄疫病毒VP2结构蛋白抗体间接ELISA方法的建立被引量：5
- 2010年
- 为建立牛口蹄疫(FMD)抗体的检测方法,本研究将口蹄疫病毒(FMDV)的VP2基因,通过pPROEXTM HTb表达载体在大肠杆菌DH5α中表达,获得大小为35ku的重组VP2蛋白(rVP2),western blot证实rVP2可与FMDV5种血清型的牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的rVP2为抗原建立了FMDVrVP2间接ELISA方法。重复性试验证实批内、批间变异系数均小于10%。特异性交叉试验表明,该抗原不与常见的其他7种牛病阳性血清发生交叉反应。检测非免疫无口蹄疫国家牛阴性血清的特异性为100%;检测感染血清敏感性为97.3%;检测O-AsiaⅠ的二价苗免疫牛血清,与4种商品化试剂盒比较,其符合率分别为69.0%、95.0%、90.4%和86.8%。实验结果表明建立的ELISA方法可以用于口蹄疫感染和免疫抗体检测。
- 张润祥高明春曲哲会李爽曹永生宋军宋鸽刘丹丹王君伟
- 关键词：口蹄疫病毒VP2蛋白间接ELISA
