刘红艳
- 作品数：8 被引量：7H指数：1
- 供职机构：复旦大学附属华山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生航空宇航科学技术水利工程更多>>
- 乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针及其应用方法
- 本发明属医学领域，涉及乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针及其应用方法。本发明的乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针，是SEQ ID NO 6、SEQ ID NO 7、SEQ ID NO 8、SEQ ID NO 9、SE...
- 张继明刘红艳李义良毛日成尹永喜夏佳慧范丽丽李新艳
- 文献传递
- 一种抗乙型肝炎病毒的靶点及其应用
- 本发明公开了一种一种肝组织FAM176A基因和/或其编码的FAM176A蛋白作为抗乙型肝炎病毒的靶点的应用或作为在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用，本发明发现肝组织FAM176A基因编码的跨膜蛋白FAM176A能抑制HBV...
- 张继明陆蒙吉刘红艳于洁沈忠良
- 文献传递
- 乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针及其应用方法
- 本发明属医学领域，涉及乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针及其应用方法。本发明的乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针，是SEQ ID NO12、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 14、SEQ ID NO 15...
- 张继明刘红艳李义良毛日成尹永喜夏佳慧范丽丽李新艳
- 文献传递
- 应用滚环扩增技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的研究被引量：5
- 2010年
- 目的 应用滚环扩增（RCA）技术检测HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）,观察该方法的特异性和敏感性.方法 以HBV全基因质粒为模板,经酶切、连接、浓缩、胶回收纯化等步骤,构建和制备HBV cccDNA标准品.抽提7例慢性乙型肝炎患者肝组织总DNA,进行滚环扩增.用HBV cccDNA标准品、3.2 kb线性HBV DNA、健康肝组织总DNA及15例慢性乙型肝炎患者血清总DNA作为对照,验证此方法的特异性.将HBV cccDNA标准品进行系列稀释,了解该方法的敏感性.结果 成功构建了HBV cccDNA,并可用RCA方法进行扩增.RCA方法可从2 mg的慢性乙型肝炎患者肝组织中检测到HBV cccDNA,并可检测低至1×102拷贝/μL的HBV cccDNA.RCA方法不能检测3.2 kb线性HBV DNA,在健康肝组织及15例慢性乙型肝炎患者血清中亦检测不到HBV cccDNA.结论 RCA方法操作较方便,具有很高的特异性和敏感性.
- 赵旭刘红艳李新艳秦艳丽邬祥惠翁心华佘会元张继明
- 一种抗乙型肝炎病毒的靶点及其应用
- 本发明公开了一种肝组织FAM176A基因和/或其编码的FAM176A蛋白作为抗乙型肝炎病毒的靶点的应用或作为在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用，本发明发现肝组织FAM176A基因编码的跨膜蛋白FAM176A能抑制HBV的复...
- 张继明陆蒙吉刘红艳于洁沈忠良
- Differentially expressed intrahepatic genes contribute to control of hepatitis B virus replication in the inactive carrier phase
- 刘红艳李发红陆蒙吉张继明
- 应用液相芯片技术检测拉米夫定耐药相关性HBV变异被引量：1
- 2009年
- 目的建立一种检测拉米夫定（LAM）耐药相关性HBV变异的检测系统。方法从血清样本中提取病毒DNA，经纯化后，与生物素标记的引物经过PCR扩增后，来自HBV开放阅读框架的、被生物素标记的DNA扩增产物与偶联在微球上的特异性寡核苷酸探针杂交，未能结合微球的DNA被洗脱，加入标记有链亲素修饰的藻红蛋白（SAPE），在Luminex分析仪上，用双色激光分别激发微球的红色荧光（定性）和SAPE的绿色荧光（定量），从而判断靶基因的突变类型和相对含量。采用液相芯片（muhi-analyte suspension array，MASA）技术构建有LAM相关耐药的HBV全基因质粒和25例LAM耐药的慢性乙型肝炎患者（CHB）的HBV逆转录区（RT）第180和204位氨基酸的变异情况；并与普通测序法相比较，以了解该方法的特异性；同时将变异株和野毒株按不同比例混合后检测，以了解该方法的敏感性。结果MASA可同时检测a180和n204氨基酸变异，并能准确判断变异的类型及混合变异；MASA对25例LAM耐药的CHB患者相关耐药，检测发现有15份患者标本中20411探针杂交信号明显升高（测序变异阴性和阳性荧光值中位数分别为5和106），有11份样本与204V探针杂交信号较高（测序变异阴性和阳性荧光值中位数分别为9和114）差异有统计学意义（z=-4．588，P〈0．05；z=-4．520，P〈0．05）；有2份发现2种探针杂交信号均很高，即有YIDD和YVDD混合变异株存在；仅有1份标本与20412探针杂交信号明显较高。同样用该方法检测20份未治疗患者的血清标本，均未发现LAM相关性变异。当病毒群中含有大于5％的LAM耐药相关HBV变异株时，即可被本方法检测到。结论MASA可用于LAM相关耐药变异株的早期检测。该方法较普通测序法灵敏，且操作简便、高通量、需要时间短，便于临床大样本检测的应用。
- 刘红艳毛日成李义良夏佳慧范丽丽尹永喜李新艳赵旭郭红英朱浩翔张继明
- 关键词：拉米夫定芯片分析技术
- 基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株被引量：1
- 2013年
- 目的建立一种HBV复杂前C区变异株精确定量的检测系统。方法分两步实时PCR完成检测。首先应用野生株阻断探针(WT-blocker probe)进行选择性抑制野生株病毒的扩增,而含量偏低的变异株病毒得以扩增约10000倍,使其在后续反应中易于检出;第二步应用单标记探针(Simple Probe)结合熔解曲线分析系统精确定量检测前C区G1896A、G1899A、G1896A/G1899A变异株。通过PBPPO(primer-blocker-probe partial-overlap)设计减少基因多态性对检测的影响,来提高检测精确度。检验结果经直接测序及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法予以证实。结果 4种标准质粒(G1896/G1899、G1896A、G1899A、G1896A/G1899A)能够很好地被检出并予以区分,突变检测灵敏度达到0.01%;10例HBeAg阳性(直接测序法鉴定前C区变异阴性)患者血清标本中,每例至少1种前C区变异株被检出。结论单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析能够早期灵敏检测前C区变异株,前C区变异株进化过程及机制还需进一步大样本、纵向队列研究予以阐明。
- 涂文辉侯伟张瑾吕莹王瑾瑜张咏梅张轶俊刘红艳朱浩翔秦艳丽毛日成张继明
- 关键词：熔解曲线分析
