汪蓓蕾
- 作品数：13 被引量：17H指数：3
- 供职机构：天津医科大学代谢病医院内分泌研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代海马突触素表达的影响
- 2012年
- 目的：探讨不同剂量甲状腺素对甲状腺功能减低孕鼠子代海马突触素表达的影响。方法：选取断乳1个月的Wistar大鼠160只，雌雄各半。将雌性大鼠随机分为正常组，甲低对照组，甲低孕鼠妊娠1-17d（妊早期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠18-20d（妊晚期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组共8组，每组10只。各组均饲以低碘饲料，对照组饮用碘酸钾溶液，总碘摄入量相当于大鼠生理碘需要量，其余7组饮用去离子水。3个月后与正常雄性大鼠交配。高、中、低剂量组每100g体质量每天分别补充甲状腺素3．5、2．0、0．5μg。分别于新生当天、生后7、14、21及28d，取8组子代大鼠的右侧大脑半球，应用免疫组织化学SABC法及图像分析技术检测海马突触素的表达。结果：正常组的突触素表达水平均高于同时期甲低对照组（P〈0．01）。在新生当天，妊晚期甲低中剂量组与甲低对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），妊早、晚期甲低低剂量组突触素表达水平均低于甲低对照组（P〈0．01）；妊早期甲低中、高剂量组，妊晚期甲低高剂量组突触素表达水平均高于甲低对照组（P〈0．01）。生后7、14、21及28d，妊早、晚期甲低低剂量组与甲低对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），其他各组的突触素表达水平均高于甲低对照组（P〈0．01）。结论：孕鼠甲低导致子代大鼠海马突触素表达下降，甲低孕鼠子代大鼠海马突触素的表达受补充甲状腺素剂量及孕期的影响。
- 孙亚婷汪蓓蕾杨丽娜张瑞郭刚
- 关键词：甲状腺素海马突触蛋白类
- 化学药物诱导的大鼠急性肾损伤模型中肾损伤分子-1表达的研究被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨由顺铂、庆大霉素、环孢素诱导的急性肾损伤(AKI)对大鼠肾组织内肾损伤分子-1(Kim-l)表达水平的影响。方法:将36只SD雄性大鼠随机分6组,并建立庆大霉素、顺铂、环孢素诱导大鼠AKI模型组及各对照组,每组6只。运用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肾Kim-1基因表达水平,Westernblot法检测肾脏Kim-1蛋白表达水平,分析肾Kim-1表达水平与AKI的相关性。结果:病理学检查发现顺铂、庆大霉素和环孢素对大鼠肾脏造成不同程度的肾小管损伤,所建AKI模型成功。各模型组与其对照组比较,肾Kim-lmRNA水平均升高(P<0.05或P<0.01);肾Kim-l蛋白在各阴性对照组内呈阴性结果,而在顺铂、庆大和环孢素AKI模型组内均呈阳性表达。结论:化学药物诱导AKI发生时,肾Kim-1基因转录和蛋白表达水平与肾损伤直接相关,为以尿Kim-1作为预测早期肾损伤的生物标志物提供可靠依据。
- 汪蓓蕾张瑞刘妍张金晓郭刚
- 关键词：膜糖蛋白类肾疾病庆大霉素类疾病模型聚合酶链反应
- 甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx6．2表达的影响
- 2013年
- 目的探讨甲低大鼠妊娠不同时间补充不同剂量甲状腺素(L-T4)对子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx6.2 mRNA表达的影响。方法120只雌性Wistar大鼠分为对照组,甲低组,甲低孕鼠妊娠早期(1～17d)补充L-T4高、中、低剂量组,甲低孕鼠妊娠晚期(18～20d)补充L-T4高、中、低剂量组,每组15只,与正常雄性大鼠交配后分别取孕17d、新生期、20d龄仔鼠脑组织,采用实时荧光定量PCR法检测脑Nkx6.2 mRNA表达。结果甲低组与对照组对应日龄仔鼠脑Nkx6.2 mRNA表达差异有统计学意义(均P<0.01);除甲低孕早期中、高剂量组与对照组对应日龄仔鼠的差异及甲低孕晚期高剂量组新生期仔鼠与同日龄对照组的差异无统计学意义外(均P>0.05),其他补充L-T4组与对照组同日龄仔鼠的差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论甲低孕鼠子代大鼠脑组织同源盒基因Nkx6.2mRNA的表达受补充甲状腺素剂量及时间影响。
- 张欣汪蓓蕾张瑞郭刚
- 关键词：甲状腺功能试验甲状腺素
- 甲状腺功能减低孕鼠补充甲状腺素对子代脑组织同源盒基因Nkx2．1mRNA表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的通过对妊娠期甲状腺功能减低（甲低）大鼠补充左旋甲状腺素（L-thyroxine，L-T4），探讨甲状腺素对子代鼠脑组织同源盒基因Nkx2．1 mRNA表达影响，探讨该基因的表达与甲状腺素水平之间的关系。方法Wistar雌性大鼠120只，按体重分层随机分为对照组、甲低非治疗组，甲低孕鼠妊娠早期（妊娠第1—17天）补充L—T4高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期（妊娠第18天至分娩后第20天）补充L．T4高、中、低剂量组，共8组，每组15只；补充L—T4高、中、低剂量分别为：3．5、2．0,0．5μg/100g体重。各组均给予低碘饮食，对照组饮用碘浓度为200μg／L碘酸钾溶液，其余7组饮用去离子水。3个月后各组均与正常雄性大鼠交配，确定受孕后各甲低给药组于不同时期给予补充L-T4。各组分别取孕第17天胎鼠、新生及出生后第20天龄仔鼠前脑组织，实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测Nkx2．1mRNA水平。结果甲低孕鼠妊娠早期补充L-T4高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期补充L—T4高、中、低剂量组，甲低非治疗组、对照组大鼠血清TT3，分别为（0．85±0．17）、（0．81±0．18）、（0．86±0．21）、（0．85±0．20）、（0．89±0．18）、（0．85±0．20）、（0．86±0．20）、（1．08±0．07）nmol／L（F：4．08，P〈0．01）；TT4分别为（0．43±0．16）、（0．39±0．11）、（0．39±0．13）、（0．43±0．17）、（0．51±0．19）、（0．43±0．16）、（0．41±0．15）、（39．43±14．16）nmol／L（F=31．99，P〈0．01）；FT3分别为（3．29±0．61）、（3．29±0．61）、（3．24±0．61）、（3．28±0．63）、（3．31±0．59）、（3．28±0．50）、（3．24±0．49）、（4．93±0．46）pmol／L（F：5．79，P〈0．01）；FT4分另0为（3．38±0．80）、（3．31±0．67）、（3．29±0．73）、（3．27±0．71）、（3．48±0．81）、（3．56±0�
- 李敬华张瑞汪蓓蕾娜仁李媛赵秀娟梁东春郭刚
- 关键词：甲状腺功能减退症基因同源盒甲状腺素
- 双启动子shRNA真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。方法:通过PCR分别扩增带有BamHⅠ、EcoRⅠ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有BglⅡ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamHⅠ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO。再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功。结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段。
- 娜仁郭刚张瑞赵郁汪蓓蕾梁东春杨宇虹
- 关键词：聚合酶链反应质粒
- 甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的通过对妊娠期甲状腺功能减低（简称甲低）大鼠补充甲状腺素，探讨妊娠不同时间补充不同剂量甲状腺素对子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响。方法1月龄Wistar大鼠240只，雌雄各半，体质量100—120g。按体质量将雌性大鼠随机分为8组：对照组，甲低组，甲低孕鼠妊娠早期（1～17d）补充甲状腺素（妊早甲低）高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期（18～20d）补充甲状腺素（妊晚甲低）高、中、低剂量组，每组15只。高、中、低剂量组每天补充的甲状腺素分别为3．5、2．0、0．5μg／100g体质量。8组大鼠均饲以重度缺碘地区粮食配制的饲料，对照组饮用含碘200μg／L的碘酸钾溶液，7个甲低组饮用去离子水。雄性大鼠用正常食料饲养，3个月后按1：1交配。8组大鼠分别取孕17d、新生、生后20d子代大鼠脑组织，采用实时荧光定量PCR法检测脑组织中Nkx6．1 mRNA表达。结果①成功建立了甲低动物模型，8组大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4组间比较差异有统计学意义（F值分别为4．08、31．99、5．79、26．34，P均〈0．01）。②在孕17d、新生、生后20d，Nkx6．1 mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为758．720、1121．589、144．716，P均〈0．01）；组内不同时间比较差异有统计学意义（F值分别为2898．863、325．605、716．285、56．329、236．727、196．678、7115．752、9152．306，P均〈0．01）。③时间因素和剂量因素对Nkx6．1 mRNA表达有影响（F值分别为1176．655、246．530，P均〈0．01）；时间与剂量因素间存在交互作用（F=1249．934，P〈0．01）。④在孕17d、新生、生后20d，甲低组Nkx6．1 mRNA表达与对照组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑤在新生、生后20d，6个甲低补充甲状腺素组Nkx6．1 mRNA表达与甲低组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑥在孕17d、
- 娜仁张瑞汪蓓蕾李敬华李媛梁东春郭刚
- 关键词：甲状腺功能减退症同源盒基因甲状腺素实时荧光定量PCR
- 甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx2．2表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的：探讨妊娠不同时期补充不同剂量甲状腺素对甲状腺功能减低子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx2.2表达的影响。方法：选取1月龄Wistar大鼠240只,雌雄各半。将雌性大鼠随机分为对照组,甲状腺功能减低（甲低）组,甲低孕鼠妊娠117d（妊早期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组,甲低孕鼠妊娠1820d（妊晚期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组共8组。各组均饲以低碘饲料,高、中、低剂量组每100g体质量每天分别补充甲状腺素3.5、2.0、0.5μg。对照组饮用碘酸钾溶液,总碘摄入量相当于大鼠生理碘需要量,其余7组饮用去离子水。3个月后与正常雄性大鼠交配。分别于孕17d、新生当天及生后20d,取8组子代大鼠的间脑组织,采用实时荧光定量PCR法检测脑组织中Nkx2.2mRNA的表达量。结果：在孕17d,甲低组的Nkx2.2mRNA表达水平低于对照组,其他6组均高于对照组;在新生当天和生后20d,除孕晚期甲低补充甲状腺素中剂量组外,其他各组的Nkx2.2mRNA表达水平均低于对照组;在生后20d孕早期甲低补充甲状腺素低、中、高剂量组的Nkx2.2mRNA表达水平与甲低组比较差别无统计学意义（P〉0.05）。结论：甲低孕鼠子代大鼠脑组织同源盒基因Nkx2.2的表达受补充甲状腺素剂量及孕期的影响。
- 赵金超张瑞汪蓓蕾郭刚
- 关键词：甲状腺素WISTAR
- 地拉罗斯联合顺铂对非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨铁鳌合剂地拉罗斯及其联合顺铂对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,为寻找肺癌有效的治疗途径提供依据。方法常规传代细胞培养方法培养肺腺癌细胞A549,以不同浓度的地拉罗斯、地拉罗斯联合顺铂干预细胞生长一定时间。在倒置显微镜下观察A549的生长抑制特征;MTT法检测细胞的增殖抑制状况;DAPI、AO/EB染色观察细胞凋亡的形态学变化;Annxin V-FITC/PI双染流式细胞术定量测定细胞凋亡状况。结果 A549细胞经不同浓度的药物作用一定时间以后,在倒置显微镜下可见随药物浓度和时间的增加,细胞数明显减少,细胞相互分散,贴壁细胞出现皱缩变小折光性差;MTT检测显示,细胞增殖抑制率随药物浓度的增加和作用时间的延长呈现上升趋势,即剂量效应关系及时间效应关系;DAPI、AO/EB染色法观察到细胞凋亡的形态学变化,即细胞发生染色质凝集,核固缩等典型的凋亡形态特征;流式细胞术检测显示,细胞的凋亡率随药物浓度的增加而升高,联合用药促细胞凋亡显著。结论铁鳌合剂地拉罗斯具有抗肺癌细胞A549增殖的能力,促进肿瘤细胞凋亡,其与顺铂联合可增强癌细胞耐受性,降低顺铂的用量及其不良反应。
- 袁婷梁吉祥张斌汪蓓蕾张欣郭刚张瑞
- 关键词：铁螯合剂顺铂细胞增殖
- 重组蛋白TAT-NLS-Nkx6.2在大肠杆菌的表达纯化及活性测定
- 2013年
- 目的:构建重组基因TAT-NLS-Nkx6.2的原核表达载体,获得重组TN-Nkx6.2蛋白,并验证其生物学活性。方法:该实验先将人类免疫缺陷病毒HIV-1的反式激活因子TAT、核定位信号NLS、Nkx6.2基因片段连接合成目的基因TAT-NLS-Nkx6.2。之后构建重组质粒pET-28a-TNNkx6.2并将其转化入E.coli DH5α中克隆,再转化至E.coli BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,经组氨酸Ni2+亲和层析纯化融合蛋白,并用SDS-PAGE及Western blot鉴定融合蛋白,荧光免疫组化染色观察TN-Nkx6.2在小鼠脑组织分布。结果:成功表达并获得纯度90%以上的TN-Nkx6.2蛋白,经Western Blot鉴定,TN-Nkx6.2有良好的免疫原性和免疫反应性荧光免疫组化染色证明TNNkx6.2与小鼠大脑细胞结合并内化进入胞浆及胞核。结论:获得的融合蛋白TN-Nkx6.2具有生物学活性,并能穿过血脑屏障与小鼠大脑细胞结合,并内化进入胞核和胞浆,为深入探讨同源盒基因Nkx6.2在甲状腺减低模型的分子机制研究奠定了物质基础。
- 孙少飞汪蓓蕾袁婷张斌张欣郭刚张瑞
- 关键词：重组蛋白蛋白纯化活性检测
- 抗变性胰岛素单克隆抗体的制备及初步应用
- <正>目的:制备小鼠抗变性胰岛素单克隆抗体(McAb),对其特性进行初步鉴定并建立ELISA检测方法。方法:1、变性后人胰岛素免疫BALB/c小鼠,分离其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,利用选择性培养基HAT及HT...
- 汪蓓蕾赵金超郭刚
- 关键词：糖尿病单克隆抗体活性测定
- 文献传递
