贺立香 作品数:26 被引量:87 H指数:4 供职机构: 首都医科大学附属北京佑安医院 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 首都医学发展科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
原位RT-PCR法测定SARS患者肺组织中的病毒核酸 2003年 目的 观察严重急性呼吸综合征 (SARS)患者肺组织中SARS病毒核酸的定位和分布。方法 采用原位逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术对 3例SARS死亡患者肺组织进行病毒核酸测定。以固定在载玻片上的肺组织为靶细胞 ,直接掺入地高辛素 dNTP标记物进行PCR扩增 ,并观察病毒核酸阳性物质。结果 检测 3例尸解肺组织 ,其中 2例可见SARS病毒核酸阳性信号。阳性物质表现为蓝紫色颗粒状物 ,分布于细胞核或细胞浆内。在肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞及单个核细胞中均可观察到该病毒核酸物质。肺组织病理改变明显 ,表现为出血、渗出 ,炎性浸润等改变。结论 在肺组织中检出SARS病毒核酸物质 ,并与病理改变并存 ,为本病的病原学诊断提供直接证据。 黄德庄 郎振为 温韬 贺立香 谢立 周育森关键词:SARS 肺组织 病毒核酸 丁型肝炎病毒抗原的表达纯化和抗原性分析 被引量:2 2005年 Amplified HDV fragment by RT-PCR was cloned into T vector and PQE_{31} plasmid, which established a prokaryotic expression vector in E coli M_{15} The recombinant protein was purified by Ni-NTA column affinity chromatography, and identified by Western blot and ELISA: HDV antigen was expressed efficiently and had a well antigenicity character. It can be used in HDV clinical diagnosis and epidemiology survey. 谢立 黄德庄 贺立香 罗朝霞 周育森关键词:丁型肝炎病毒 基因克隆和表达 组织原位杂交法研究输血传播病毒的致病性 被引量:3 2001年 目的 根据肝组织中TT病毒 (TTV)感染和复制状况探讨病毒的致病性。方法 以重组质粒为模板、地高辛素为标记物、对称和不对称PCR法分别标记TTV双链探针和 2条单链探针。原位杂交检测 5 6例肝组织 ,其中 6例TTV阳性者分别做单链探针杂交。结果 5 1例非甲~非庚型肝炎肝组织中TTV阳性率 2 7 5 % (14/5 1)。对照组 5例杂交阴性。TTVDNA主要见于肝细胞核内 ,受染细胞的病变和坏死不十分明显 ;在急性、慢性和重症肝炎及肝硬化组织中均有检出。用单链探针检测病毒基因链的结果与双链探针杂交结果一致 ,杂交信号强度相仿 ;2例肝组织TTV基因链与互补链同时存在 ,信号强度较弱。结论 TTV可能导致肝损伤 ,并在肝脏内有复制 ; 阎惠平 郎振为 黄德庄 周育森 金荣华 罗朝霞 贺立香 王海涛关键词:输血 病毒传播 TT病毒感染 HBV感染者血清IL-12、IFN-γ水平变化及其临床意义探讨 被引量:1 2003年 目的:测定HBV感染者血清IL-12、IFN-γ水平变化,探讨它们与感染者不同临床类型及病变发展的关系。方法:采用酶联免疫方法(ELISA)检测120例HBV感染者的血清IL-12、IFN-γ水平。结果:HBV感染者血清IL-12、IFN-γ水平明显增高,与正常对照组相比差异十分显著(P<0.01);在HBV感染者中,急性乙肝患者IL-12、IFN-γ水平明显高于慢性乙肝患者和HBsAg携带者,差异有显著性(P<0.05)。随着HBV感染者ALT的异常增高,IL-12、IFN-γ亦呈现增高趋势,并有一定的相关性.结论:IL-12、IFN-γ可能参与机体对HBV感染的免疫应答和肝脏的爽性损伤过程,并对肝病慢性化发展可能有重要影响作用。 温韬 黄德庄 贺立香 谢立关键词:IL-12 IFN-Γ HBV感染 血清 ALT 自身免疫性肝病自身抗体及临床特点研究 闫惠平 刘燕敏 张世斌 贺立香 赵春惠 郎振为 孔淑玲 汪俊韬 项目名称:自身免疫性肝病(AILD)自身抗体及临床特点研究 属医学内科学,适用于肝脏疾病的诊断治疗和病毒性肝炎的鉴别诊断。 本研究针对以往许多自身免疫性肝病(AILD)患者以传染病收治,不能得到及时、正确的诊断治疗,以及...关键词:关键词:自身免疫性肝病 自身抗体 肝病诊断 肝病门诊患者的HIV抗体初筛分析 周冬燕 贺立香 闫惠平丙型肝炎病毒单克隆抗体的制备及其鉴定 被引量:3 2005年 目的押以基因工程表达的丙型肝炎病毒抗原蛋白(HCAg)为抗原,建立分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的McAb进行鉴定。方法:用纯化HCV基因工程表达抗原(HCAg)免疫Balb/c小鼠,取脾细胞及骨髓瘤细胞按常规方法融合、筛选、克隆化及腹水注射制备McAb。采用ELISA及分片断鉴定技术进行鉴定。结果押筛选出5株能稳定分泌特异性抗-HC的McAb杂交瘤细胞株,经多次复苏传代仍能稳定分泌抗体,特异性强,效价高。与不同抗原蛋白的ELISA反应呈特异性阳性反应。分片断鉴定结果显示,所获5株McAb主要为抗HCV核心蛋白和非结构蛋白NS3。结论:此5株丙肝杂交瘤细胞株分泌的抗体对丙肝抗原具有特异亲和性,为丙型肝炎病毒抗原诊断试剂的研制提供了关键技术基础。 谢立 陈万荣 张明程 黄德庄 贺立香关键词:丙型肝炎病毒 病毒感染 单克隆抗体 结构蛋白 血清丙型肝炎病毒抗原的免疫酶斑点法检测 被引量:2 2006年 目的建立一种可筛查早期HCV感染者的简单快捷方法。方法制备特异性的抗HCV核心蛋白和抗HCVNS3的单克隆抗体(mAb)酶标记物,应用免疫酶斑点法检测各种类型肝炎患者和正常人血清中的HCV-Ag,并与双抗体夹心ELISA检测HCV-Ag及RT-PCR检测HCVRNA的结果进行比较。结果免疫酶斑点法检测表明,HCV-Ag的检出率在抗HCV抗体阳性、乙肝和非甲非戊肝炎患者中,分别为15.4%(8/52)、1.73%(19/1099)和1.03%(1/97);在81例甲肝和67例戊肝患者及50例正常人中均未检出。免疫酶斑点法与双抗体夹心ELISA及RT-PCR的检测的结果没有显著性差异,但其与RT-PCR检测结果有一定的相关性。结论免疫酶斑点法特异性强,操作简便快捷,不需要特殊仪器设备,为HCV的早期诊断和常规筛查提供了有效的方法。 时红波 谢立 黄德庄 贺立香关键词:丙型肝炎病毒 免疫酶斑点法 抗原 单克隆抗体 PCR产物固相杂交酶联显色观察白细胞介素-2联合干扰素-α治疗慢性丙型肝炎疗效 2004年 目的 建立一步法基因扩增产物固相杂交酶联免疫吸附方法并用于临床观察白细胞介素 2 (IL 2 )联合干扰素 α(IFN α)治疗慢性丙型肝炎的疗效。方法 7例患者中有 4例患者接受IL 2和IFN α联合治疗 ,其中 2例为IFN α单独或联合抗病毒药物治疗后复发者 ,未接受过抗病毒药物治疗者 2例 ,疗程为一年。余下的 3例患者为单独使用IFN α治疗者。同时采用一步法基因扩增产物固相杂交酶联免疫吸附方法检测血清丙型肝炎病毒核酸 (HCVRNA)滴度评价疗效。结果 IL 2联合干扰素治疗对干扰素治疗后复发者仍有效 ,完全应答率为 10 0 % ;对未接受过抗病毒药物治疗者也有效 ,完全应答率为 5 0 %。结论 白细胞介素 2联合干扰素可作为初次治疗及复发后再治疗的选择方案。而一步法基因扩增产物固相杂交酶联显色检测血清HCV RNA滴度的方法可快速、特异、灵敏地反应出治疗过程中HCV RNA量的变化 ,为临床治疗提供可靠的疗效判定指标。 王芳 郭雁宾 黄德庄 王风水 贺立香关键词:慢性丙型肝炎 基因扩增 分子杂交法研究肝炎病人血清和肝组织中输血传播病毒 被引量:5 2001年 目的 对各型肝炎病人血清和肝组织中输血传播病毒 (TTV)核酸检测分析 ,探讨病毒的致病性。方法 以地高辛为标记物制备TTVDNA探针 ,斑点杂交法、原位杂交法分别检测血清中及肝组织中TTVDNA。结果 检测 10 3例血清 ,TTV总阳性率为 2 5 2 4% (2 6 /10 3) ;甲~戊型肝炎组检出率 2 1 81% (12 /5 5 )、非甲~非庚型肝炎患者检出率 47 37% (9/19) ,显著高于正常对照组 15 % (3/2 0 )。临床可见TTV的单独感染和重叠感染 ;出现急性、慢性甚至重度肝损伤。 12例肝组织可见TTV阳性 ,阳性颗粒主要见于肝细胞核内。结论 从血清和肝组织证实了TTV的存在 。 阎惠平 周育森 郎振为 黄德庄 金荣华 罗朝霞 贺立香 王海涛关键词:TTV 核酸探针