王勇
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 麻疯树干旱诱导差异表达基因片段的分离与功能分析
- 2010年
- 运用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR),并结合反向Northern杂交筛选麻疯树(Jatropha.curcus)干旱胁迫下差异表达基因,最终从麻疯树叶片中分离出8条干旱胁迫诱导下表达上调的差异片段.经克隆、测序和基因信息分析后发现其中4个片段与GenBank中已知序列有较高同源性.对这4个差异表达片段的序列分析表明:JcDD-3和JcDD-13分别与1-磷酸-肌醇合成酶(MIPS)基因及甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因序列有较高同源性;JcDD-16与白杨中度抗旱叶片中提取的表达序列标签(CU230383)核酸序列同源;JcDD-25与植物富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶(LRR-RLK)基因序列同源.
- 戴晓苟春宝王勇杨彩兰陈巍陈放魏炜
- 关键词：MRNA差异显示干旱胁迫麻疯树
- 麻疯树MIPS基因启动子的分离及在烟草原生质体中瞬时表达活性分析被引量：2
- 2010年
- 根据麻疯树MIPS基因序列,设计特异性的巢式引物,运用TAIL-PCR法两次步移得到MIPS基因5'端侧翼序列,序列分析显示含有多个胁迫应答相关元件,如ABRE、HSE等。以该序列为基础,PCR扩增得到5个5'端不同长度的缺失片段,分别插入pBI221载体置换CaMV35S启动子,构建的表达载体在PEG介导下转入烟草叶片原生质体进行瞬时表达,检测GUS报告基因的活性。经GUS活性荧光定量检测发现,分离到的MIPS基因侧翼序列5'端不同缺失片段都能启动GUS报告基因表达,启动活性最高的是WQ1区(-565bp),核心区位于-565～-449bp。在100μmol·L-1ABA诱导下启动活性增强,但不同区段的增长幅度不同。WQ1区增长幅度最大,比未处理时提高41.4%。
- 苟春宝王勇喻川陈放魏炜
- 关键词：麻疯树启动子原生质体
- 一种麦芽酸性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究被引量：2
- 2011年
- 经硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose CL 4B和DEAE-Sepharose CL 4B离子交换柱层析等步骤,从麦芽中分离提纯到一种酸性磷酸酶(ACPase,E.C.3.1.3.2),纯化倍数为33.06,酶液比活为88.27 U/mg.通过动力学方法测得其最适pH为5.4,酸碱稳定性较差,仅在pH6.0左右的缓冲液中较稳定;最适温度为50℃,40℃以下有较好的稳定性;在最适条件下,该酶催化pNPP的米氏常数(K_m)为4.696×10^(-4)mol/L.同时研究了一些金属离子和有机化合物对该酶活性的影响.
- 杨彩兰陈巍苟春宝王勇魏炜
- 关键词：麦芽酸性磷酸酶分离纯化动力学性质
- 麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因的克隆与原核表达
- 2011年
- 通过RACE技术,克隆了麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因(JcMIPS),其开放读码框为1530 bp,编码510个氨基酸.序列分析表明,JcMJPS与多种植物MJPS基因的氨基酸序列具有较高相似性,达87.08%～91.18%,且含有MIPS基因的四个保守域.在此基础上构建了原核表达栽体,在1 mmol/L IPTG,18℃下诱导表达5 h,获得了可溶性的目的蛋白.亲和层析纯化目的蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcMIPS原核表达成功.
- 喻川苟春宝黄静王勇陈放魏炜
- 关键词：麻疯树克隆原核表达
