高晨
- 作品数：83 被引量：126H指数：6
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后半数致死量(LD_(50))的测定被引量：9
- 2006年
- 目的测定羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后的LD50。方法将感染羊瘙痒因子263K的仓鼠脑组织用生理盐水制成10%(w/v)脑组织匀浆,梯度稀释后感染仓鼠,观察仓鼠的发病情况。以Reed-Muench公式计算LD50,用West-ern blot方法检测观察期结束后发病及仍存活的仓鼠脑组织、脾组织中抵抗蛋白酶K的PrPSc。结果当颅内接种稀释度由低到高变化时,仓鼠发病的潜伏期及病程同时也由短到长发生变化。发病仓鼠脑组织中可以检测到PrPSc,但是PrPSc的量在不同的组之间无太大差别。观察期结束后,仍存活的仓鼠脑组织中未检测到具有PK抗性的PrP信号。结论本实验室保存的羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠的LD50为9.2-log10LD50i.c.units/0.001g brain,即当对仓鼠颅内接种10μl羊瘙痒因子263K的10-9.2稀释液时,50%的仓鼠会死亡。
- 石琦张宝云高晨韩俊高永军周玉玲董小平
- 关键词：半数致死量
- 不同剂量羊瘙痒因子263K颅内感染仓鼠临床终末期脑中GFAP表达的研究
- 2008年
- 目的研究不同剂量羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后，在发病的终末期星形胶质细胞增生程度是否与注射剂量及潜伏期长短有关。方法以胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）作为星形胶质细胞增生的分子标志物，采用Western Blot和免疫组化方法检测感染仓鼠终末期脑匀浆和脑组织病理切片中的GFAP表达，经定量分析比较各感染剂量组间是否存在差异。结果与正常对照相比，不同剂量感染仓鼠发病终末期脑组织GFAP阳性细胞数量和总GFAP含量均明显升高，但各感染剂量组间无显著差异。结论不同感染剂量羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠在发病终末期脑中星形胶质细胞的增生程度相似，与感染剂量及潜伏期无关联性。
- 田婵张宝云石琦韩俊高晨韩露董小平
- 关键词：朊病毒纤维蛋白
- 膜蛋白Flotillin-1与细胞膜PrPC内吞相关性研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究膜蛋白Flotillin-1是否与PrP。蛋白内吞相关。方法利用免疫印迹法观察不同细胞株中Flotillin-1表达情况；利用免疫共沉淀的方法，检测Flotillin-1和PrPc蛋白在Cu2＋存在条件下相互作用的情况。结果①免疫印迹法显示Flotillin-1在多种细胞株中均有表达，且表达量没有明显差别；②免疫共沉淀实验（IP）结果提示在cu2＋处理条件下细胞中有PrPc与Flotillin-1蛋白复合体的形成，并且与cu2＋浓度以及cu2＋处理时间相关；结论膜蛋白Flotillin-1与细胞膜PrPc内吞过程存在相关性。
- 任科王轲许尹李龙珠张瑾王荟燕玉娥董小平高晨
- 关键词：朊病毒铜
- 人乳头瘤病毒2（HPV2）E2蛋白不同功能区突变对转录抑制作用影响的研究被引量：1
- 2011年
- 目的 研究HPV2变异株上E2蛋白不同功能区域的点突变对其转录作用的影响.方法 根据HPV2突变株E2上的突变点设计引物,采用延伸法构建不同的E2突变体,并插入到真核表达质粒pcDNA3.1中.表达不同突变体E2的pcDNA3.1-E2与带有HPV原毒株LCR的CAT报道基因载体进行共转染Hela细胞.通过检测CAT的表达量对不同E2突变体的转录抑制作用进行评估.结果 与全长的原毒株E2相比较,去除N端及C端功能区的E2蛋白均降低了E2蛋白对启动子活性的抑制作用.位于E2蛋白转录激活区（nt 3037）,铰链区（nt 3387）及DNA结合区（nt 3697）的点突变明显影响了其转录抑制功能.结论 HPV2 E2蛋白的转录调节功能与其转录激活区以及DNA结合区密切相关.HPV2突变株上的不同的E2的单个突变点能够明显降低E2蛋白对启动子活性的抑制作用.
- 高晨雷艳君姜慧英石琦田婵韩俊董小平
- 关键词：病毒蛋白质类突变
- 中国2010年克-雅病监测病例特征分析被引量：2
- 2011年
- 目的了解中国(未包括香港、澳门和台湾地区,下同)克-雅病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)的发病情况、流行病学及临床特征。方法对2010年中国CJD监测网络获得的可疑CJD病例的临床及流行病学资料进行分析,收集患者脑脊液及血液样品,利用Western blot方法检测脑组织中PrPSc蛋白及脑脊液中14-3-3蛋白,提取全血基因组DNA并利用PCR及测序方法对PRNP基因进行129位多态性及基因突变的分析。结果共发现散发型CJD确定诊断病例1例,临床诊断病例46例,疑似诊断病例25例,致死性家族型失眠症病例3例及家族型CJD病例5例(包括R208H、P102L各1例及3例T188K突变)。病例报告无季节聚集性,长久居住地呈散在分布,职业分布广泛。临床诊断病例平均年龄为62岁,男女性别比为1.30∶1;疑似诊断病例平均年龄为57岁,男女性别比为2.14∶1。快速进行性痴呆为最常见的首发症状,占全部诊断病例的54.93%。临床诊断病例比疑似诊断病例出现更多的典型临床表现。结论 2010年中国监测到的CJD病例主要以散发型为主,病例的报告时间、长久居住地分布、职业分布、性别比例以及年龄分布均符合散发型CJD的特点。
- 陈操石琦周伟张宝云高晨田婵韩俊董小平
- 关键词：克-雅病
- 2019年冬季青岛市手足口病患者感染柯萨奇病毒A组16型基因特征分析被引量：2
- 2022年
- 目的 调查2019年冬季青岛市妇幼医院和中心医院手足口病(HFMD)住院患儿病原感染情况,分析柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)基因进化特征。方法 收集2019年冬季青岛地区HFMD住院患儿104份咽拭子,采用实时荧光定量PCR进行肠道病毒核酸检测。使用肠道病毒通用分型引物扩增阳性样本,扩增序列测序后进行Blast比对。设计Cox A16 VP1全长引物,通过半巢式PCR扩增测序,使用DNAStar进行核苷酸和氨基酸的基因分析,使用MEGA软件构建进化树。结果 HFMD住院患儿的咽拭子样本肠道病毒总体阳性率为57.7%(60/104)。其中Cox A16阳性率为30.8%(32/104),Cox A6阳性率为26.9%(28/104)。对32份Cox A16阳性的样本进行VP1区全长扩增、测序并进行比对和同源性分析,其核苷酸同源性为87.0%~100%,氨基酸同源性为98.3%~100%。系统进化分析表明,32株Cox A16中有17株为Cox A16 B1a基因型,另外15株为Cox A16 B1b基因型。结论 引起2019年冬季青岛地区住院HFMD的病原体之一是Cox A16,且同时流行Cox A16的B1a和B1b型。
- 姜法春赵超董鸿铭贾静王霞王衍海高晨韩俊
- 关键词：手足口病肠道病毒柯萨奇病毒A组16型基因特征
- 羊瘙痒病小鼠适应株ME7可突破种属屏障颅内感染金黄地鼠被引量：1
- 2003年
- 目的 羊瘙痒病感染因子在哺乳动物种属间的传播认为受种属屏障的限制 ,研究羊瘙痒病小鼠适应株ME7在仓鼠中的发病特征。方法 ME7毒株颅内接种至金黄地鼠 ,观测疾病发生的潜伏期、临床病程和主要症状 ;Westernblot和电子显微镜动态观测脑组织中PrPSc和痒病相关纤维的出现和分子特征。结果 与以往报道的金黄地鼠适应株 2 6 3K和小鼠适应株 139A不同 ,在接种后 4 6 0～ 5 30d后 ,感染动物出现明显的症状 ,主要为消瘦、嗜睡、运动迟缓 ;感染动物脑组织中存在有羊瘙痒病相关纤维和PrP -res;羊瘙痒病相关纤维和PrP -res的出现明显早于临床发病 ;比较三种毒株在仓鼠和小鼠脑组织中出现的PrP -res发现虽然在电泳移动位置上无差异 ,但ME7和 139A的无糖分子比例明显降低。结论 小鼠适应株ME7可突破种属屏障感染金黄地鼠 ;不同毒株在潜伏期、主要临床症状和临床病程等方面有明显差异 ;PrP -res的形成不仅受接种毒株的影响 。
- 张瑾张宝云高建梅高晨周晓勃刘勇董小平
- 关键词：羊瘙痒病小鼠颅内感染
- 链霉素沉淀法增加异常朊蛋白（PrP<Sup>Sc</Sup>）在免疫蛋白印迹（Western blot）检测的敏感性
- 本发明名称：链霉素沉淀法增加异常朊蛋白(PrP<Sup>Sc</Sup>)在免疫蛋白印迹(Western blot)检测的敏感性。所属的技术领域：传染病诊断与研究。所要解决的技术问题：当病人或动物的组织器官及体液中存在少...
- 董小平韩俊高晨石琦田蝉
- 文献传递
- 微管相关蛋白tau与朊蛋白的相互作用被引量：6
- 2006年
- 微管相关蛋白tau参与了许多神经退行性疾病的发生, 其中包括一些人类可传播性海绵状脑病. 为了探讨tau与朊蛋白（PrP）之间可能存在的关系, 首先通过GST pull-down和免疫共沉淀等技术发现重组tau蛋白可通过微管结合区与来源于正常叙利亚仓鼠脑组织中的正常细胞膜朊蛋白（PrP^C）和羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织的异常朊蛋白（PrP^Sc）相结合. 利用免疫共沉淀实验发现在正常和羊瘙痒因子感染的仓鼠脑组织中存在tau蛋白与PrP^C和PrP^Sc的相互作用, 并且利用激光共聚焦方法检测到PrP和tau蛋白在CHO细胞内具有共定位的关系. 为了确定PrP与tau蛋白相互作用的部位, 构建了不同区域的PrP片段, 从而证明PrP与tau蛋白相互作用的区域位于PrP的N端序列（23～91 aa）. PrP与tau蛋白分子间相互作用的直接实验证据提示tau蛋白可能参与PrP的正常生理功能以及朊病毒病的病理过程.
- 韩俊张瑾姚海兰王小凡李锋高晨周伟张宝云董小平
- 关键词：朊蛋白蛋白相互作用
- 中国临床诊断克雅氏病人脑脊液中tau蛋白浓度诊断价值的研究
- 克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)是一种由朊病毒引起的致死性快速进行性神经退行性疾病,到目前为止,确诊需进行脑组织活检或尸检。脑脊液(CSF)与大脑细胞外空间接触最为紧密,因此大脑的生...
- 王桂荣高晨石琪周伟陈建明董辰方石崧王新韦艳姜慧英韩俊董小平
- 关键词：克雅氏病TAUCSFELISA
- 文献传递
