刘传江
- 作品数：32 被引量：92H指数：7
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- NKG2D配体在小鼠异位气管移植模型中的作用
- 2017年
- 目的 观察小鼠异位气管移植后不同时间点NKG2D配体Rae-1和H60表达水平的变化，探讨其在肺移植后闭塞性细支气管炎（BOS）中的重要作用。方法 建立小鼠异位气管移植模型并于术后7、14、28 d取材。苏木素-伊红（HE）和Mallory染色形态学观察，并检测术后气管闭塞率，实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测不同时间点移植物Rae-1和H60的mRNA表达；免疫组织化学检测不同时间点移植物的Rae-1和H60蛋白表达。结果 移植后随时间延长，HE染色提示BOS病理学不断进展，与对照组比较，气管移植物14 d和28 d管腔闭塞率不断增加[（30.82±7.61）%和（83.52±13.12）%比（3.75±1.78）%，P＝0.012、0.007]，Mallory染色和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达不断增强。RT-qPCR检测结果显示与对照组比较，移植后小鼠气管移植物14 d的H60（12.712 2±2.828 0比0.739 6±0.042 8，P＝0.014）和28 d的Rae-1 mRNA（10.464 9±2.109 1比0.617 6±0.041 3，P＝0.022）表达强度均明显提高。免疫组织化学检测结果显示气管移植物H60和Rae-1在蛋白水平表达分别在14 d（207.97±25.87比31.63±9.42，P＝0.023）和28 d（185.34±24.06比32.84±7.85，P＝0.026）明显高于对照组。结论 NKG2D配体可能参与了肺移植后BOS的发生发展，加强主要组织相容性Ⅰ类相关基因（MIC）配型或特意性阻断NKG2D通路有可能延缓并减少肺移植后BOS的产生。
- 唐强张宏伟薛飞刘传江付强贾鹏冲秦涛
- 关键词：肺移植闭塞性细支气管炎NKG2D
- 骨髓间充质干细胞对大鼠慢性胰腺炎中星状细胞的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（BMSCs）对慢性胰腺炎（CP）中星状细胞（PSC）的活化、增殖和分化的影响。方法将80只SD大鼠随机分为空白组（20只，注射无菌生理盐水）、模型组[20只，尾静脉注射二氯二丁基酯（DBTC）制作大鼠CP模型]、治疗组（20只，于CP模型制作成功后尾静脉注射体外培养的同种异体GFP-MSCs）、假治疗组（20只，于CP模型制作成功后尾静脉注射等量的无菌生理盐水）。取大鼠胰腺检测PSC活化表达的Desmin、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平，组织中Ⅰ、Ⅲ胶原含量及白细胞介素（IL）-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α、转化生长因子（TGF）-β1表达水平。结果治疗组PSC表达的Desmin、GFAP、α-SMA，组织中Ⅰ（0．135±0．030）ng／g、Ⅲ胶原含量（0．029±0．008）ng／g，TGF-β1（0．020±0．006）μg／L浓度均低于假治疗组（P〈0．05），但IL-10（603．799±89．374）g/ml，TNF-α（507．45±90．13）μg／L均高于假治疗组（P〈0．05），后者与模型组之间的差异无统计学意义（P〉0．05），空白组未见明显异常。结论BMSCs可以通过对细胞因子的调控减少PSC的活化，抑制其增殖及分化，降低细胞外基质的沉积。
- 刘传江秦涛刘健康唐强王玉柱张宏伟
- 关键词：骨髓间充质干细胞慢性胰腺炎星状细胞
- 微小RNA在大鼠慢性胰腺炎与正常胰腺组织中的表达差异被引量：1
- 2014年
- 目的 比较大鼠慢性胰腺炎（CP）胰腺组织与正常胰腺组织微小RNA （miRNA）表达谱的差异,探讨CP发病中潜在的关键调节作用的miRNA及其靶基因功能.方法 将16只SD大鼠随机分为实验组和对照组,分别尾部静脉注射二氯二丁基酯和无菌生理盐水建立模型,8周后检测血清淀粉酶及胰腺组织病理变化.检测分析胰腺组织miRNA表达谱差异,对差异表达的miRNA进行靶基因预测、Gene Ontology（GO）分析和信号通路分析.结果 实验组与对照组血清淀粉酶、病理组织学评分差异有统计学意义（P＜0.05）;两组miRNA表达谱差异明显,与对照组胰腺组织比较,实验组胰腺组织中上调miRNA共49个,下调miRNA共37个（变化倍数＞2.0,P＜0.05）,上调的部分miRNA参与胰腺组织的纤维化和细胞的凋亡.在差异表达miRNA中有24个（占27.91％）可以找到相应的靶基因,GO分析结果表明靶基因在细胞物质代谢、增殖周期、信号传导、胞外结构活动、细胞器合成等过程中起重要调节作用;信号通路分析表明基因在代谢通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、癌症通路和Hedgehog信号通路等富集有显著变化.结论 慢性胰腺炎大鼠胰腺组织与正常大鼠胰腺组织中miRNA表达谱差异有统计学意义,miRNA通过调节靶基因的表达参与调控代谢通路、MAPK信号通路、癌症通路和Hedgehog信号通路等,在胰腺实质纤维化的进展和癌变中起重要调节作用.
- 张宏伟罗乾坤秦涛刘传江胡明星王玉柱
- 关键词：慢性胰腺炎微小RNA
- 长链非编码RNA RGD1566401在大鼠急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的作用
- 张旭王玉柱胡明星刘传江付强唐强薛飞秦涛张宏伟
- 缝隙连接结合蛋白2在胰腺癌相关成纤维细胞中表达和对胰腺癌侵袭、转移的影响
- 2023年
- 目的探究缝隙连接结合蛋白2(GJB2)在胰腺癌相关成纤维细胞(CAF)的表达和对胰腺癌细胞侵袭和迁移的影响。方法收集河南省人民医院39例胰腺癌标本和其对应癌旁组织,培养原代CAF和正常胰腺成纤维细胞(NF)以及胰腺癌类器官。测序分析CAF与NF基因表达差异。免疫组化染色进行GJB2表达评分,根据病理结果将标本分为T分期>2组和T≤2组,N>0组和N=0组,有神经浸润组和无神经浸润组。采用t检验评估不同分组GJB2表达评分差异,免疫组化染色进行GJB2表达评分,根据病理结果将标本分为T分期>2组和T≤2组,N>0组和N=0组,有神经浸润组和无神经浸润组。使用t检验评估不同分组GJB2表达评分差异,分析GJB2在CAF中表达量与患者预后相关性。设计GJB2过表达序列并构建载体,转染NF,蛋白质印迹法(Western blot)检测转染后NF中GJB2表达量。将GJB2过表达组设为实验组(OE-NF),转染空载质粒NF设为对照组(OE-NC),分别与胰腺癌细胞、胰腺癌类器官共培养,Transwell实验和侵袭胶实验,采用t检验评估两组细胞影响下胰腺癌细胞的转移能力和侵袭能力差异。结果测序结果显示GJB2在CAF表达量高于NF(log2FoldChange:-5.37 pval:1.34e-04<0.05),免疫组织化学结果显示GJB2在T分期>2组表达量(11.310±0.221)较T≤2组(9.261±0.542)明显升高,差异有统计学意义(t=3.99,P<0.01)。N>0组表达量(10.950±0.249)较N=0的组(9.313±0.669)升高,差异有统计学意义(t=2.857,P<0.05)。神经浸润组(11.600±0.193)较无神经浸润组(9.625±0.442)升高,差异有统计学意义(t=4.563,P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析结果显示GJB2高表达组患者3年总生存期明显低于低表达组[风险比(HR)=2.50(1.26~4.96),P<0.01]。Transwell迁移实验中OE-NF组穿出数量(20.200±2.417)多于OE-NC组(6.600±1.288,t=4.966,P<0.01),且Transwell侵袭实验中OE-NF组(343.80±19.440)引导肿瘤细胞穿出数量多于OE-NC组(66.380±3.914,t=13.99,P<0.01)。结论GJB2在CAF�
- 刘佳音刘传江付强罗乾坤刘攀张宏伟
- 关键词：胰腺癌
- 糖尿病/星型胶质细胞富集磷蛋白酶-15的表达对急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 观察糖尿病/星型胶质细胞富集磷蛋白酶-15（PED/PEA-15）的表达对蛙皮素诱导的体外急性胰腺炎（AP）模型腺泡细胞凋亡的影响.方法 建立体外AP模型：用10 nmol/L的蛙皮素处理胰腺腺泡细胞株（AR42J细胞）建立AP模型,4h后检测培养液淀粉酶水平,实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测PED/PEA-15的mRNA表达,吖啶橙/溴乙锭（AO/EB）法检测AR42J细胞的凋亡.构建PED/PEA-15的真核表达载体pcDNA3和空载体,利用脂质体转染AR42J细胞,72 h后加入10 nmol/L的蛙皮素处理,RT-PCR检测PED/PEA-15的mRNA表达水平,AO/EB法检测AR42J细胞的凋亡.结果 蛙皮素处理的AR42J细胞培养液淀粉酶水平较未处理细胞明显升高[（748.75±42.90） U/L较（249.75±27.16） U/L,P＜0.05],PED/PEA-15的mRNA表达降低（5.24±0.66）倍（P＜0.05）,细胞凋亡率[（78.75±0.03）％]较未处理组[（17.50±0.04）％]升高（P＜0.05）.PED/PEA-15-pcDNA组AR42J细胞较空载体组PED/PEA-15的mRNA表达升高（4.27±0.78）倍（P＜0.05）,淀粉酶水平[（528.71±34.92） U/L]较空载体组[（856.29±52.39） U/L]明显下降（P＜0.05）,细胞凋亡率[（22.19±1.21）％]较空载体组[（68.92±1.83）％]降低（P＜0.05）,转染空载体组各项指标与未转染组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 PED/PEA-15蛋白在胰腺腺泡细胞的表达升高,能够抑制蛙皮素诱导的AR42J胰腺腺泡细胞凋亡.
- 胡明星王玉柱刘传江秦涛
- 关键词：急性胰腺炎
- 吲哚胺-2,3双加氧酶在脓毒症患者免疫炎症中的表达及临床意义被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨吲哚胺-2,3双加氧酶（IDO）在脓毒症患者免疫炎症进展过程中的表达及其临床意义。方法 选取90例脓毒症患者,按照疾病严重程度分为脓毒症组（32例）、严重脓毒症组（30例）及脓毒性休克组（28例）,选择30例健康人作为对照组。采用流式细胞仪检测CD4-＋、CD8-＋、CD4-＋CD25-＋调节性T细胞（Treg）的水平,计算CD4-＋/CD8-＋百分比。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素（IL）-6、IL-10、干扰素-γ（INF-γ）、IDO的表达水平。结果 对照组、脓毒症组、严重脓毒症组、脓毒性休克组IL-6水平分别为（45.23±8.0）、（86.84±7.83）、（142.01±11.11）、（206.92±17.79）ng/L,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,IL-10水平分别为（9.34±3.58）、（20.17±4.04）、（39.04±4.29）、（64.96±4.41）ng/L,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,IL-6/IL-10分别为6.45±1.17、4.53±1.03、3.86±0.83、3.20±0.62,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,INF-γ分别为（2.58±1.36）、（5.68±0.59）、（17.29±2.46）、（31.28±4.49）ng/L,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,IDO分别为（13.41±1.80）、（22.88±3.61）、（34.38±2.2）、（45.35±4.29）ng/L,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,CD4-＋分别为（37.35±1.79）%、（29.38±1.53）%、（26.80±0.97）%、（21.22±1.44）%,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,CD8-＋分别为（19.61±0.73）%、（20.33±1.01）%、（23.1±0.98）%、（25.63±0.52）%,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,CD4-＋/CD8-＋分别为1.91±0.15、1.42±0.07、1.16±0.08、0.83±0.07,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,Treg分别为（0.62±0.11）%、（1.96±0.87）%、（3.12±1.02）%、（4.35±1.23）%,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论IDO在免疫炎性反应中发挥重要作用,有助于评估脓毒症的严重程度
- 秦涛刘卫青周文婧胡明星唐强王玉柱刘传江张宏伟
- 关键词：脓毒症免疫炎症
- 梗阻性黄疸模型小鼠肝脏自然杀伤细胞水平变化及意义被引量：2
- 2016年
- 目的探讨梗阻性黄疸模型小鼠自然杀伤(natural killer,NK)细胞的水平变化及意义。方法 80只小鼠随机分为手术组和假手术组各40只,手术组行胆总管结扎术制备梗阻性黄疸小鼠模型,假手术组仅游离胆管。分别于第7天和第14天取小鼠血清及肝脏组织,检测2组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素和间接胆红素水平;对肝脏组织行组织病理检查HE染色、Masson三染色,采用免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR检测肝脏NK细胞表面特异性标志NK1.1、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和TNF相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)mRNA表达情况。结果手术组第7、14天血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素和间接胆红素水平较假手术组明显升高(P<0.01),第14天各指标水平高于第7天(P<0.05);手术组第7天NK1.1、TRAIL、TNF-αmRNA相对表达量(36.04±4.42、1.96±0.29、203.23±20.90)明显高于假手术组(1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00)(P<0.01),第14天(168.69±12.90、4.95±0.43、530.44±57.66)明显高于第7天和假手术组(1.01±0.03、1.01±0.02、0.99±0.02)(P<0.01),假手术组第7天NK1.1、TRAIL、TNF-αmRNA相对表达量与第14天比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论梗阻性黄疸模型小鼠肝脏NK细胞增多,与肝损伤严重程度明显相关,NK细胞可能通过TRAIL依赖途径参与梗阻性黄疸的肝损伤过程。
- 陈琳付强唐强刘传江张莉张宏伟
- 关键词：梗阻性黄疸胆汁淤积自然杀伤细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体小鼠
- 小干扰RNA特异性沉默c-myc基因对人胰腺癌SW1990细胞生物学影响被引量：7
- 2015年
- 目的 观察小干扰RNA（siRNA）沉默c-myc基因的表达对人胰腺癌细胞株SW1990细胞生物学影响.方法 用siRNA沉默胰腺癌SW1990细胞中c-myc基因,用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）及Western blot技术检测c-myc mRNA及蛋白的表达量;噻唑蓝（MTT）法检测siRNA沉默c-myc基因对SW1990细胞增殖的影响;膜联蛋白V/碘化丙锭（Annexin V/PI）双染流式细胞术检测沉默c-myc基因细胞凋亡水平;Transwell细胞迁移实验检测siRNA沉默c-myc基因对SW1990细胞迁移能力的影响.结果 靶向c-myc的特异性siRNA可以高效抑制人胰腺癌SW1990细胞c-myc基因表达,在mRNA水平（0.263±0.048）较转染对照质粒组（0.970±0.012）明显降低,c-myc蛋白质表达量及细胞增值率均较转染对照质粒组明显降低;转染后48 h c-myc siRNA组细胞凋亡率为（19.90±2.09）％,明显高于siRNA阴性对照组（4.93±0.25）％和空白对照组（4.40±0.34）％;Transwell实验结果示细胞穿膜数c-myc siRNA组[（34.3±1.2）个]较siRNA-NC组[（68.3±5.8）个]和空白组[（72.3±1.2）个]均明显降低.结论 c-myc siRNA能够显著抑制c-myc基因在人胰腺癌SW1990细胞中的表达,降低细胞的增殖和迁移能力,促进细胞的凋亡.
- 王玉柱薛焕洲付强秦涛刘传江张宏伟
- 关键词：胰腺癌小干扰RNAC-MYC基因
- 微小RNA-19b对急性坏死性胰腺炎腺泡细胞坏死的作用被引量：6
- 2015年
- 目的 观察微小RNA-19b（miRNA,miR-19b）在大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）中的表达变化及其对腺泡细胞坏死的作用.方法 建立ANP模型：接种AR42J细胞1＆#215;105个/孔于24孔板,24 h后加入200 μm/L牛磺石胆酸-3-硫酸酯二钠盐（TLC-S）,1h后检测淀粉酶和miR-19b表达量.病毒转染及分组：转染腺病毒介导miR-19b模拟物（mimic）为mimic组,转染miRNA反义寡核苷酸链（AMO）为AMO组,转染空病毒组及未转染病毒的空白组,转染48 h后荧光检测转染效率,诱导ANP,实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-19b的表达量,吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）双染色法检测AR42J细胞坏死率.结果 TLC-S处理后AR42J细胞较未处理细胞淀粉酶水平[（1 084.5±64.9）U/L比（290.3 ±6.8）U/L]明显升高（P＜0.05）,miR-19b表达量升高（2.51±0.14）倍,建立模型成功;mimic组miR-19b表达量较空病毒组升高（5.94±0.95）倍,AR42J细胞坏死率明显升高[（50.3±1.5）％比（39.6±2.3）％,P ＜0.05];AMO组miR-19b表达量降低（0.38±0.15）倍,AR42J细胞坏死率明显降低[（23.1±3.3）％比（39.6±2.3）％,P＜0.05];空病毒组比空白组miR-19b表达量、细胞坏死率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 miR-19b表达量在ANP中升高,上调其表达,腺泡细胞坏死率增加,下调其表达,腺泡细胞坏死率降低.
- 罗乾坤张宏伟秦涛胡明星张亚平刘传江
- 关键词：腺泡细胞坏死
