张福萍
- 作品数:9 被引量:15H指数:3
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- 牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中上调Bid的表达及机制
- 目的 探讨在牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中Bcl2家族促凋亡蛋白Bid的表达及调节机制.方法 8.348U/L牙龈蛋白酶作用成骨细胞MC3T3-E1不同时间点(0、8、16、24、48h)后,Annexin V/PI双染流...
- 张福萍梁敏
- 牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中促凋亡蛋白Bad的表达改变被引量:4
- 2013年
- 目的:检测牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中Bad的表达改变,为保护成骨细胞提供依据。方法:8.348U/L牙龈蛋白酶处理成骨细胞0、4、8、16、24、48和72h,或将不同浓度牙龈蛋白酶与成骨细胞作用24h后,蛋白质印迹法检测Bad蛋白表达改变。结果:在一定范围内,牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡中呈时间和剂量依赖性上调Bad的表达,牙龈蛋白酶抑制剂TLCK有效抑制牙龈蛋白酶所诱导的Bad的高表达。结论:牙龈蛋白酶上调Bad的表达,促凋亡蛋白Bad参与了牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡过程。
- 张福萍宋祥晨陈玉婷梁敏
- 关键词:成骨细胞细胞凋亡BAD
- 促凋亡蛋白Bim、Bax和Bak在牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中的表达被引量:10
- 2013年
- 目的建立牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡模型,检测成骨细胞凋亡过程中与Bc|-2蛋白相互作用的细胞死亡调解子(Bcl-2 interacting mediator,Bim)、Bcl-2蛋白相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)和Bcl-2蛋白拮抗剂(Bcl-2 antagonist/killer,Bak)的表达,探寻保护成骨细胞的方法,为牙周炎的发病机制研究提供依据。方法提取牙龈蛋白酶并测定其活性;将0.453、0.906、1.812U/L牙龈蛋白酶分别与成骨细胞共培养0、16、24和48h,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色及膜联蛋白V-碘化丙啶双染色检测牙龈蛋白酶诱导成骨细胞(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)凋亡,建立牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡模型;1.812U/L牙龈蛋白酶与成骨细胞共培养0、4、8、16、24和48h,蛋白质印迹法确定成骨细胞凋亡过程中Bim、Bax、Bak的蛋白表达;胰蛋白酶抑制剂抑制1.812U/L牙龈蛋白酶活性后与成骨细胞共培养24h,蛋白质印迹法检测Bim蛋白表达与成骨细胞凋亡率的改变。结果精氨酸-牙龈蛋白酶活性为(18.11±2.11)U/L,赖氨酸-牙龈蛋白酶活性为(1.02±0.25)U/L;DAPI染色显示1.812U/L牙龈蛋白酶可诱导成骨细胞凋亡,16h凋亡率为(6.31±0.37)%,24h达(11.20±0.35)%,48h为(10.80±0.46)%;膜联蛋白V-碘化丙啶染色结果与DAPI染色结果基本-致。成骨细胞凋亡过程伴随促凋亡蛋白Bim的表达升高,4h时Bim相对蛋白表达量为(0.31±0.03),约为对照组(0.17±0.03)的2倍,24h时Bim相对蛋白达峰值(0.57±0.05),为对照组的3~4倍;胰蛋白酶抑制剂可有效抑制牙龈蛋白酶活性,使Bim蛋白表达量由(0.58±0.04)降至(0.14±0.03);同时DAPI染色显示胰蛋白酶抑制剂可逆转牙龈蛋白酶诱导的细胞凋亡,24h成骨细胞凋亡率由(11.20±0.35)�
- 陈玉婷宋祥晨张福萍梁敏
- 关键词:细胞凋亡胰蛋白酶抑制剂
- 牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中上调Bid的表达及机制
- 目的:研究表明牙龈蛋白酶可诱导牙龈上皮细胞、牙龈成纤维细胞等牙周细胞凋亡。本课题组的前期研究发现牙龈蛋白酶呈时间和剂量依赖性诱导成骨细胞凋亡,并与Bcl2家族参与的内在凋亡通路相关。本研究旨在探讨在牙龈蛋白酶诱导成骨细胞...
- 张福萍梁敏
- 整合素β1介导牙龈蛋白酶所致的小鼠成骨细胞周期阻滞
- 2018年
- 目的探讨整合素β1(Itgb1)在介导牙龈蛋白酶所致的小鼠成骨细胞周期阻滞中的作用。方法 8.348 U/L牙龈蛋白酶处理MC3T3-E1细胞12、24、36、48、60、72 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性,含核糖核酸的碘化丙啶(PI/Rnase)染色检测细胞周期G0/G1、S、G2/M各期分布。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cyclin D1和CDK4蛋白表达水平。携带Itgb1基因的慢病毒转染MC3T3-E1细胞,构建Itgb1过表达稳转细胞株。所有数据采用SPSS 22.0统计软件包进行统计学分析。结果 CCK-8结果显示,8.348 U/L牙龈蛋白酶处理成骨细胞12~72 h持续抑制细胞增殖。流式检测结果发现,牙龈蛋白酶作用细胞12 h,停滞在G0/G1期的细胞比例由对照组(62.0±2.0)%升至(88.2±2.3)%,差异有统计学意义(F=35.218,P<0.001),S期细胞比例由对照组(36.8±6.2)%降至(5.9±2.3)%,差异有统计学意义(F=33.980,P<0.001)。Western blot结果表明,cyclin D1和CDK4的蛋白表达水平与对照组相比分别下调了65.0%(Fcyclin D1=60.294,Pcyclin D1<0.001)和40.3%(FCDK4=19.212,PCDK4=0.002)。同时牙龈蛋白酶降低Itgb1表达,过表达Itgb1部分逆转牙龈蛋白酶所致的细胞周期阻滞,S期细胞比例由牙龈蛋白酶处理空载体组的(5.8±1.1)%恢复至(14.4±3.1)%,差异有统计学意义(F=39.226,P=0.017),cyclin D1和CDK4蛋白下调水平亦得到部分逆转(Fcyclin D1=61.740,Pcyclin D1=0.033;FCDK4=41.635,PCDK4=0.014)。结论 Itgb1介导牙龈蛋白酶所致的小鼠成骨细胞细胞周期阻滞。
- 徐娜吴娟邱绮虹张福萍梁敏
- 关键词:整合素Β1细胞周期成骨细胞慢性牙周炎牙龈卟啉单胞菌
- 牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中上调Bid的表达及机制
- <正>目的探讨在牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中Bcl2家族促凋亡蛋白Bid的表达及调节机制。方法 8.348U/L牙龈蛋白酶作用成骨细胞MC3T3-E1不同时间点(0、8、16、24、48h)后,AnnexinV/PI双染...
- 张福萍梁敏
- 文献传递
- 牙龈卟啉单胞菌W83牙龈蛋白酶的提取、鉴定及对人成骨细胞增殖、凋亡的影响被引量:3
- 2013年
- 目的研究提纯并鉴定牙龈卟啉单胞菌(P.g)W83牙龈蛋白酶的方法,探讨牙龈蛋白酶对人成骨细胞系hFOB增殖及凋亡的影响。方法丙酮沉淀P.gW83上清,经重悬、透析、超滤提取牙龈蛋白酶;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分离牙龈蛋白酶条带;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱/源后衰变法(MALDI-TOF-MS/MS+MS)鉴定牙龈蛋白酶提取物;底物发色法测定牙龈蛋白酶活性;牙龈蛋白酶与人成骨细胞系hFOB1.19共培养,4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)或CCK-8检测细胞凋亡或增殖。结果 P.gW83牙龈蛋白酶提取物经SDS-PAGE分离出50kDa蛋白条带,MALDI-TOF-MS/MS+MS鉴定其为精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Rgps)。底物发色法测定Rgps、赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Kgp)活性分别为75.62、10.51U/L,5mmol/L半胱氨酸蛋白酶抑制剂TLCK对Rgps、Kgp活性抑制分别为99.51%、99.00%(P<0.01)。牙龈蛋白酶(Rgps活性15.12U/L、Kgp活性2.10U/L)与hFOB共培养8h可诱导细胞发生凋亡,出现典型的细胞核染色质凝聚,且随时间增加hFOB凋亡率逐渐上升,16~24h达到高峰。CCK-8法检测显示,牙龈蛋白酶呈时间依赖性抑制hFOB增殖。结论丙酮沉淀P.gW83上清,经重悬、透析、超滤提纯的牙龈蛋白酶主要成分是Rgps;底物发色法测定Rgps/Kgp活性,方法稳定、可靠;牙龈蛋白酶抑制hFOB增殖且促进凋亡。
- 宋祥晨张福萍李希庭梁敏
- 关键词:牙龈卟啉单胞菌成骨细胞
- EBL教学法结合前牙美学教育在口腔修复实习教学中的应用
- 目的:探讨将EBL教学法结合前牙美学教育应用于口腔修复学临床实习对培养口腔实习生美学素养和临床实践能力的效果。方法:以五年制口腔医学实习生为对象,进行理论学习、病例(模型)分析、美学修复方案设计、修复体制作四部分学习实践...
- 马达魏雅茹浩志超张福萍范丹平杨文张新春
- 关键词:美学思维
- 基于ME2介导的褪黑素调控线粒体动力学改变促牙乳头细胞成牙本质向分化的机制研究
- 研究背景 褪黑素(Melatonin,MT)是一种主要由松果体分泌的小分子吲哚胺类神经内分泌激素,有研究显示MT可能参与牙本质的形成,课题组前期实验发现MT促进大鼠牙乳头细胞(Dental papilla cells,...
- 张福萍
- 关键词:褪黑素牙乳头细胞