陈漉
- 作品数：24 被引量：56H指数：4
- 供职机构：长春中医药大学附属医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省科技厅科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 抗肿瘤双特异免疫导向治疗制剂CAtin的表达及活性分析被引量：7
- 2009年
- 结合生物信息学方法与已知癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)特异性单链抗体(Single chainFv fragment,scFv)核苷酸序列,经分子设计和密码子优化后,通过化学方法合成CEA二硫键稳定性单链抗体(Disulfide stabilized single chain Fv fragments,scdsFv)基因片段.将凋亡素基因(Apoptin)通过一段柔性连接肽(Linker)连接在CEA scdsFv基因下游,并克隆入大肠杆菌表达载体质粒pET28a,转化BL21感受态菌后经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导,表达融合蛋白CAtin.SDS-PAGE和Western-Blot分析表明,目的蛋白得到良好表达,经条件优化后表达量最高可达44.1 mg/L.融合蛋白经分步洗涤法和谷胱甘肽对表达的目的蛋白进行初步纯化和复性后,利用人肝癌细胞(HCC)对所制备融合蛋白进行亲和力测定、细胞结合活性测定和特异性细胞杀伤活性分析.结果显示,所制备融合蛋白不仅能够有效地与上述肿瘤细胞结合,并对其具有明显的杀伤活性,表明成功制备了具有特异性识别和特异性杀伤活性的双特异抗肿瘤免疫导向制剂.
- 李霄金宁一李昌田明尧陈漉贾鹏刘立明刘妍高鹏
- 关键词：癌胚抗原凋亡素基因原核表达
- 喘息康对支气管哮喘豚鼠肺泡灌洗液IFN-γ、IL-5水平及肺组织MMP-9、TIMP-1的影响被引量：8
- 2008年
- 目的:研究喘息康对哮喘豚鼠模型肺泡灌洗液(BALF)中IFN-γ、IL-5及肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与其抑制剂(TIMP-1)的影响,探讨其治疗支气管哮喘的作用机制。方法:将40只豚鼠随机分组为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、喘息康中药组(C组)、地塞米松西药组(D组),每组10只。采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立豚鼠支气管哮喘模型,然后以不同的方法对哮喘豚鼠模型进行干预。采用ELISA方法检测每只豚鼠BALF中IFN-γ、IL-5和肺组织中MMP-9、TIMP-1的变化。结果:哮喘模型组与正常对照组相比,前者BALF中IFN-γ水平显著降低(P<0.01),而IL-5则显著升高(P<0.01),肺组织中MMP-9、TIMP-1含量及比值显著升高(P<0.05～0.01);喘息康中药组和地塞米松西药组与模型组相比,BALF中IFN-γ水平高于哮喘模型组(P<0.01),而IL-5则显著降低(P<0.01),肺组织中MMP-9、TIMP-1含量及比值显著降低(P<0.05～0.01)。结论:喘息康可以通过促进哮喘豚鼠体内IFN-γ分泌和抑制IL-5表达,而降低支气管高反应性(BHR);并可通过降低肺组织MMP-9和TIMP-1含量,调节二者比值,抑制支气管哮喘豚鼠气道重塑。
- 王晓岩迟宝荣陈漉
- 关键词：干扰素-Γ白细胞介素-5基质金属蛋白酶组织抑制剂-1
- 基于SFVRNA复制子核酸疫苗pIRSFV-HN的构建及其体内外抑瘤作用被引量：4
- 2008年
- 目的:构建基于塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN,并探讨其体内外的抑瘤作用。方法:基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因构建核酸疫苗pIRSFV-HN,pIRSFV-HN转染人结肠癌细胞HCT-116,以Western blotting检测转染后HCT-116细胞HN的表达水平,以AO/EB双荧光染色检测肿瘤细胞的凋亡,以MTT法检测疫苗对HCT-116细胞增殖的抑制。构建C57BL/6小鼠右后肢皮下荷H22腹水瘤细胞模型,瘤体内注射pIRSFV-HN(共3次),检测该小鼠血清IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ水平和特异性CTL活性。结果:成功构建基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN。结肠癌细胞HCT-116被疫苗转染后可有效表达HN蛋白,对照细胞则无表达;转染后HCT-116细胞出现凋亡的征象;该细胞的增殖受到明显抑制,最大抑制率达55.34%。移植瘤体内注射疫苗后,荷瘤小鼠血清IL-2、IFN-γ水平显著升高(P<0.05),其CTL活性也显著升高(P<0.01)。结论:基于SFVRNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN在体外可有效地抑制肿瘤细胞;在体内可促使免疫趋向Th1优势,提高其抑瘤免疫水平。
- 张钰金宁一李霄朱继红陈漉刘立明李昌佟敬山李群陈勇志
- 关键词：新城疫病毒核酸疫苗抑瘤作用细胞毒性T淋巴细胞
- PTEN与消化道肿瘤关系的研究进展被引量：2
- 2007年
- PTEN/MMAC1/TEP1基因及其蛋白表达与一些恶性肿瘤发生发展、生物学行为和预后有密切关系,是迄今第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,也是继p53基因后发现的人类肿瘤中最常发生突变的抑癌基因。PTEN在消化道肿瘤中的表达率各有高低,本文作者主要就其基因变异及蛋白表达等方面的研究进行综述。
- 陈漉权铁刚迟宝荣
- 关键词：基因肿瘤抑制PTEN消化系统肿瘤
- 腰椎间盘突出症合并马尾神经损伤16例临床分析被引量：1
- 2006年
- 陆蕴松陈漉李治罡
- 关键词：腰椎间盘突出症马尾神经损伤并发症
- 温阳益气法在乳腺癌术后患侧上肢肿胀治疗中的应用被引量：4
- 2016年
- 目的探讨温阳益气法在乳腺癌术后患侧上肢肿胀治疗中的应用效果。方法选取我院就诊的乳腺癌术后患侧上肢肿胀的66例患者的临床资料进行回顾分析。患者随机分为对照组和观察组,各33例,术后对照组给予常规西药治疗,观察组33例给予温阳益气法治疗,比较两组患者治疗效果。结果观察组上肢肿胀程度显著轻于对照组。对照组与观察组治疗率分别为72.7%,97.0%,组间比较差异显著(P<0.05)。结论乳腺癌患者术后运用温阳益气法治疗可有效缓解患侧上肢肿胀情况。
- 陈漉
- 关键词：乳腺癌温阳益气法上肢肿胀疗效
- 含Apoptin基因重组腺病毒的构建及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:构建携凋亡素(Apoptin)基因重组腺病毒,为进一步研究Apoptin基因抗肿瘤作用分子机制建立基础.方法:利用BamHⅠ和SpeⅠ双酶切质粒pVAX1-Apoptin,获得Apoptin片段并连接入pacAd5 CMV K-N pA,构建含Apoptin基因的穿梭质粒pacAd5-Apoptin.利用PacⅠ单酶切对pacAd5-Apoptin和腺病毒基因组质粒(pAd5)进行线性化处理后应用脂质体介导法共转染AAV-293细胞,分别利用蚀斑纯化和RT-PCR、Western blot等方法对重组病毒进行筛选和鉴定,并测定所获得重组病毒的滴度.结果:所构建重组腺病毒中的Apoptin基因得到了正确转录,表达产物的相对分子质量约为13kDa,与CVA阳性对照一致;所获得重组腺病毒可有效表达Apoptin蛋白,该蛋白与CAV阳性血清具有反应原性,重组病毒滴度为1011PFU/L.结论:成功构建含Apoptin基因的重组腺病毒,所获得重组病毒的滴度可以满足体内外实验要求.
- 陈漉金宁一李霄刘立明贾鹏刘妍高鹏陆蕴松迟宝荣
- 关键词：腺病毒载体逆转免疫印迹法
- 特异性抗肿瘤重组腺病毒抑癌作用研究
- 为更好的研究重组腺病毒抗肿瘤制剂在临床应用过程中存在的安全性和有效性,本研究利用分子生物学、病毒学和免疫学等技术和手段,通过同源重组方法构建了分别含有特异性抑癌基因HN、Apoptin的特异性抗肿瘤重组腺病毒;同时构建了...
- 陈漉
- 关键词：HN基因重组腺病毒抗肿瘤
- 文献传递
- 补肺益肾活血法对慢性低氧性肺动脉高压大鼠血管活性物质的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨补肺益肾活血法治疗肺动脉高压的作用机制。方法取健康SD大鼠40只,随机分为空白对照组、模型组、中药芪葶合剂组、卡托普利组。各组动物在同等条件下饲养,将后3组大鼠放入常压缺氧箱内缺氧造模4w,各组分别用等量生理盐水、芪葶合剂及卡托普利溶液灌胃。4w之后用右心导管法检测大鼠肺动脉平均压(mPAP)、颈动脉平均压(mCAP);用放免法检测内皮素(ET-1)、血栓素(TXB2)。结果芪葶合剂组、卡托普利组与模型组比较肺动脉平均压降低,而颈动脉平均压则无明显变化。芪葶合剂组、卡托普利组肺组织中ET-1和TXB2水平下降(P<0.05或P<0.01)。结论芪葶合剂能降低肺组织中ET-1和TXB2含量,改善肺动脉高压。
- 王晓岩王孝成陈漉纪辉迟宝荣
- 关键词：慢性低氧性肺动脉高压内皮素1血栓素B2
- 一种鸡痘病毒载体穿梭质粒及其应用
- 本发明提供了一种鸡痘病毒载体穿梭质粒pTGP3，其包括：重组臂TKL和TKR、双向启动子PE/L、荧光蛋白表达盒、抗性标记基因和复制起点ori，在所述双向启动子PE/L上下游分别具有多克隆位点MCSL和MCSR、在所述荧...
- 金宁一李霄李昌鲁会军田明尧金扩世陈漉刘妍高鹏杨恩成
