赵雅芳
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:河北医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:环境科学与工程生物学更多>>
- 阿特拉津降解菌株中三嗪水解酶的鉴定及酶学研究
- 阿特拉津(atrazine),商品名莠去津,是一种在世界范围内广泛使用的三嗪类除草剂。由于其在环境中稳定存在,不易降解,造成了生态环境的破坏,威胁到人类食品及饮用水的安全。阿特拉津降解菌株根据其降解基因的组成,可以分为三...
- 赵雅芳
- 文献传递
- 工业废水中阿特拉津降解细菌的遗传和生理多样性被引量:1
- 2014年
- 【目的】通过遗传学和生理学实验,揭示分离自工业废水的阿特拉津降解细菌具有遗传和生理多样性,为阐明阿特拉津生物降解的分子机理和阿特拉津降解细菌在污染环境生物修复中的应用提供新见解。【方法】用普通PCR方法检测菌株的阿特拉津降解基因,分析其降解基因组成;用基因组重复序列PCR技术(rep-PCR)分析降解菌株的基因组类型;用Western blot方法检测菌株阿特拉津降解途径的第一个酶三嗪水解酶(TrzN);用不同氮源(阿特拉津、莠灭净、扑草净、西玛津、氰草净、阿特拉通和氰尿酸)和碳源(蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、乳糖、柠檬酸钠、乙酸钠和琥珀酸钠)培养降解菌株,通过检测培养液的OD600值,证明菌株能够利用的氮源和碳源种类。【结果】对分离自工业废水的27个阿特拉津降解菌株所进行的阿特拉津降解基因PCR检测表明,其降解基因组成分别为trzN-atzBC、trzN-atzABC和atzADEF;通过rep-PCR实验将27个阿特拉津降解菌株分为7个群;Western blot结果表明,27个菌株中有24个含有三嗪水解酶TrzN;氮源利用实验表明,2个菌株能够利用所有7种氮源生长,其余25个菌株只能利用其中的2-6种;碳源利用实验表明,10个菌株能够利用所有7种碳源生长,其余17个菌株只能利用其中的3-6种。【结论】分离自某工业废水的27株阿特拉津降解功能菌存在相当广泛的遗传和生理学上的多样性,trzN-atzABC降解基因组成为首次发现。
- 郭巧云牛淑敏赵化冰赵雅芳蔡宝立
- 关键词:阿特拉津生物降解细菌多样性
- 假单胞菌AD39菌株三嗪水解酶基因trzN的克隆、表达和酶鉴定
- 2012年
- 来自Pseudomonassp.AD39菌株的三嗪水解酶TrzN,能催化除草剂阿特拉津的水解脱氯反应,将阿特拉津转化成羟基阿特拉津.AD39菌株的TrzN以组氨酸标签蛋白的形式在大肠杆菌中表达,重组蛋白用镍柱亲和层析法纯化.纯化的TrzN蛋白能以阿特拉津、阿特拉通、杀草净、扑草净、莠灭净和西玛津等6种三嗪类除草剂为催化底物,其中对莠灭净的催化活力最高.酶学实验表明,催化反应的最适pH为8.0,Co2+、Fe2+、Ca2+、Mg2+和Mn2+等金属离子对TrzN有激活作用,Zn2+、Cu2+和Ni2+等金属离子对TrzN的酶活力有抑制作用.酶动力学实验显示,TrzN蛋白的Km为41.47μmol.L-1,Vmax为2.48μmol.min-1mg-1.
- 赵雅芳赵化冰孙素菊蔡宝立
- 关键词:酶学性质酶动力学