徐树兰
- 作品数：25 被引量：53H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 赤羽病病毒囊膜糖蛋白G1基因片段重组杆状病毒表达载体的构建及表达
- 赤羽病病毒,又称阿卡斑病毒(Akababe virus,AKAV)是属于布尼病毒科布尼病毒属辛波病毒群的虫媒病毒,它可引起牛、绵羊、山羊流、早、死产及先天性关节弯曲和积水性无脑症 (Arthrogryposis-Hydr...
- 徐树兰童铁钢白宇刘光亮肖一红王群张维军吴东来
- 关键词：基因片段重组杆状病毒囊膜糖蛋白
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒荧光标记单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2011年
- 为制备可以区分牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因型的荧光标记单克隆抗体,分别利用分泌抗牛病毒性腹泻Ⅰ型病毒(BVDV-Ⅰ)、牛病毒性腹泻Ⅱ型病毒(BVDV-Ⅱ)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV-Ⅰ和BVDV-Ⅱ)单克隆抗体的杂交瘤细胞株BV1、BV2、BV12,腹腔接种BALB/c小鼠,大量制备单克隆抗体,用辛酸-硫酸铵法提纯,经活性、浓度、纯度检测合格后,利用搅拌法与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联,制备成3种荧光标记单抗。结果显示,3种标记单抗的F/P比值范围均在2.0～4.0之间;细胞DFA法测定其效价均≥1∶200;抗原交叉试验证实标记单抗的特异性良好;标记单抗可以检测到1TCID50的病毒粒子;临床初步应用表明,3种标记单抗的阳性检出率均≥95%,与进口BVDV荧光抗体的符合率为100%。3种荧光抗体的研制对BVDV基因分型鉴定、NCP型BVDV的鉴定以及BVDV与CSFV的鉴别诊断有很好的应用价值,值得进一步开发。
- 徐树兰李少英赵俊武华
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒基因型单克隆抗体荧光素标记
- 赤羽病病毒核衣壳蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：12
- 2006年
- 以纯化的重组赤羽病病毒核衣壳蛋白作为诊断抗原,建立了检测牛血清特异性核衣壳蛋白抗体的间接ELISA方法,初步组装成便于现地使用的试剂盒。经对试验条件进行优化,确定最佳抗原包被量为每孔1μg(100μL),样品稀释度为1∶100,兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶8 000。经特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。应用初步研制的间接ELISA试剂盒和微量中和试验法分别对云南省的89份、内蒙古的100份牛血清样本进行了检测,以中和试验为参照,经统计学处理,得出检测临界值分别为0.411和0.303,2种方法的符合率分别为72.7%(56/77)和91.4%(85/93)。试剂盒在37℃保存3 d,对敏感性无明显影响。
- 徐树兰李少英辛九庆尹训南孟庆文吴东来
- 关键词：赤羽病病毒核衣壳蛋白间接ELISA
- 含禽源启动子的禽流感病毒核蛋白表达载体的构建及其免疫原性的检测
- 为了研究禽流感病毒核蛋白在鸡体内所引起的免疫反应,将其NP基因从重组质粒pVAX-NP上酶切后亚克隆至含禽源启动子的真核表达载体pCAGGS中,经筛选鉴定后获得重组子pCAGGS-NP,将鉴定正确的阳性重组子体外转染真核...
- 王群刘光亮肖一红童铁钢白宇张维军徐树兰吴东来
- 关键词：禽流感核蛋白真核表达载体血清抗体
- 文献传递
- 赤羽病病毒囊膜糖蛋白G1基因片段的克隆表达及间接ELISA诊断方法的建立
- 赤羽病又名阿卡斑病/(Akabane disease/),是由赤羽病病毒/(Akabane virus,AKAV/)所引起的牛、绵羊和山羊的一种多形性传染病,以牛、羊的流产、早产、死产及先天性关节弯曲和积水性无脑症/(A...
- 徐树兰
- 关键词：赤羽病病毒囊膜糖蛋白纯化间接ELISA
- 文献传递
- 检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立被引量：5
- 2009年
- 目的:建立检测马白细胞介素-18(equine interleu-kin-18,EIL-18)的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法。方法:将识别不同表位的EIL-18的2株单克隆抗体(mAb)B1G1和S6A3纯化后,利用生物素标记试剂盒对B1G1株mAb进行标记,以重组马白细胞介素-18(rEIL-18)为捕获抗原进行ELISA检测来建立EIL-18双抗体夹心ELISA。结果:经过方阵滴定试验确定捕获抗体的最佳浓度为4mg/L,检测抗体的工作效价为1∶2000。建立的方法可检测马血清中的EIL-18,与猪、牛和羊血清中的IL-18不发生交叉性反应,此方法检测敏感度达到15ng/L,特异性良好。结论:成功建立了EIL-18的双抗体夹心ELISA,为马细胞免疫学研究提供了方法,也为下一步EIL-18ELISA试剂盒的商品化开发奠定了坚实基础。
- 童铁钢白宇张维军王群刘光亮徐树兰吴东来
- 关键词：单克隆抗体夹心ELISA
- 鸡主要组织相容性复合体/肽四聚体的构建方法及其产品
- 本发明公开了一种鸡主要组织相容性复合体/肽四聚体的构建方法及由该方法得到的产品。本发明在大量表达的重组BF2－BSP、重组Chβ2m以及合成多肽的基础上，重折叠获得了BF2/肽单体复合物，进而在此基础上进行生物素化，制备...
- 吴东来刘光亮王群肖一红童铁钢白宇张维军徐树兰张文龙殷喆
- 文献传递
- 马-干扰素成熟蛋白基因在大肠埃希氏菌中表达及其单克隆抗体的制备和特性鉴定
- 采用 RT-PCR 从马外周血单核细胞(PBMC)中扩增获得马伽玛干扰素 (Equine interferon-,EIFN-)基因,去除信号肽序列后得到马干扰素成熟蛋白 (mature EIFN-,mEIFN-)基因,克...
- 白宇童铁钢刘光亮肖一红王群徐树兰张维军吴东来
- 文献传递
- 重组马γ-干扰素抗病毒活性测定及单克隆抗体抑制活性鉴定被引量：2
- 2008年
- 为了测定大肠杆菌和杆状病毒表达的重组马γ-干扰素是否具有抗病毒活性,利用这两种干扰素处理马胎肾细胞(EFK-78),然后接种表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水泡性口炎病毒(VSV*GFP),观察干扰素对病毒表达GFP的抑制,测出其抗病毒活性单位分别为1×103AU/mL、1×105AU/mL。评价了制备的九株抗重组马γ-干扰素单克隆抗体是否可抑制重组马γ-干扰素抗病毒活性,证实其中一株可中和重组马γ-干扰素的抗病毒活性。结果表明:杆状病毒表达的马γ-干扰素具有较高的抗病毒活性,其活性可被一株制备的抗重组马γ-干扰素单克隆抗体抑制;首次获得原核表达的具有抗病毒活性的马γ-干扰素。
- 白宇陈伟业童铁钢张维军徐树兰王群孙庆歌刘光亮步志高吴东来
- 关键词：单克隆抗体
- 重组马白细胞介素-18生物学活性的测定及单克隆抗体中和活性鉴定
- 应用实时荧光定量RT-PCR方法,评价大肠杆菌(E.coli)表达的重组马白细胞介素-18(rEIL-18)蛋白在商品化的重组人IL-12(rhIL-12)协同作用下刺激马外周血单核细胞(PBMCs)产生马IFN-γ(E...
- 童铁钢白宇王群张维军刘光亮徐树兰林燕孙庆歌吴东来
- 关键词：生物学活性单克隆抗体
- 文献传递
