付瑞玲
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：重庆市教委科研基金霍英东基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核菌H37Ra在小鼠体内诱导的免疫应答被引量：8
- 2008年
- 目的检测结核菌H37Ra免疫小鼠后产生的特异性细胞免疫和体液免疫应答水平。方法将BALB/c小鼠随机分为H37Ra组、BCG组和生理盐水(NS)组,分别进行免疫,免疫8周后处死小鼠,分离血清,ELISA间接法测定血清特异性抗PPDIgG抗体的水平,流式细胞分析仪检测脾脏T淋巴细胞亚群的变化。脾淋巴细胞经体外培养、PPD刺激后,MTT法检测脾淋巴细胞的刺激指数,ELISA法检测培养上清液中IFN-γ和IL-4的水平。结果H37Ra免疫小鼠血清中抗PPDIgG抗体、脾脏CD3+T细胞和CD4+T细胞的百分率、脾淋巴细胞刺激指数、IFN-γ和IL-4水平均显著高于NS对照组,但与BCG组差异无显著意义。各组间脾脏CD8+T细胞、CD4+T/CD8+T比值差异均无显著意义。结论H37Ra免疫小鼠后,可以产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答,有望成为结核疫苗的候选抗原。
- 刘来成王淑玲范雄林付瑞玲刘岚卢贤瑜
- 关键词：结核分枝杆菌H37RA细胞免疫应答体液免疫应答
- 结核菌H37Ra在小鼠体内诱导的免疫应答及其保护力
- 2009年
- 目的:研究结核菌H37Ra免疫小鼠后产生的特异性免疫应答以及保护效果。方法:BALB/c小鼠随机分为H37Ra组、BCG组和生理盐水(NS)组,免疫8周后处死部分小鼠,取脾淋巴细胞经体外培养、PPD刺激后,MTT法检测淋巴细胞的刺激指数,ELISA法检测培养上清液中IFN-γ和IL-4水平。另一部分免疫小鼠经腹腔感染结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuber-culosis,MTB)毒株H37Rv,4周后处死,测定小鼠脏器重量指数。取稀释的小鼠脾脏和肺脏匀浆接种于改良罗氏培养基,培养21天后计数脏器荷菌量。结果:H37Ra和BCG免疫小鼠脾淋巴细胞刺激指数、IFN-γ和IL-4水平均显著高于NS对照组。感染4周后H37Ra和BCG组小鼠脏器重量指数较NS对照组均显著降低。H37Ra组小鼠脾脏和肺脏荷菌量与NS对照组比较分别下降了1.228log10CFU和0.954log10CFU,差异有显著性(P<0.05),与BCG组之间差异均无显著性。结论:H37Ra免疫小鼠后可以诱导产生Th1型免疫应答,能够抵抗毒株H37Rv的攻击,且免疫效果与BCG相当。
- 刘来成王淑玲范雄林付瑞玲吴扬卢贤瑜
- 关键词：H37RABCG免疫应答免疫保护
- 结核分枝杆菌Ag85A蛋白的原核表达、纯化和免疫反应性被引量：5
- 2010年
- 目的通过原核表达获得结核分枝杆菌Ag85A蛋白。方法用PCR从结核分枝杆菌H37Rv菌株中扩增出编码Ag85A的fbpA基因,克隆入原核表达载体pProEXHTb,产生重组质粒pPro85A后,转化至大肠杆菌感受态细胞BL21并诱导大量表达。用镍纯化系统纯化重组Ag85A蛋白,用不同分枝杆菌感染的小鼠血清通过ELISA确定其免疫反应性。利用PCR技术鉴定fbpA基因在不同分枝杆菌的分布。结果32 ku的Ag85A蛋白获得高效表达和纯化。表达Ag85A蛋白的fbpA基因在结核分枝杆菌H37Rv、H37Ra、BCG、草分枝杆菌、土地分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和次要分枝杆菌中均有表达,但在牝牛分枝杆菌中未表达。结核病患者和结核分枝杆菌毒株H37Rv感染小鼠血清所产生的抗Ag85A抗体滴度最高。结论重组Ag85A蛋白已成功表达纯化,并保留了免疫反应性。
- 邓毛子石春薇王芳付瑞玲王春方正明范雄林
- 关键词：结核分枝杆菌AG85A原核表达纯化免疫反应性
- 结核菌H37Ra诱导迟发型超敏反应的探讨
- 2008年
- [目的]探讨结核分枝杆菌H37Ra免疫小鼠后能否诱发迟发型超敏反应及最佳的观测时间。[方法]Balb/c小鼠随机分为3组。分别用H37Ra、BCG和NS皮内免疫,6周后每组小鼠皮内注射PPD,游标卡尺测定24、48和72h局部皮肤红肿、硬结直径。[结果]H37Ra组24、48和72h的局部皮肤红肿、硬结直径结果分别是(6.17±0.20)、(5.23±0.35)、(3.59±0.40)mm,24和48h反应稍弱于BCG组[(6.71±0.66)、(5.89±0.52)mm],无统计学意义(P﹥0.05)。与NS对照组相比,H37Ra和BCG免疫小鼠后均能诱导显著的迟发超敏型反应(P﹤0.05)。H37Ra组和BCG组均24h反应最明显。[结论]结核分枝杆菌H37Ra免疫小鼠6周后能诱导迟发型超敏反应,较BCG弱;24h为最佳观测时间。
- 王淑玲刘来成范雄林付瑞玲卢贤瑜
- 关键词：结核分枝杆菌H37RABCG迟发型超敏反应
