朱僧
- 作品数：12 被引量：36H指数：2
- 供职机构：吉林大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划公益性行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 2型猪链球菌烯醇化酶的原核表达及其对体外血脑屏障模型通透性影响的检测被引量：2
- 2014年
- 通过原核表达的方式获得能在多种病原菌表面表达的烯醇化酶(Enolase,Eno),探索Eno在脑膜炎致病过程中的作用。根据GenBank上公布的基因序列设计Eno特异性引物,通过PCR技术扩增2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的Eno基因序列,克隆到pMD18-T载体,进一步亚克隆到原核表达载体pET28a(+),构建重组表达质粒pET28a-Eno,转化入大肠杆菌BL21Codon Plus(DE3)感受态中诱导表达,经镍离子螯合柱纯化后,检测其对体外血脑屏障模型通透性的影响。结果显示,经1mmol/L IPTG诱导5h为最佳诱导条件,目的蛋白约54 000,与预期蛋白大小相符合;纯化的蛋白Western blotting分析表明,其具有较好的免疫原性;Eno可致体外血脑屏障模型通透性增加。结果表明,Eno作为SS2潜在的毒力因子在SS2引起脑膜炎的致病过程中起到重要的作用。
- 李娜雷连成朱僧孙莹莹潘风光孙长江韩文瑜
- 关键词：猪链球菌2型烯醇化酶原核表达通透性
- 15株临床分离耐药大肠杆菌耐氟喹诺酮类抗生素基因的检测与序列分析被引量：12
- 2011年
- 15株动物源性耐氟喹诺酮类药物大肠杆菌进行PCR检测、测序、WDNASIS软件分析gyrA基因中的氟喹诺酮耐药决定区(QRDR)、AcrA以及编码与质粒介导的氟喹诺酮类药物耐药机制相关的qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr基因。结果表明,15株耐药菌中,QRDR基因在其编码第72、75、83位或第87位氨基酸均发生突变;AcrA基因未检测到氨基酸的突变;qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr耐药基因阳性菌各检测到1株,序列分析表明不存在氨基酸突变。QRDR基因编码的氨基酸4个位点发生突变,其中Ser83→Leu和Asp87→Asn 2个基因的突变均与文献报道的突变相同,双突变的7个菌株均表现为高度耐氟喹诺酮类抗生素,表明gyrA基因为大肠杆菌耐氟喹诺酮类抗生素的一个重要机制。高度耐氟喹诺酮类抗生素的菌株中有2株没有检测到氨基酸突变的存在,但是aac-(6′)-Ib-cr基因和qnrS检测为阳性,表明质粒介导的喹诺酮类耐药也可单独导致菌株的耐药。存有一个菌株gyrA基因编码的氨基酸发生突变Ser83→Leu,AcrA基因和qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr基因检测均为阴性,但是菌株仍然表现为高度耐药,说明还有未知的耐药机制存在。
- 朱僧邢艳萍胡腾雷连成
- 关键词：氟喹诺酮类药物大肠杆菌突变耐药性
- 奶牛乳腺上皮细胞的克隆与特性分析被引量：1
- 2012年
- 用组织块接种法分离培养奶牛乳腺上皮细胞,进行形态学观察、生长曲线的绘制和核型分析等生物学性状的检测,并进行酪蛋白基因的RT-PCR鉴定。结果显示,体外培养的奶牛乳腺上皮细胞生长旺盛,具有典型的上皮细胞形态特征;染色体数目为60;能够正常表达奶牛乳腺上皮细胞的2种特异性酪蛋白基因,即as1-酪蛋白基因和β-酪蛋白基因。表明成功获得了奶牛乳腺上皮细胞克隆。
- 邢艳苹杨峰王瑜何伯萍李林溪朱僧马丽敏雷连成
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞组织块法核型分析酪蛋白
- 肝癌细胞靶向肽的筛选与鉴定被引量：1
- 2012年
- 利用噬菌体环七肽库筛选与肝癌细胞特异性结合的多肽,并对其亲和力进行生物学鉴定。以HL-7702为消减细胞,HepG2为筛选靶细胞,对噬菌体随机环七肽库进行4轮全细胞消减筛选,并随机挑取60个阳性噬菌体克隆,以ELISA法鉴定其与HepG2细胞的结合活性,并取阳性克隆进行测序分析,并合成多肽进行免疫细胞化学染色鉴定。经4轮筛选,噬菌体在靶细胞HepG2上出现明显富集;利用ELISA从随机挑选的60个噬菌体克隆中得到15个与肝癌细胞具有高结合力的阳性克隆,测序并进行序列分析比对发现氨基酸序列无同源性,经免疫细胞化学染色鉴定后,发现1条多肽序列亲和力较高,为提高抗菌肽对肿瘤细胞的靶向杀伤作用奠定基础。
- 赵红蕾韩文瑜刁昱文冯新韩东朱僧刘晓贺路荣雷连成
- 关键词：肝癌细胞靶向
- 猪链球菌2型毒力相关因子研究进展
- 猪链球菌2型是在世界范围内影响养猪业和人类健康的一种重要的人兽共患传染病.猪链球菌2型毒力因子在致病过程中发挥了重要的作用.但是对猪链球菌2型的致病机制和关键毒力因子仍然不确定,使有效的防治该病成为一个难题.本研究对猪链...
- 朱僧孙长江雷连成韩文瑜
- 关键词：猪链球菌2型毒力因子致病因子
- 香芪口服液对大肠杆菌耐药抑制作用被引量：2
- 2011年
- 通过香芪口服液对耐药大肠杆菌作用前后环丙沙星和庆大霉素最小抑菌浓度测定、质粒图谱分析以及外膜蛋白图谱分析,研究香芪口服液对耐药大肠杆菌的体外耐药性的抑制作用。结果表明:中药作用后,大肠杆菌对环丙沙星和庆大霉素最小抑菌浓度无变化;中药作用后的大肠杆菌的质粒图谱部分质粒消失,1号菌株ompA恢复表达,2号菌株ompF恢复表达;此中药与大肠杆菌质粒拷贝、恢复外膜通道蛋白的正常表达有密切关系,为今后耐药抑制剂的研制奠定理论基础。
- 邢艳苹杨峰朱僧王瑜雷连成
- 关键词：大肠杆菌耐药性抑制剂
- 猪链球菌2型毒力相关因子研究进展被引量：2
- 2010年
- 猪链球菌2型是在世界范围内影响养猪业和人类健康的一种重要的人兽共患传染病。猪链球菌2型毒力因子在致病过程中发挥了重要的作用。但是对猪链球菌2型的致病机制和关键毒力因子仍然不确定,使有效的防治该病成为一个难题。本研究对猪链球菌2型已发现的毒力因子和新发现的毒力因子进行综述,为防治该病提供科学依据和参考。
- 朱僧孙长江雷连成韩文瑜
- 关键词：猪链球菌2型毒力因子致病因子
- 羊β-防卫素在羊胎儿成纤维细胞系中的表达及抗菌活性研究
- 防卫素是由白细胞和上皮细胞分泌的抗菌肽,在固有免疫中起重要作用。羊β防卫素是防卫素家族的重要成员之一,对革兰氏阴性及革兰氏阳性细菌均有抗菌作用。研究表明,抗菌肽在细胞中的活性表达能使细胞获得一定的抵御细菌的能力。本实验通...
- 秦莹朱僧马奎莹谭文涛孔德龙唐博雷连成李子义
- 文献传递
- 2型猪链球菌突破血脑屏障的相关毒力因子筛选
- 猪链球菌（Streptococcus suis，S.Suis）是一种严重危害人类健康的人兽共患性细菌，该菌可引起仔猪脑膜炎、支气管炎、败血症和关节炎等，亦可感染与猪或者猪肉制品的直接接触的人而引起化脓性关节炎、脑膜炎、心...
- 朱僧
- 关键词：星形胶质细胞猪链球菌
- 文献传递
- 猪脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞共培养模拟体外血脑屏障模型被引量：1
- 2013年
- 血脑屏障是隔离外周体循环和中枢神经系统的屏障结构。它可以选择性允许血液中的一些物质通过脑微血管内皮细胞进入大脑中。除了脑微血管内皮细胞之外,血脑屏障的组成主要还有星型胶质细胞、周细胞、神经元和细胞外基质。本试验通过原代培养猪脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞,以Transwell细胞板为载体构建猪体外血脑屏障的共培养模型。经过4h渗漏试验和TEER电阻的测定试验显示所构建的猪体外血脑屏障的模型具备了血脑屏障基本的生物学特性,可以用于猪血脑屏障相关疾病尤其是人兽共患性疾病致病机制的研究。
- 朱僧李娜孙长江韩文瑜雷连成
- 关键词：血脑屏障共培养
