喻川
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 油葵含油量相关基因在烟草中的表达被引量：3
- 2011年
- 采用RT-PCR和RACE技术从油葵（Helianthus annuus L.）种子中克隆了DGAT基因的cDNA全长序列,命名为HaD1（GenBank登录号为HM 015632）.将HaD1与CaMV 35S组成型启动子融合,构建植物表达载体pBI-HaD1,通过根癌农杆菌介导转化烟草.对转基因植株进行GUS及PCR检测,同时采用气相色谱-质谱法（GC-MS）分析转基因烟草叶片中脂肪酸各成分的含量.结果表明：HaD1基因cDNA全长1 936 bp,最大开放阅读框为1 524 bp,编码507个氨基酸;推测的氨基酸序列与其它植物已报道的DGAT1基因的氨基酸序列一致性为70%~80%,具有DGAT1蛋白保守的二酰甘油结合基序HKWIVRHLYFP＂,因此HaD1基因属于DGAT1基因家族.GUS活性染色及PCR检测均证明外源HaD1整合到烟草基因组并成功表达.转基因烟草叶片脂肪酸含量测定发现,油酸、软脂酸和硬脂酸的含量得到提高,推测HaD1是植物油脂合成相关的重要基因.
- 孙黎寇尚龙欧阳超喻川陈放
- 关键词：油葵烟草转基因脂肪酸含量
- 麻疯树MIPS基因启动子的分离及在烟草原生质体中瞬时表达活性分析被引量：2
- 2010年
- 根据麻疯树MIPS基因序列,设计特异性的巢式引物,运用TAIL-PCR法两次步移得到MIPS基因5'端侧翼序列,序列分析显示含有多个胁迫应答相关元件,如ABRE、HSE等。以该序列为基础,PCR扩增得到5个5'端不同长度的缺失片段,分别插入pBI221载体置换CaMV35S启动子,构建的表达载体在PEG介导下转入烟草叶片原生质体进行瞬时表达,检测GUS报告基因的活性。经GUS活性荧光定量检测发现,分离到的MIPS基因侧翼序列5'端不同缺失片段都能启动GUS报告基因表达,启动活性最高的是WQ1区(-565bp),核心区位于-565～-449bp。在100μmol·L-1ABA诱导下启动活性增强,但不同区段的增长幅度不同。WQ1区增长幅度最大,比未处理时提高41.4%。
- 苟春宝王勇喻川陈放魏炜
- 关键词：麻疯树启动子原生质体
- 麻疯树脱氢抗坏血酸还原酶基因功能的研究及重组蛋白纯化
- 为了深入研究麻疯树脱氢抗坏血酸还原酶蛋白,克隆得到麻疯树脱氢抗坏血酸基因JcDHAR,并进行生物信息学分析。将该基因的ORF克隆到植物双元表达载体pBI121上获得p35S：JcDHAR重组载体,经农杆菌介导转化本生烟草...
- 唐佳喻川韩海洋严君魏炜
- 关键词：脱氢抗坏血酸还原酶原核表达蛋白纯化麻疯树
- 麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因的克隆与原核表达
- 2011年
- 通过RACE技术,克隆了麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因(JcMIPS),其开放读码框为1530 bp,编码510个氨基酸.序列分析表明,JcMJPS与多种植物MJPS基因的氨基酸序列具有较高相似性,达87.08%～91.18%,且含有MIPS基因的四个保守域.在此基础上构建了原核表达栽体,在1 mmol/L IPTG,18℃下诱导表达5 h,获得了可溶性的目的蛋白.亲和层析纯化目的蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcMIPS原核表达成功.
- 喻川苟春宝黄静王勇陈放魏炜
- 关键词：麻疯树克隆原核表达
- 麻疯树脱氢抗坏血酸还原酶基因克隆及重组蛋白纯化被引量：1
- 2014年
- 利用RACE技术克隆出麻疯树脱氢抗坏血酸基因JcDHAR,构建原核表达载体pET-28a-JcDHAR,并对重组菌表达的条件进行了优化,进而进行Ni亲和层析纯化蛋白.结果表明:表达产物与预期大小相符,His-JcDHAR蛋白质的分子质量为30kD;在37℃的条件下0.1mM的IPTG诱导表达5h时,获得了可溶性重组蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcDHAR原核表达成功.
- 唐佳喻川韩海洋严君魏炜
- 关键词：脱氢抗坏血酸还原酶原核表达蛋白纯化麻疯树
