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王小敏

作品数:114 被引量:258H指数:9
供职机构:江苏省农业科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金江苏省自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 62篇期刊文章
  • 44篇专利
  • 7篇会议论文
  • 1篇科技成果

领域

  • 62篇农业科学
  • 10篇生物学
  • 5篇医药卫生

主题

  • 50篇病毒
  • 25篇杆菌
  • 23篇免疫
  • 22篇圆环病毒
  • 20篇肠杆菌
  • 18篇猪圆环病毒
  • 14篇疫苗
  • 14篇基因
  • 13篇引物
  • 12篇P1
  • 11篇出血性大肠杆...
  • 9篇猪圆环病毒2...
  • 9篇细胞
  • 9篇链球菌
  • 7篇毒素
  • 7篇原核表达
  • 7篇志贺毒素
  • 7篇试剂盒
  • 7篇转录
  • 7篇小鼠

机构

  • 107篇江苏省农业科...
  • 19篇南京农业大学
  • 7篇中国农业科学...
  • 3篇中国农业大学
  • 2篇吉林农业大学
  • 1篇安徽医科大学
  • 1篇华中农业大学
  • 1篇遵义医科大学
  • 1篇中国农业科学...

作者

  • 114篇王小敏
  • 105篇何孔旺
  • 99篇温立斌
  • 95篇倪艳秀
  • 90篇李彬
  • 89篇张雪寒
  • 86篇周俊明
  • 80篇茅爱华
  • 77篇俞正玉
  • 75篇郭容利
  • 68篇吕立新
  • 50篇汪伟
  • 29篇叶青
  • 20篇胡屹屹
  • 20篇祝昊丹
  • 20篇周萍
  • 19篇沈江萍
  • 13篇赵攀登
  • 12篇栾晓婷
  • 12篇于洋

传媒

  • 21篇江苏农业学报
  • 14篇华北农学报
  • 7篇Agricu...
  • 5篇中国兽医学报
  • 2篇中国农业科学
  • 2篇江苏农业科学
  • 2篇中国人兽共患...
  • 1篇微生物学报
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇福建农业学报
  • 1篇西南农业学报
  • 1篇北京农学院学...
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇中国科技成果
  • 1篇中国实验动物...
  • 1篇中国畜牧兽医
  • 1篇首届中国兽药...
  • 1篇中国畜牧兽医...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 1篇2020
  • 2篇2019
  • 1篇2018
  • 3篇2017
  • 5篇2016
  • 13篇2015
  • 17篇2014
  • 30篇2013
  • 15篇2012
  • 16篇2011
  • 7篇2010
  • 1篇2009
  • 3篇2008
114 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
Genetic Variation of Porcine Circovirus Type 2 Isolate 201105ZJ
2014年
[Objective] This study aimed to investigate the genetic variation of porcine circovirus type 2 (PCV2) in China. [Method] The strain was isolated from infected samples by cel passage and preliminarily identified by PCR and IFA. Ful-length genome of the isolated strain was obtained by specific amplification for homology and phylogenetic analysis. [Result] A PCV2 strain was successful y isolated and named 201105ZJ, which could proliferate in PK15 cel lines. Specific fragments could be amplified by specific PCR assay. According to results of IFA assay, specif-ic immunofluorescence was observed; the TCID50 was low (102.67); the ful-length genome sequence of the isolated strain was 1 768 bp, sharing 94.1%-96.8% ho-mology with 13 reference strains; to be specific, the isolated strain exhibited the highest homology of 96.8% with AF055392PCV2a; the isolated strain 201105ZJ and reference strain AF055392 belonged to genotype PCV2a, exhibiting a distant genetic relationship with genotype PCV2c. [Conclusion] Characteristics of genetic variation of PCV2 isolate 201105ZJ provided theoretical basis for vaccine development, investi-gation of PCV2 pathogenesis, and prevention and control of porcine circovirus-as-sociated diseases (PCVAD) in East China.
王小敏何孔旺汪伟周忠涛杨光远茅爱华俞正玉倪艳秀
通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型
目的:志贺毒素和紧密素是大肠杆菌致病群最主要的毒力因子之一,本文旨在是建立能够同时检测志贺毒素和紧密素多个基因变型的二重PCR快速检测技术,更好的适应临床和实验室等的检测需求。方法:以志贺毒素2(Shiga toxin2...
张雪寒叶青汪伟倪艳秀温立斌李彬王小敏周俊明何孔旺
关键词:动物疾病大肠杆菌志贺毒素基因检测
文献传递
SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的引物
本发明涉及一种利用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法,属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测...
温立斌何孔旺高晓静王小敏李彬郭容利俞正玉茅爱华倪艳秀张雪寒吕立新周俊明胡屹屹汪伟叶青祝昊丹于洋沈江萍周萍
文献传递
猪链球菌2型江苏分离株菌毛相关基因特点及菌株毒力鉴定被引量:1
2012年
利用PCR技术对猪链球菌2型(SS2)江苏分离株的菌毛相关基因进行扩增,根据菌毛相关基因分布特点对菌株分型,并进行动物试验评估。结果 24株SS2中A型占70.8%,B型占29.2%。其中从病猪分离的13株SS2均为A型;而从健康猪扁桃体中分离的11株SS2 A型占36.3%,B型占63.7%。动物试验结果表明A型菌株的毒力强于B型。以上结论说明猪链球菌2型江苏分离株可以根据菌毛相关基因特点进行分型,并利用分型结果来评估菌株的毒力强弱及潜在危害性。
虞凤何孔旺肖琦倪艳秀周俊明茅爱华祝昊丹汪伟吕立新俞正玉温立斌张雪寒李彬郭容利王小敏范红结
关键词:猪链球菌2型毒力
表达 PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒
本发明涉及一种PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒,属于生物制药领域。人工合成密码子优化的PCV2ORF1和ORF2基因,命名为YHsfORF1-2。将YHsfORF1-2克隆入杆状病毒表达载体pFas...
王小敏何孔旺汪伟周忠涛俞正玉倪艳秀温立斌张雪寒郭容利吕立新李彬周俊明茅爱华叶青周萍沈江萍
文献传递
Preparation and Identification of Specific Monoclonal Antibody against Porcine Circovirus Type 2被引量:2
2014年
BALB/c mice were immunized using synthetic tandem polypeptide of Cap protein epitope of porcine circovirus type 2 (PCV2) as the antigen. By using lym-phocyte hybridoma technique, a hybridoma cellline stably secreting monoclonal an-tibody against PCV2-rCap protein was successful y obtained and named as 670#. The ascites titer of the obtained monoclonal antibody was 1∶100 000. Western blot results showed that the monoclonal antibody could react with prokaryotical y ex-pressed PET32a-ORF2 recombinant protein, eukaryotical y expressed ORF1-ORF2 tandem protein and PCV2 whole virus celllysate. Indirect EILSA demonstrated that the monoclonal antibody could bind with ORF1-ORF2 tandem protein. Indirect im-munofluorescence assay (IFA) indicated that the monoclonal antibody could identify native PCV2 virus. The preparation of this monoclonal antibody provided technical tools for epitope analysis and molecular diagnosis of PCV2 virus.
汪伟王小敏温立斌何孔旺周俊明郭容利王芳倪艳秀张雪寒吕立新俞正玉茅爱华李彬
关键词:EPITOPE
中国猪群存在Torque teno Virus(TTV)感染被引量:9
2010年
为了探讨中国猪群TTV的感染现状以及是否存在新的基因亚型,基于TTV1和TTV2相对保守的5’非翻译区(5’UTR)设计引物,采用PCR法对2008~2009年采集于中国江苏省的138份猪血清进行了检测。结果表明,中国猪群,TTV1的感染率为15.9%,TTV2的为34.8%,共感染率为5.8%。所扩增片断的核苷酸序列分析结果表明,中国TTV1和TTV2流行毒株之间的核苷酸同源性分别为87.3%~93.8%和74.8%~99.1%,与GenBank其他TTV1和TTV2毒株的同源性分别为69.6%~100.0%和74.8%~99.1%。系统进化分析结果表明,中国TTV1和TTV2流行毒株存在新的基因亚型。
温立斌何孔旺杨汉春郭容利李成仁钟书霖茅爱华倪艳秀张雪寒周俊明吕立新俞正玉李彬王小敏
我国苏皖地区PRRSV Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析被引量:1
2011年
为了分析2009年安徽省和江苏省周边地区流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的遗传变异特征,采用RT-PCR方法对该地区分离的22株PRRSV的Nsp2和ORF5基因进行了扩增、克隆和测序,并进行序列分析。结果表明:22株PRRSV均属于美洲型毒株,其中21个毒株的Nsp2存在30个氨基酸的不连续缺失,与高致病性PRRSV有相同的缺失特征;而且此21个毒株的ORF5基因推导的氨基酸序列也发生多处突变,集中出现在毒力相关位点、抗原表位和糖基化位点序列中。只有HZNJ株与疫苗株的同源性较高。进化树分析显示,21个分离株与高致病性PRRSV处在同一进化分支,而HZNJ株与疫苗毒株有较近的亲缘关系,进一步说明高致病性PRRSV已成为该地区的优势流行毒株。
李彬何孔旺温立斌俞正玉茅爱华王小敏张雪寒郭容利倪艳秀周俊明吕立新
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因ORF5基因
猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白部分片段的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立被引量:5
2012年
为了建立猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)抗体间接ELISA检测方法,该研究首先克隆了MRP编码基因的部分片段,构建了重组表达质粒pET28a-mrp,并将该质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,获得了58 000的重组蛋白,经Ni柱纯化后,免疫印迹显示MRP重组蛋白能够被猪链球菌2型抗体特异性识别。以纯化的MRP重组蛋白作为包被抗原,建立了猪链球菌2型MRP抗体检测间接ELISA方法。该ELISA方法的包被抗原浓度为10μg/ml,待检血清1∶50稀释,检测临床48份未免疫猪链球菌2型疫苗健康猪的血清。当效价(S/P)≥0.22时,判定待检血清样品为阳性;当S/P<0.22时,判定待检血清样品为阴性。运用建立的方法能特异性识别猪链球菌2型抗体,人工感染猪的MRP抗体于攻毒后14~28 d出现峰值,同时提示临床健康猪群的免疫功能存在个体差异。
周俊明何孔旺倪艳秀俞正玉茅爱华吕立新温立斌张雪寒郭容利李彬王小敏
关键词:猪链球菌2型MRP原核表达间接ELISA
猪圆环病毒2型Rep蛋白基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量:4
2013年
采用PCR方法扩增猪圆环病毒2型(PCV-2)Rep蛋白基因,克隆入原核表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经SDS-PAGE检测目的蛋白得到成功表达,采用His标签单抗和PCV-2阳性猪血清进行Western blot鉴定表明重组蛋白具有良好的抗原性。利用纯化的重组蛋白rRep作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了间接ELISA抗体检测方法。抗原最适包被质量浓度为1mg/L(0.1μg/孔),待检血清最适稀释度为1∶100,作用时间为1h,酶标抗体最适稀释度为1∶3 000。用该方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)阳性血清,结果均为阴性;批内和批间重复试验变异系数分别为<5%和<10%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用rRep-ELISA对113份血清样品进行检测,与rCap-ELISA结果比较,rRep-ELISA检测阳性率为50.44%(57/113),略低于后者的54.87%(62/113),2种方法检测符合率为88.5%(100/113),具有较好的一致性。这为PCV-2感染的流行病学调查和新型ELISA诊断试剂盒的研制奠定基础。
李文良毛立张纹纹王小敏茅爱华甘源江杰元
关键词:PCV-2REP蛋白原核表达
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