王嫣
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 转人组织蛋白酶K基因小鼠的Southern杂交鉴定被引量:3
- 2005年
- 目的 用地高辛标记探针的方法进行Southern杂交 ,以检测转人组织蛋白酶K基因小鼠外源DNA的整合情况 ,筛选携带目的基因的阳性小鼠。方法 用地高辛标记探针的方法 ,对转人组织蛋白酶K基因小鼠 (F0代 )及首建阳性鼠与野生型ICR小鼠交配产生的F1代进行Southern杂交 ,对F0代和F1代进行筛选。结果 经显微注射法 ,共获得 2 5只转基因小鼠 ,通过Southern杂交鉴定 ,1只为阳性 ,阳性率为 4 % ;对PCR阳性的F1代小鼠 35只进行Southern杂交 ,结果全部为阳性。结论 外源基因 (人CathepsinK基因 )已整合到小鼠的染色体上 ,并且能够遗传。
- 祝梅香邹星沈洁王嫣徐凤郭金微张晶李亦平
- 关键词:小鼠SOUTHERN杂交组织蛋白酶地高辛标记探针外源DNA
- 转人组织蛋白酶K基因鼠系的PCR检测
- 2004年
- 目的用PCR技术检测转人组织蛋白酶K基因鼠系,筛选携带目的基因的阳性小鼠。方法用PCR技术,对显微注射后出生的转人组织蛋白酶K基因小鼠、首建鼠的F1、F2、F3及F2代与野生型ICR小鼠的回交后代进行检测。结果共检测显微注射后出生的小鼠25只,阳性为1只,阳性率为4%;检测F1、F2、F3代小鼠分别为60、77和69只,阳性仔鼠数为35、56和63只,阳性率分别为550%、727%和913%;对回交后代进行检测,未见纯合的F2代小鼠。结论外源基因(人组织蛋白酶K基因)已经整合到小鼠的染色体上,并且按孟德尔遗传定律中的分离定律进行遗传。
- 祝梅香邹星徐凤沈洁王嫣郭金微张晶李亦平
- 关键词:组织蛋白酶基因PCR技术回交后代PCR检测
- FAK通过和EGFR的相互作用调节MAPK和Akt之间的相对平衡
- 2005年
- 目的研究上皮生长因子受体和FAK的相互作用以及对下游信号的影响。方法建立聚集粘连激酶(FAK)缺失突变和绿色荧光蛋白(GFP)融合基因del1-693FAK-GFP、del1-100FAK-GFP和FAK-GFP稳定表达细胞系。结果同野生型FAK-GFP相比,N-端1-100氨基酸残基的缺失突变体,缺失1-693氨基酸残基的突变体结合在黏附点的能力被完全抑制。应用等电聚焦和SDS-PAGE双向电泳证明,EGF和纤维连接蛋白诱导FAK磷酸化的位点不同,进一步证实del1-693FAK-GFP、del1-100FAK-GFP,抑制MAPK的磷酸化,增强Akt的磷酸化;而FAK-GFP增强MAPK磷酸化,抑制Akt磷酸化。结论FAK通过和EGFR的相互作用调节MAPK和Akt之间的相对平衡。
- 李永林蔡永刘先菊R.M.Lafranie沈洁王嫣张璐董伟张扬清祝梅香张连峰
- 关键词:受体表皮生长因子MAPKAKT