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易苗英: 作品数：22 被引量：76H指数：5; 供职机构：上海市第一人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市青年科技启明星计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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人肝癌细胞中缺氧反应元件对微环境的反应被引量：1: 2008年; 目的:通过观察缺氧反应元件(hypoxia-response element,HRE)调控下,绿色荧光蛋白质(green fluorescent protein,GFP)构建的肝癌细胞Bel-7402/5HRE-EGFP在缺氧条件下,缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等表达水平的变化,研究HRE对微环境的反应特性。方法:以5个串连的HRE和巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)的微小启动子为转录调控元件、GFP为报告基因构建表达载体,应用FCM和细胞免疫染色法观察缺氧、一氧化氮、过氧化物和酸性pH等微环境的变化对人肝癌细胞Bel-7402中HRE活性的影响,以及缺氧条件下HIF-1α、VEGF表达水平的变化。观察缺氧探针哌莫硝唑的染色强度和分布与HIF-1α、VEGF和GFP表达强度和分布之间的关系,探求裸鼠体内肿瘤组织缺氧对HRE活性及其相关基因表达的影响。结果:肝癌细胞中HRE对缺氧非常敏感,肿瘤细胞和组织缺氧时可上调HIF-1α和VEGF的表达,两者的分布也基本一致。结论:缺氧在调控肝癌血管生成因子表达方面可能起着重要的作用。; 王丰陈霞芳韦芳吴继红谢匡成田毓华易苗英李川源黄倩; 关键词：缺氧缺氧诱导因子1 缺氧反应元件绿色荧光蛋白质类

大鼠视网膜神经节细胞发育分化及免疫组织化学染色特征: 2006年; 吴继红易苗英黄倩; 关键词：免疫组织化学

早期移植性肿瘤生长与新生血管形成过程观察及机理研究: 黄倩王丰李川源徐萍田毓华李凌吴继红武文森胡宏惠陈霞芳谢匡成易苗英刘文文王晓莉; 该课题采用GFP表达质粒或GFP逆转录病毒介导GFP基因转移，建立了多种能持续、稳定表达GFP的肿瘤细胞株。建立了新的，以GFP基因标记的膀胱和视网膜原位肿瘤动物模型，观察到了接近自然状态下的肿瘤生长方式、转移途径和部位...; 关键词：; 关键词：肿瘤新生血管 VEGF

环孢素A对T细胞活化CD_(28)通路的影响被引量：3: 1998年; Ｔ细胞需两种以上刺激信号才能充分活化。环孢素Ａ（ＣｓＡ）通过阻断ＣＤ３活化通路而产生免疫抑制效应，本文研究ＣｓＡ对ＣＤ２８活化通路的影响。研究发现以抗ＣＤ３单抗和抗ＣＤ２８单抗共刺激后，淋巴细胞增殖比以抗ＣＤ３单抗单独刺激时显著增强，且对ＣｓＡ不敏感，ＩＤ５０较单独刺激时高４～５倍。研究表明：ＣＤ２８通路能提供共刺激信号，使Ｔ细胞充分活化增殖。; 周佩军唐孝达王祥慧徐达徐萍易苗英张先有凌桂明徐琴君; 关键词：T细胞 CD28 环孢素A 器官移植

重组腺病毒介导绿色荧光蛋白基因对小鼠眼组织的转染和表达被引量：2: 2007年; 目的研究不同剂量Ad5-EGFP前房注射后,报告基因在小鼠眼部组织的表达情况及分布特点。方法24只BALB/c小鼠随机分组。实验组以不同浓度梯度前房注射Ad5-EGFP。对照组前房分别注射PBS和不给予任何注射。观察活体眼部组织EGFP表达情况及阳性细胞的类型。结果低浓度注射组在各个时间点眼表均未观察到EGFP荧光表达。高浓度注射组在注射病毒第1d即可以观察EGFP的表达,在第10d时眼表EGFP荧光亮度、范围增加最为明显。EGFP在角膜内皮细胞、虹膜色素上皮细胞及小梁网阳性表达。结论Ad5型腺病毒载体定向携带报告基因在眼前节表达,为眼前节疾病的基因治疗提供了实验依据。; 于慧吴继红张圣海刘新建张巨峰易苗英黄倩; 关键词：角膜内皮细胞报告基因

一种新的神经胶质瘤原位移植模型的建立: 2007年; 目的:建立一种新的可动态观察肿瘤细胞生长的大鼠神经胶质瘤原位移植瘤模型。方法:利用脂质体将含有强化绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)基因的真核表达质粒pEGFP-N1转染大鼠神经胶质瘤C6细胞,经G418筛选及亚克隆,获取稳定表达EGFP的细胞系C6-gfp。采用CCK-8试剂盒检测C6及C6-gfp细胞增殖情况;将C6-gfp细胞接种于Wistar大鼠颅内,通过B超、大体标本、荧光体视镜、H-E染色和免疫组化观察颅内成瘤情况及瘤组织中绿色荧光蛋白的表达。结果:流式细胞术分析体外培养的C6-gfp细胞97.7%产生绿色荧光;C6-gfp细胞与亲代C6细胞相比,生长曲线无明显不同(P>0.05)。C6-gfp接种于颅内3周后成瘤率达70%;利用B超可动态观察肿瘤生长,利用荧光体视镜可见肿瘤组织发出绿色荧光,可与周围正常组织区别。H-E染色可见肿瘤细胞核大,染色深,核分裂明显,瘤内有很多新生血管。免疫组化可见GFP阳性细胞染色深浅不一。结论:成功构建了能稳定高水平表达EGFP的大鼠神经胶质瘤C6-gfp细胞株,其生物学行为未发生改变,能在同系大鼠颅内成瘤。该模型为神经胶质瘤防治研究提供了良好的基础。; 裘玮黄倩李惠明王丰伍瑛陈霞芳易苗英; 关键词：神经胶质瘤移植瘤模型瞬时转染稳定转染绿色荧光蛋白

电穿孔介导质粒DNA导入视网膜母细胞瘤抑制肿瘤生长的实验研究被引量：1: 2005年; 目的探讨电穿孔方法介导编码可溶性血管内皮细胞膜受体sFlk1和ExTek的真核表达质粒肿瘤内转移对视网膜母细胞瘤(RB)移植瘤生长的治疗效果及其作用机制。方法通过体内、外实验证实sFlk1和ExTek对RB的抑制作用及其机制。(1)体外实验:以阳离子脂质体介导质粒pCIsFlk1转染人胚肾293细胞24h后收集细胞培养液,分别按1∶1、2∶1、3∶1的比例与RPMI1640培养基混合,补充胎牛血清至浓度为10%,培养RB细胞并绘制细胞生长曲线。(2)体内实验:将1×107个人RB细胞(HXORb44)悬液接种至40只裸鼠右后腿皮下,建立RB移植瘤模型。治疗组将电穿孔技术介导表达质粒pCIsFlk1(15μg)和pCIExTek(15μg)联合导入瘤体后电击,对照组注射生理盐水后电击。每周1次,连续3次。从第1次治疗开始至第3次治疗后1周,期间每周测量肿瘤体积2次,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。采用抗平滑肌肌动蛋白抗体免疫组织化学染色法确定治疗组和对照组肿瘤内微血管密度和肿瘤内血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体Flk1的表达。结果sFlk1对体外培养的RB细胞的生长无明显抑制作用。但在体内sFlk1和ExTek联合应用能够显著抑制RB移植瘤的生长,抑瘤率为80.04%。治疗组平均微血管密度为(26.69±2.95)个/200倍视野,明显低于对照组(44.51±6.11)个/200倍视野,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。尽管2组间VEGF染色强度无明显差别,但治疗组Flk1的染色强度高于对照组。结论电穿孔方法介导编码可溶性血管内皮细胞膜受体sFlk1和ExTek的表达质粒导入RB肿瘤,可明显抑制肿瘤的生长,其作用机制为抑制肿瘤血管的生成。; 王晓莉王丰吴继红易苗英徐萍赵新峰薛月华黄倩; 关键词：视网膜母细胞瘤血管内皮生长因子A 血管内皮生长因子受体2

体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞株及其肿瘤血管生成相关因子表达的实验研究被引量：19: 2005年; 目的　探讨调控视网膜母细胞瘤(RB)新生血管的相关因素。方法　HXO -Rb- 44细胞株接种到裸鼠后腿皮下,采用免疫组织化学染色方法对RB肿瘤内促血管生成因子(VEGF -A、VEGF- C、VEGF -D)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),血管内皮细胞膜酪氨酸激酶受体(Flt- 1、Flk- 1、Flt- 4、Tie2及FGFR),转录调控因子Hif 1及促进或抑制细胞外基质降解的基质金属蛋白酶MMP- 2、MMP -7、MMP -9和基质金属蛋白酶抑制因子TIMP- 1、TIMP -2的阳性染色细胞种类、数量、分布及强度进行检测分析。结果　RB肿瘤内有较丰富的毛细血管和小血管,部分肿瘤细胞Hif 1染色阳性,大多数肿瘤细胞高水平表达VEGF,特别是VEGF- D,肿瘤内血管内皮细胞表达Flt -1、Flt- 4和FGFR。肿瘤细胞高水平表达多种基质金属蛋白酶,但不表达基质金属蛋白酶组织抑制因子。结论　VEGF信号传导通路及MMP表达上调、TIMP表达下调在RB肿瘤新生血管形成过程中起重要作用,可考虑作为治疗RB的靶点。; 吴继红徐萍易苗英王丰王晓莉黄倩; 关键词：肿瘤血管生成瘤细胞株体外培养基质金属蛋白酶抑制因子免疫组织化学染色方法促血管生成因子

人视网膜发育分化过程中基质金属蛋白酶9表达的变化: 2008年; 目的观察人视网膜发育和分化过程中基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平与细胞分布特点,探讨其在人视网膜发育和分化过程中的可能作用。方法胚胎发育早期、中晚期及成人视网膜石蜡切片,抗MMP-9免疫组织化学染色,观察MMP-9表达水平和分布的变化。结果胚胎发育早期的视网膜仅在外成神经细胞层的外侧可见弱阳性细胞;胚胎发育中期外成神经细胞层的外侧,即将来要发育成盘膜处出现明显的特异性染色,而其他细胞染色仍然较弱;成人视网膜的外核层出现显著的特异性染色细胞,胞质明显着色,胞体轮廓清晰,并可观察到锥体的结构以及突触的特异染色,判断这些细胞主要是光感受器细胞中的视锥细胞。结论MMP-9在视网膜中的表达与视网膜的成熟和细胞分化关系密切,在光感受器中的视锥细胞高水平表达,提示MMP-9可能参与视觉信号的处理。; 李惠明裘玮王丰马家烈易苗英王煜非黄倩; 关键词：视网膜基质金属蛋白酶9 细胞分布

四种中间丝蛋白在大鼠视网膜发育过程中表达的时间顺序和结构特征被引量：11: 2004年; 目的　研究视网膜内神经干细胞的标志物及其表达的时间和空间分布特征。方法　利用免疫组化染色 ,检测四种中间丝蛋白 (Nestin、Vimentin、GFAP及NF)在新生至 12月龄大鼠视网膜内表达的时间顺序、空间分布和强度变化。结果　大鼠视网膜结构的分化要到出生后 2周才能完成。在 2周内Nestin的表达可见于视网膜的神经细胞、胶质细胞、血管内皮细胞内。 2周后表达水平明显降低。 4周时完全转阴。但在睫状体的少数突起内 ,Nestin持续高水平表达 ,成年时 ,阳性细胞以色素上皮细胞为主。此外 ,在成年大鼠的视神经内也可见散在的Nestin阳性细胞。Vimentin在神经胶质细胞和睫状体的无色素上皮细胞中一直呈强阳性。除了文献报道的水平细胞外 ,我们还发现Vimentin在 4周内的M櫣ｌｌｅｒ细胞和无长突细胞内表达?牵疲粒泻停危平鲈诜⒂墒斓纳窬褐氏赴蜕窬谙赴闹嵬荒诒泶铩＝崧邸estin可作为视网膜神经干细胞的标志 ,成年时视网膜的神经干细胞分布在少数睫状突及视神经内。 (中华眼科杂志 ,2 0 0 4 ,4 0 :76 5 76 9); 吴继红易苗英黄倩; 关键词：视网膜睫状体 NF 色素上皮细胞

易苗英

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