郝晓柯 作品数:665 被引量:2,195 H指数:19 供职机构: 中国人民解放军 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 农业科学 更多>>
探讨乳酸脱氢酶37℃参考方法在临床中的初步应用 被引量:1 2013年 目的 建立37℃乳酸脱氢酶(LDH)的参考方法,并对酶校准品定值,探讨血清LDH测定结果的准确性与可比性.方法 依据国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推荐的参考测量程序建立LDH酶催化活性参考方法,用参考方法测定LDH(ERM AD453/IFCC)参考品,验证参考方法的准确度,并对其精密度进行方法学评价,同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLS EP9-A方案分别比较40份人血清用酶校准品校正的非配套常规方法、配套常规方法、理论K值常规方法和参考方法LDH结果,计算常规方法与参考方法的相关系数及相对偏倚.结果 用参考方法测定ERM-AD453LDH参考品结果497.3 U/L,在其给定的502±7 U/L范围内.初步建立的37℃ LDH参考方法总CV〈1%.用酶校准品校正的非配套常规方法、配套常规方法、理论K值常规方法和参考方法比较,相关性均良好,r2分别为0.997,0.995和0.994,与配套常规方法、理论K值常规方法相比较,酶校准品校正的非配套常规方法与参考方法的相对偏倚明显降低,在10%以下.结论 LDH参考方法基本建立,采用参考方法为酶校准品定值,可以提高血清LDH测定结果的准确度和可比性. 周铁成 张莹 童开 岳乔红 郝晓柯关键词:乳酸脱氢酶 自噬相关基因Beclin-1的克隆及原核表达载体的构建 2011年 目的克隆并构建自噬相关基因Beclin-1原核表达载体。方法根据Beclin-1鳊码区DNA序列设计引物,用前列腺癌细胞LNCaP作为模板进行RT—PCR,扩增Beclin-1编码区全基因片段,与pQE-80质粒连接后进行潮序鉴定。结果RT—PCR扩增出Beclin-1目的基因,限制性内切酶证实其已插入表达质粒中,DNA测序证实Beclin-1鳊码区全基因片段与GenBank公布的相应基因核苷酸序列的同源性为完全一致。结论成功克隆并构建了自噬相关基因Beclin-1原核表达载体,为研究Beclin-1蛋白的细胞自噬作用奠定了基础。 任楠楠 刘家云 马越云 杨静 苏明权 郝晓柯关键词:自噬 BECLIN-1 反转录PCR 基因重组 Diascie ProBact全自动微生物分离培养系统临床应用评估 被引量:3 2018年 目的比较Diascie Pro Bact全自动微生物分离培养系统(简称Diascie Pro Bact)与Copan Wasp全自动微生物前处理系统(简称Copan Wasp)及手工法的微生物分离效果,评估Diascie Pro Bact的临床应用价值。方法收集临床痰、中段尿样本各50例,分别采用Diascie Pro Bact和Copan Wasp及手工法进行划线接种和分离培养。痰样本采用四区划线方式,35℃5%CO_2孵育箱培养;中段尿样本采用连续划线方式,35℃普通孵育箱培养。24 h后观察2种样本的细菌生长情况,并对其分离的菌种数量、细菌生长量、有效单个菌落分离数量进行比较。结果 (1)分离菌种数量。痰样本中Diascie Pro Bact分离0(无细菌生长)、1、2及≥3种菌的样本分别为1、16、8和25例,Copan Wasp分别为1、14、10和25例,手工法分别为2、14、9和25例;中段尿样本中Diascie Pro Bact分离0(无细菌生长)、1、2及≥3种菌的样本分别为20、16、8和6例,Copan Wasp分别为18、17、9及6例,手工法分别为19、18、7和6例。3种方法之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)细菌生长量。对于痰样本,Diascie Pro Bact分离细菌≤10×10~3、100×10~3、1 000×10~3及≥10 000×10~3 cfu/mL的样本分别为4、5、8和33例,Copan Wasp分别为5、5、9和31例,手工法分别为6、7、10和27例;对于中段尿样本,Diascie Pro Bact分离细菌0(无细菌生长)、10~3~10~4、10~4~10~5和>10~5 cfu/mL的样本分别为20、8、5和17例,Copan Wasp分别为18、9、6和17例,手工法分别为19、7、6和18例。3种方法之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)有效单个菌落。对于痰样本,Diascie Pro Bact为9.78±5.37,Copan Wasp为10.48±5.59,手工法为8.82±5.31;对于中段尿样本,Diascie Pro Bact为8.78±4.38,Copan Wasp为9.74±4.49,手工法为7.33±5.03。3种方法之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Diascie Pro Bact各性能指标与Copan Wasp和手工法无明显差异,可替代手工法应用于临床,以提高菌落分离� 郑恬 徐修礼 白露 周柯 陈潇 郝晓柯关键词:细菌学技术 接种 数字成像 西安地区17705例甲型H1N1流感病毒核酸检测结果的分析研究 杨柳 苏明权 马越云 张荣 韩若冰 文静 芦露 肖凤静 郝晓柯ICU鲍氏不动杆菌分子流行特点研究 被引量:2 2016年 目的了解医院ICU鲍氏不动杆菌的分子流行特点,分析其基因同源相关性,为有效控制医院感染的发生提供实验室依据。方法收集医院2013年3-8月ICU分离的68株鲍氏不动杆菌,采用多位点序列分型技术,PCR扩增7个管家基因片段,并进行测序分析,结果与PubMLST数据库进行比对分析,使用eBURST软件对ST数据进行亲缘关系分析。结果 68株鲍氏不动杆菌被分为13个ST基因型,其中新发现2个ST基因型,其他11个ST基因型均属于克隆复合体92,具有同源相关性。结论医院ICU的鲍氏不动杆菌具有基因同源相关性,并呈现出水平传播的趋势。 杨玉琪 郝晓柯 马越云 苏明权 徐修礼 刘家云 周珊 唐海斌关键词:重症监护病房 鲍氏不动杆菌 多位点序列分型 Probasin启动子的克隆及其在不同肿瘤细胞系中的表达活性 被引量:4 2007年 目的:构建Probasin(PB)启动子调控的pGL3表达载体,比较两种不同组成形式的Probasin启动子的组织特异性和活性。方法:提取大鼠前列腺组织DNA,通过PCR得到Probasin启动子(-426,+28bp)序列,并通过交叠PCR得到改造的ARR2PB序列,分别插入pGL3-Basic表达载体,同时构建CMV启动的荧光素酶载体P3.1-LUC作为阳性对照,并用pEGFP-N2载体做转染效率对照,用脂质体法把构建好的PB-pGL3载体、ARR2PB-pGL3以及P3.1-LUC分别转染人前列腺癌细胞LN-Cap、PC-3,以及HeLa宫颈癌细胞和张氏肝细胞等4种不同的细胞系,用荧光显微镜检测荧光素酶的表达量。结果:经酶切鉴定及测序后证实所构建的载体正确。观察各个细胞系中转染pEGFP-N2后都有绿色荧光的表达;荧光素酶在前列腺癌细胞系中的表达量高于其他组织来源的细胞系,而且其中激素依赖性的LNCap细胞中的荧光素酶表达量明显高于非激素依赖性细胞PC3;ARR2PB-pGL3载体的荧光素酶表达量明显高于PB-pGL3载体。结论:由Probasin启动子调控的pGL3表达载体具有前列腺组织特异性,两种不同组成形式的Probasin启动子中以ARR2PB的启动活性为佳。 张翔 郝晓柯 刘家云 苏明权关键词:前列腺癌 启动子 基因治疗 外伤后细菌性致死性肉芽肿病原菌的生长特性及抗菌药物的体外抗菌活性分析 目的:了解外伤后细菌性致死性肉芽肿(Fatal bacteria granulome after trauma,FBGT)病原菌的培养分离方法及常用抗菌药的体外抗菌活性,为该病的诊断和治疗提供实验室依据。方法用改良兔脑厌... 徐修礼 刘家云 张鹏亮 程晓东 徐焰 郝晓柯 高天文 齐显龙文献传递 尿胰蛋白酶原-2对诊断急性胰腺炎的临床应用 目的探讨快速试纸法检测尿胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)诊断中的临床意义。方法:对150例急腹症患者(其中重型100例.轻型50例).血清和尿液标本分别测定尿胰蛋白酶原-2和血、尿... 周铁成 杨小云 秦庆 张莹 童开 袁亚娟 郝晓柯关键词:胰蛋白酶原 淀粉酶 胰腺炎 文献传递 外周血反应性嗜酸细胞诊断器官移植术后急性排斥反应的价值 被引量:2 2005年 目的:探讨外周血液中反应性嗜酸细胞在诊断器 官移植急性排斥反应中的临床诊断价值.方法:器官移植受 者63例依据排斥反应发生与否分为急性排斥组(24例)和非 排斥组(39例),健康查体者40例为对照组,各取其抗凝血液 制成血薄片,经瑞氏染色计数各组的反应性嗜酸细胞和嗜酸 性粒细胞的百分率,并将结果进行比较.结果:急性排斥组 24例移植受者全部检出反应性嗜酸细胞[(12.2±2.3)%], 阳性率100%;非排斥组39例移植患者仅2例检出反应性嗜 酸细胞(平均为1.6%),阳性率5.1%,其特异性为94.9%;对 照组40例均未检出反应性嗜酸性细胞.急性排斥组嗜酸性 粒细胞为(4.1±1.4)%,非排斥组为(3.9±1.6)%,对照组 为(4.3±1.9)%,经统计学分析三组间无差别.结论:外周 血中反应性嗜酸细胞可作为器官移植术后急性排斥反应的实 验室诊断指标. 郑善銮 丁振若 皇海 郝晓柯关键词:嗜酸细胞 移植物排斥 5种血清miRNA的检测在前列腺癌诊断中的价值评估 被引量:1 2011年 目的检测miR-141,miR-16,miR-103,miR-574,miR-34b等五种前列腺癌相关的miRNA在前列腺癌患者血清中的含量,评价其在前列腺癌诊断中的价值。方法收集临床血清样本,将其分为前列腺癌、前列腺增生,PSA升高等三组,提取血清中miRNA。应用荧光定量PCR方法检测相应miRNA的含量,用GraphPadPrism软件进行统计学分析。结果miRNA-103和miR-34b在前列腺癌患者、前列腺增生患者和PSA增高人群血清中的含量普遍较正常人增高,其中miR—NA-34b平均增高2.2×10^4倍,在所有PSA升高的样本中均增高。其余3种miRNA的水平相对于正常人未呈现显著差异。结论miR-34b的诊断价值与PSA相当,是一个潜在的前列腺癌诊断性血清标志物。 朱琳 马越云 范渝红 岳乔红 韦晓明 郝晓柯关键词:MIRNA 前列腺癌 前列腺增生 血清