缪应业
- 作品数：17 被引量：84H指数：4
- 供职机构：解放军152医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰技术及其在前列腺癌基因治疗研究中的应用被引量：1
- 2006年
- RNA干扰(RNA i)是指生物体内由双链RNA(dsRNA)介导同源序列mRNA的特异性降解,从而导致基因沉默的现象。近年来,随着对RNA i研究的不断深入,其作用机制正逐步阐明;同时作为阻断基因表达的新手段,RNA i技术也日趋完善和成熟。它具有高效性和特异性,为RNA i在肿瘤的基因治疗方面的应用提供了有力的工具。本文综述RNA i技术的有关研究进展及其在前列腺癌基因治疗研究中的应用。
- 缪应业刘家云田晋洪苏明权
- 关键词：前列腺肿瘤基因疗法RNA
- 应用RNA干扰技术阻断PC-3细胞中survivin基因的表达被引量：4
- 2006年
- 目的：用真核转录载体pSilencer^TM3.1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体,并转染前列腺癌细胞系PC-3,通过RNA干扰（RNAi）阻断PC-3细胞中survivin基因的表达,并研究survivin基因沉默后对PC-3细胞凋亡产生的影响.方法：将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer^TM3.1-H1 neo线性质粒用T4DNA连接酶连接,重组质粒经酶切及DNA测序鉴定后,用脂质体法转染PC-3细胞,通过RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色实验检测survivin的表达变化,并用流式细胞术检测转染后PC-3细胞的凋亡变化,MTr法检测细胞生长速度的变化.结果：酶切及测序证实设计合成的DNA已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色实验表明,pSilencer3.1-SVV2和pSilencer3.1-SVV3重组载体有效地阻断了PC-3细胞中survivin基因的表达,survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调（P＜0.01）,转染后PC-3细胞的凋亡增加了10%～15%,细胞生长速度明显变慢.结论：成功构建了针对survivin基因的真核转录载体pSilencer3.1-SVV1、pSilencer3.1-SVV2和pSilencer3.1-SVV3,后两者可有效地阻断前列腺癌细胞系PC-3细胞中survivin基因的表达,并使转染后PC-3细胞的凋亡增加了10%～15%,细胞生长速度明显变慢.
- 沈建军郝晓柯刘家云苏明权缪应业张青
- 关键词：RNA干扰SURVIVIN前列腺癌细胞
- 中文ACCESS2000在检验结果中的应用被引量：3
- 2003年
- 李浩刘宏伟缪应业
- 关键词：中文ACCESS2000数据库软件
- 速率法测定酶活性线性范围的分析与设定被引量：1
- 2003年
- 酶法测定都有线性范围规定,如果标本酶活性过高,超过线性范围,则需要对标本稀释重做,然后乘以稀释倍数.我们在实践操作中发现,有些标本虽然超过线性范围,但反应进程曲线显示仪器仍能对其准确测定,而不需要对标本进行稀释重做.
- 李浩缪应业秦晓燕
- 关键词：速率法
- 沉默激酶功能区受体抑制前列腺癌PC-3细胞的裸鼠体内成瘤能力
- 2013年
- 目的研究激酶功能区受体(KDR)基因表达沉默后对前列腺癌PC-3细胞裸鼠体内成瘤能力的影响。方法将15只5周龄BALB/c雄性裸鼠随机分为干扰组、阴性质粒组和未转染组,每组5只。分别接种构建的pSilencer 3.1-KDR siRNA表达质粒转染PC-3细胞、阴性对照质粒pSilencer3.1-NC转染PC-3细胞以及未转染的PC-3细胞于裸鼠皮下;观察各组PC-3细胞在裸鼠体内成瘤率、瘤体生长速度以及平均瘤质量等方面的变化,RT-PCR和Western blot技术检测瘤体KDR基因和蛋白表达。结果pSilencer3.1KDR质粒转染组的裸鼠瘤体生长速度明显慢于未转染组和pSilencer3.1-NC质粒转染组;与未转染组和PSilencer3.1-NC组相比,pSilencer3.1-KDR组肿瘤的生长受到明显抑制,平均体积较小(0.28 cm3vs 0.721 cm3,0.715 cm3,P<0.01),平均瘤质量较轻(0.14 g vs 0.648 g,0.635 g,P<0.01);裸鼠肿瘤组织中KDR mRNA和蛋白的表达明显降低。结论 RNAi介导的KDR基因沉默可显著影响PC-3细胞裸鼠体内的瘤体生长速度,KDR有可能成为肿瘤治疗的新靶点。
- 谢国旗易伟国刘新郭照静缪应业
- 关键词：裸鼠KDR前列腺癌PC-3细胞RNA干涉
- 应用RNAi技术阻断前列腺癌细胞系PC3中survivin基因的表达
- 目的:用siRNA表达载体pSilencerTM3．1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体,并转染前列腺癌细胞系 PC3,通过RNA干扰（RNA interference RNAi）阻断PC3细胞...
- 沈建军刘家云苏明权缪应业张青郝晓柯
- 关键词：RNA干扰SURVIVIN前列腺癌细胞
- 文献传递
- 用RNAi沉默KDR基因表达对前列腺癌细胞系PC3的影响
- 目的构建针对KDR基因的siRNA表达载体,并研究其对前列腺癌细胞系PC3 KDR表达的影响。方法将合成的 DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与 pSilencerTM3．1-H1 neo线性质粒用T4DN...
- 缪应业
- 文献传递
- RNAi介导的survivin基因沉默对PC-3细胞裸鼠体内成瘤能力的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究survivin基因表达沉默后对PC-3细胞的裸鼠体内成瘤率,瘤体生长速度,以及平均瘤重等方面产生的影响。方法:使用RNA干涉技术,用构建的pSilencer 3.1-SVV1、pSilencer 3.1-SVV2、pSilenc-er3.1-SVV3 siRNA表达质粒和阴性对照质粒pSilencer3.1-NC转染PC-3细胞,使PC-3细胞的survivin基因表达沉默,随后将细胞接种于裸鼠皮下,观察转染了各质粒的PC-3细胞在裸鼠体内成瘤率,瘤体生长速度,以及平均瘤重等方面的变化。结果:pSilencer 3.1-SVV2和pSilencer 3.1-SVV3质粒转染组的裸鼠肿瘤成瘤率明显下降,裸鼠瘤体生长速度明显慢于未转染组和pSilencer 3.1-NC质粒转染组(P<0.01)。实验终止时,肿瘤平均体积与瘤重与未转染组和pSilencer 3.1-NC质粒转染组相比减少50%-55%。结论:RNAi介导的survivin基因沉默可显著影响PC-3细胞裸鼠体内成瘤能力及瘤体生长速度。
- 沈建军刘家云缪应业苏明权张青郝晓柯
- 关键词：裸鼠SURVIVINRNA干涉
- 用RNAi沉默survivin基因表达对前列腺癌细胞系PC3的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断前列腺癌细胞系PC3中survivin基因的表达,并研究 survivin基因沉默后对PC3细胞产生的影响。方法:用真核转录载体pSilencerTM3．1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体pSilencer 3．1-SVV1、pSilencer 3．1-SVV2和pSilencer 3．1-SVV3,并用脂质体法转染前列腺癌细胞系PC3,通过RT- PCR、蛋白印迹实验检测sunrivin的表达变化,并用流式细胞术、MTT法检测转染后PC3细胞的凋亡、细胞周期、细胞生长速度、对顺铂的敏感性等芳面的变化。结果:重组载体pSilencer 3．1-SVV2和pSilencer 3．1-SVV3有效地阻断了PC3细胞中sur- vivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P<0．01)。重组载体转染PC3细胞后,与对照组相比,细胞的凋亡增加了10％- 15％;细胞生长速度明显变慢,其细胞数在84 h时与对照组相比减少约30％;G1期细胞增加了10％,G2期和S期细胞减少了 5％以上。加入顺铂后,pSilencer 3．1-SVV2、pSilencer 3．1-SVV3重组质粒转染的PC3细胞的存活数下降了35％-45％,细胞凋亡则增加了10％-14％。结论:初步证明了survivin基因在前列腺癌细胞分化增殖、抗凋亡等方面所扮演的重要角色,为进一步阐明survivin基因与前列腺癌的关系以及以survivin基因为靶点的前列腺癌基因治疗研究奠定了基础。
- 沈建军刘家云苏明权缪应业张青郝晓柯
- 关键词：SURVIVIN前列腺癌细胞
- 血管内皮生长因子及其受体KDR在前列腺癌细胞中的表达研究
- 2005年
- 目的：探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(KDR)在前列腺癌细胞中的表达及意义。方法：免疫细胞化学和Western blot检测体外培养的LNCaP,PC-3,PC-3M,DU-145和22RV1前列腺癌细胞中VEGF及其受体KDR的蛋白表达,RT-PCR检测mRNA,ELISA检测前列腺癌细胞培养上清VEGF蛋白含量。结果：免疫细胞化学染色显示VEGF和KDR在前列腺癌细胞LNCaP,PC-3,PC-3M,DU-145和22RV1中均有表达,但表达水平略有差别。LNCaP,PC-3和DU-145细胞中VEGF和KDR蛋白表达及其mRNA的含量显著高于PC-3M和22RV1(P<0．01)。细胞培养上清中VEGF蛋白含量结果与免疫细胞化学染色结果相同。结论：VEGF及其受体KDR在前列腺癌细胞中的表达量不近相同,但二者的表达对研究前列腺癌的发生发展及其机理有重要意义。
- 缪应业刘家云苏明权沈建军郝晓柯
- 关键词：血管内皮生长因子KDR前列腺癌
