李艳娜 作品数:30 被引量:40 H指数:4 供职机构: 同济大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
B族链球菌基因cpsG影响人类宫颈癌细胞蛋白组学分析 2023年 目的探讨B族链球菌基因cpsG影响人类宫颈癌细胞蛋白组学。方法通过人工合成的方法将cpsG的读码框序列(ORF)融合HA标签连接到质粒pLVX-mCMV-ZsGreen的限制性内切酶EcoRI和BamHI之间构建稳定表达cpsG人类宫颈癌Hela细胞系。提取rLV组和rLV-cpsG组的总蛋白质,并通过12%SDS-PAGE电泳分析后,进行非标记(Label-free)蛋白质酶解肽段质谱分析。结果经蛋白质酶解肽段质谱分析显示,rLV组鉴定出3552个蛋白,rLV-cpsG组鉴定出3702个蛋白;与rLV组相比,rLV-cpsG组中上调的蛋白为229个,下调的蛋白为225个。GO分析结果显示,细胞组分主要包括膜完整性、细胞核、核糖体;分子功能主要包括蛋白结合、ATP结合、GTP结合、DNA结合、RNA结合;生物过程主要包括翻译、代谢、蛋白磷酸化、跨膜。KEGG通路富集分析显示,Cellular Processes通路主要包括细胞生长与凋亡(179个)、细胞活力(72个)、真核细胞群(140个)、转运和代谢(270个);Environmental Information Processing通路有膜转运(11个)、信号转导(324个);Genetic Information Processing通路有复制与修复(51个)、转录(133个)、翻译(328个);Human Diseases通路有癌症(258个);Metabolism通路有氨基酸代谢(110个)、糖代谢(144个);Organismal Systems通路包括内分泌系统(174个)。蛋白质-蛋白质相互作用结果显示,下调的蛋白互作网络主要包括prot1(MGST1)∶prot2(GCLC)、prot1(MGST1)∶prot2(MYH10)、prot1(MGST1)∶prot2(UGDH)、prot1(MGST1)∶prot2(GCLM)、prot1(PKP2)∶prot2(CDH2)、prot1(PKP2)∶prot2(A8K2T7);上调的蛋白互作网络主要包括prot1(SLC7A2)∶prot2(TXN)、prot1(SLC7A2)∶prot2(KYNU)、prot1(SLC7A2)∶prot2(MCAT)、prot1(SLC7A2)∶prot2(JUNB)、prot1(SLC7A2)∶prot2(BOLA2)、prot1(SLC7A2)∶prot2(FN1)。结论B族链球菌基因cpsG影响了人类宫颈癌细胞的蛋白组学,该研究为明确cpsG在人类宫颈癌细胞中发生作用机制及其临床应用提供了基础资料。 李艳娜 王静一 陈琦蕴 王莹 尼鲁非尔·阿布力克木 张嫄雯可 詹为易 谭丹 张陈关键词:蛋白质组学 质谱分析 腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建和在神经干细胞中的表达 被引量:1 2008年 目的研究腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建及其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法通过RT-PCR从大鼠海马中获得BDNF基因,通过基因克隆、HEK293包装,获得含增强绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒表达载体pAd-BDNF-EGFP,将其感染原代培养的神经干细胞,观察EGFP及BDNF2种基因的表达,镜下测定转染率,并检测RT-PCR产物,证实BDNF的存在。转染后的神经干细胞经G418筛选,抗性细胞传代扩增后获得成功转染BDNF基因的NSCs克隆。结果荧光显微镜下可见感染后的NSCs表达EGFP而发出绿色荧光;通过RT-PCR证明感染后的NSCs具有表达BDNF的能力;用ELISA鉴定细胞上清中分泌的BDNF,72h的含量达到最高值,为12.78ng/mL;证明通过构建病毒的感染可以使神经干细胞获得分泌BDNF的能力,且EGFP基因可作为神经干细胞移植研究中良好的示踪剂。结论腺病毒病毒介导EGFP基因及BDNF基因在大鼠胚胎神经干细胞中成功表达,为应用以神经干细胞直接作为基因靶细胞,介导基因治疗中枢神经系统疾病奠定了基础。 李少华 文会龙 顾昕 汪洋 吕立夏 李艳娜 那曼丽 崔银江关键词:神经干细胞 脑源性神经营养因子 腺病毒载体 医学病毒学实验课PBL教学改革 被引量:6 2014年 目的:探讨以问题为基础的学习(problem-based learning, PBL)在医学病毒学实验教学中的应用。方法将2011级临床医学专业学生随机分为2组,实验组45人(含五年制20人、七年制25人)采用PBL教学,对照组63人(含五年制38人、七年制25人)采用传统教学。对比两组学生的实验成绩、医学病毒学理论成绩和期末理论成绩,并对实验组学生行问卷调查;考试成绩采用t检验,用SPSS统计软件包进行分析。结果实验组七年制学生的医学病毒学理论成绩明显高于对照组七年制学生(P<0.05),其他成绩2组差异无统计学意义。问卷显示,实验组学生对PBL可激发兴趣、锻炼病案分析与实验设计能力、促进知识理解和掌握方面满意度高;七年制学生对PBL可提高循证和归纳总结能力、五年制学生对PBL可提高自主学习能力和演绎素材能力满意度略低。结论联系公共卫生事件的医学病毒学实验课PBL教学能够激发学生学习兴趣,促进学生掌握知识,培养其良好的公共卫生意识。但需根据五年制和七年制学生学习能力对PBL教学流程作适当调整。 施文钧 沈利 王飞 李艳娜 闫小丽关键词:医学病毒学 实验教学 公共卫生 酵母双杂交筛选TEB4相互作用蛋白 2010年 目的酵母双杂交筛选与TEB4(MARCH-Ⅵ)有相互作用的蛋白,构建该蛋白基因序列的重组载体。方法以人TEB4为诱饵质粒,利用酵母双杂交技术筛选人淋巴瘤cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得150多个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,发现了一个与TEB4相互作用的蛋白:ATP synthase F0 subunit6(ATP-C6)。PCR法扩增ATP-C6,亚克隆到质粒pCMV-HA中,获得重组质粒pCMV-HA-ATP-C6,酶切和测序进行鉴定。结果从人淋巴瘤cDNA文库筛选到一个与TEB4有相互作用的蛋白ATP-C6,并成功构建重组质粒pCMV-HA-ATP-C6。结论应用酵母双杂交系统从人淋巴瘤cDNA文库中筛选并初步验证了与TEB4有相互作用的蛋白,为TEB4蛋白功能的进一步研究奠定了基础。 姜璎慈 李艳娜 李学礼 吕立夏 李静琪 李姣 徐磊关键词:酵母双杂交 帕金森病 病原生物学与感染性疾病实验整合与设计 被引量:6 2019年 为完善本科课程体系建设,配合本科人才培养方案充分有效的实施,病原学实验整合后根据课程特点和学生需求在实验项目设计和实验教学方法两方面开展探索,旨在改变验证性实验过多、学生学习主动性欠缺的状况,着力培养新时期下医学生的创新实践能力。 李艳娜 沈利 王飞 闫小丽关键词:整合课程 实验教学改革 课程思政与病原生物实验教学有机融合的探索 2023年 近年来,高校在贯彻落实习近平总书记重要讲话精神、构建“三全育人”格局等方面取得了一些成果,课程思政建设氛围也日渐深入人心。在临床医学专业大三上学期开展寄生虫感染性疾病的实验室诊断的实验项目,在实验项目设计中引入鼠疟动物模型,围绕医学生的“职业理想与职业道德”、“国家与民族”、“担当与奋斗”等主题设计实验内容。落实立德树人根本任务,加强本科生课程思政建设。 李艳娜 钱洁关键词:疟疾 鼠疟 大麻素受体-1对内毒素诱导的大鼠小肠肌电活动的影响 2009年 目的研究不同浓度脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对大鼠小肠肌电活动的影响及大麻素1受体(CB1受体)激动剂HU210和拮抗剂AM251对这些影响的干预作用,以探讨LPS影响肠道运动的可能的机制。方法将48只SD雄性大鼠分为3大组8小组(每小组6只):LPS处理组(包括LPS低浓度组、LPS高浓度组),CB1受体激动剂干预组(包括HU210组、LPS低浓度+HU210组、LPS高浓度+HU210组),CB1受体拮抗剂干预组(包括AM251组、LPS低浓度+AM251组、LPS高浓度+AM251组)。分别经腹腔注射各种相应药物,用Power Lab八道生理记录仪记录大鼠小肠平滑肌峰电活动的频率及振幅等,观察腹腔注射LPS、大麻素受体激动剂及拮抗剂后这些指标的变化。结果腹腔注射不同浓度LPS后,大鼠小肠平滑肌峰电频率和振幅均有明显降低(P〈0.05);注射HU210后,大鼠小肠平滑肌峰电频率和幅度也均明显降低(P〈0.05);而注射AM251后,大鼠小肠平滑肌峰电频率及幅度明显增加(P〈0.05);腹腔注射不同浓度LPS和HU210,分别与LPS单独注射的比较,小肠平滑肌峰电频率更为降低,注射后30-60 min之间降低最为显著(P〈0.05);腹腔注射不同浓度LPS和AM251,分别与LPS单独注射比较,肠平滑肌峰电频率升高,AM251逆转LPS的效应主要在注射后的30 min内,尤其对放电频率的逆转作用明显(P〈0.05)。结论腹腔注射LPS有降低大鼠小肠平滑肌电峰电频率和振幅的作用,且有浓度依赖性;CB1受体激动剂和拮抗剂对LPS诱导的大鼠小肠平滑肌峰电活动变化均有不同程度的影响,揭示CB1受体存在于大鼠体内,并参与内毒素血症时肠道运动紊乱的调节。 李艳娜 倪建波 巩倩 李学晋 李琨 李永渝关键词:脂多糖 振幅 B族链球菌基因cpsG抑制人类宫颈癌细胞增殖的研究 被引量:1 2022年 目的 探讨B族链球菌基因cpsG影响人类宫颈癌细胞增殖的作用及其机制。方法 通过人工合成方法将cpsG的读码框序列(ORF)融合HA标签连接到质粒pLVX-mCMV-ZsGreen的限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ之间构建稳定表达cpsG人类宫颈癌细胞系。通过CCK8和集落形成实验进行生长曲线和集落形成能力分析,检测cpsG对人类宫颈癌细胞体外生长能力的影响。通过高通量RNA测序进行基因表达水平的定量分析,分析cpsG对人类宫颈癌细胞转录组学的影响,包括基因本体论(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析和融合基因分析。结果 成功构建稳定表达cpsG人类宫颈癌细胞系之后,CCK8和集落形成实验显示cpsG基因抑制人类宫颈癌细胞体外生长。高通量RNA测序技术发现cpsG能够显著调控人类宫颈癌细胞部分基因的转录能力;GO分析和KEGG分析发现cpsG调节了人类宫颈癌细胞中部分基因的功能和信号通路。主要通过上调DSC3、IGFBP4、PLCL1和下调KRT6A、COL8A1、KRT17等基因的转录,从而抑制G蛋白偶联受体活性、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、NF-κB信号通路和激活脂肪酸降解、p53信号通路。结论 cpsG可能影响了人类宫颈癌细胞中部分基因的融合,主要影响了B3GAT3-ATP8、LEPROT-LEPR、MRPS6-SON融合基因的形成。 李艳娜 支恒 王莘童 苏顺海 徐磊关键词:B族链球菌 细胞增殖 转录组学 人体寄生虫学标本数字化助力实验教学 被引量:4 2020年 人体寄生虫学标本在实验教学中一直发挥着重要的作用。为了使其得到更好的利用,同济大学医学院病原生物学教研室将人体寄生虫大体标本、玻片标本数字化,助力实验教学,逐渐完成线上线下相结合的实验教学体系构建,既促进了学科建设,又提高了教学质量。 王飞 李军 沈利 闫小丽 李艳娜关键词:人体寄生虫学 实验教学 紧密联系临床的病理生理学教学模式探讨 被引量:2 2008年 病理生理学作为一门重要的桥梁学科,在基础医学与临床医学之间起着承上启下的作用,如何着眼于临床应用的需要搞好病理生理学教学,以提高医学生理解疾病以及他们分析问题和解决问题的能力,介绍以病例引出问题,病理生理学教师与临床医生同堂授课和解疑等方式,探讨紧密联系临床的病理生理教学模式。 李永渝 姚红 李琨 李艳娜 朱小平 王志荣关键词:病理生理学 教学方法 教学模式