祝联 作品数:51 被引量:316 H指数:9 供职机构: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 上海市卫生局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
重组hBMP7基因转染成纤维细胞及其表达 被引量:1 2004年 目的 探讨重组骨形态发生蛋白-7腺病毒载体(AdCMV-BMP7)在人真皮成纤维细胞获得稳定表达的可行性。方法重组腺病毒载体AdCMV-BMP7经293细胞包装、扩增后,转染人真皮成纤维细胞。转染48 h后以免疫组织化学、RT-PCR等方法检测hBMP7基因在人真皮成纤维细胞内的表达情况。结果 在合适的滴度下,重组腺病毒载体AdCMV-BMP7对成纤维细胞的增殖能力无明显影响。转染48 h后免疫细胞化学显示已转染AdCMV-BMP7的成纤维细胞内有大量的hBMP7表达,RT-PCR也检测到特异的hBMP7基因片段的表达。结论 重组腺病毒载体AdCMV-BMP7能够被转导入成纤维细胞内,并稳定表达hBMP7。 陈付国 祝联 刘德莉 魏娴 刘天一 王敏 柴岗 王晓云 周广东 夏万尧 崔磊 刘伟 曹谊林关键词:骨形态发生蛋白-7 腺病毒 转基因技术 成纤维细胞 RT-PCR BMP7腺病毒基因转染对骨髓基质干细胞生物学的影响 被引量:1 2005年 目的探讨BMP7腺病毒基因转染对骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外、体内的生物学功能影响。方法抽取羊的骨髓,分离、培养骨髓基质干细胞。用重组骨形成蛋白7腺病毒(adenovirus bone morphogenetic protein 7;Adeno-BMP7)转染(M.O.I=100)70%-80%融合时的第二代细胞,三天后分别进行透射电镜观察、流式细胞仪检测、Western-blot、钙结节染色以及珊瑚和细胞复合物皮下回植。结果在体外:细胞超微结构观察显示Adeno-BMP7基因转染后的BMSCs的物质合成代谢功能活跃;流式细胞仪检测表明Adeno-BMP7基因转染对BMSCs的细胞周期无明显影响;Western-blot检测证明转染Adeno-BMP7后的BMSCs有BMP7在蛋白水平上的表达;染色表明转染Adeno-BMP7后的BMSCs可形成较大的钙结节。在体内:转染Adeno-BMP7的BMSCs可明显促进新骨的形成,与没转染Adeno-BMP7的BMSCs有差异。结论Adeno-BMP7转染可促进BMSCs的体外成骨定向分化,Adeno-BMP7转染后的BMSCs具有更强的体内成骨能力。 祝联 周广东 陈付国 刘德莉 崔磊 刘伟 曹谊林关键词:重组腺病毒 骨形成蛋白7 骨髓基质干细胞 游离背阔肌肌皮瓣移植修复头皮恶性肿瘤切除后的复杂创面 被引量:2 2009年 目的修复头皮恶性肿瘤切除后的复杂创面,尤其是伴有部分颅骨缺损,甚至部分硬脑膜缺损的创面。方法应用游离背阔肌肌皮瓣,修复17例头皮恶性肿瘤切除后的创面(〉200cm2)。结果17例皮瓣全部存活,1例皮瓣下局部感染,经换药后愈合。9例术后4周开始放疗。17例均未要求颅骨修补。随访6—25个月,4例肿瘤复发,其中3例死亡;1例肺转移;12例无瘤生存。结论游离背阔肌肌皮瓣是修复头皮恶性肿瘤切除后复杂创面的理想选择之一。 徐华 董佳生 祝联 王露萍 常利民关键词:头颈部肿瘤 修复外科手术 外科皮瓣 自体骨髓间充质干细胞复合β-磷酸三钙修复犬下颌骨节段缺损 被引量:6 2006年 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合β-磷酸三钙(β-TCP)构建的组织工程骨修复犬下颌骨节段缺损的可行性方法体外成骨诱导犬BMSCs,将第2代细胞复合β- TCP后修复6只犬右侧3cm的下颌骨节段缺损;6只犬以单纯β-TCP植入作为对照,术后4,12,26,32周分别通过影像学、大体形态、组织学和生物力学检测判断骨缺损的修复效果。结果诱导后第2代细胞已具成骨活性。4~26周X线片示实验组新骨形成增加,密度增高,对照组则材料吸收形成明显阴影区,只有少量骨痂。32周实验组骨愈合良好,有较多板层骨;对照组为纤维性愈合骨不连,骨密度检测实验组显著高于对照组。实验组力学强度与正常下颌骨差异无统计学意义。结论自体成骨诱导BMSCs复合β-TCP形成的织工程骨可良好修复犬下颌骨节段缺损。 袁捷 祝联 刘广鹏 许锋 翁雨来 崔磊 刘伟 曹谊林关键词:下颌损伤 骨髓基质干细胞 Β-磷酸三钙 病毒介导的基因转染在组织工程中的应用 2004年 目的 构建重组病毒载体,将较多细胞因子通过病毒载体转入种子细胞,提高细胞增殖及分泌基质能力,维持表型,延缓老化。方法 应用基因工程技术,构建缺陷型逆转录病毒重组载体和缺陷性腺病毒重组载体。分别通过PT67包装细胞筛选克隆及293细胞扩增,获得假病毒上清液,经浓缩纯化后转染靶细胞。结果 成功构建胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、Fas配体(Fas-Ligand)、绿色荧光蛋白(GFP)等逆转录病毒载体以及TGFβ1、人骨形成蛋白因子-7(hBMP7)、端粒酶、Smad3、Smad7等腺病毒载体,其中GFP-逆转录病毒重组载体在软骨细胞表达至2月。结论 通过有效的含目的基因重组载体转染种子细胞,延缓体外培养细胞的老化及促进细胞的增殖与基质分泌,获得组织工程所需要的大量种子细胞,为组织工程构建奠定了基础。 刘德莉 刘方军 吴娟娟 胡晓洁 祝联 刘伟 崔磊 曹谊林关键词:基因转染 逆转录病毒载体 腺病毒载体 种子细胞 基因工程技术 穿支皮瓣血供基础的实验研究与临床应用研究 董佳生 戴传昌 王毅敏 祝联 王涛 冯瑞铮 徐华 常利民 王露萍 本课题完善了腹壁下动脉穿支(DIEP)皮瓣的血供和感觉神经的系统解剖学研究,为重建带感觉的乳房打下基础,在国内建立了首个穿支皮瓣的动物模型,发现单一穿支与多穿支皮瓣的区别,并在此基础上完成了相关药物对穿支皮瓣成活率影响的...关键词:关键词:穿支皮瓣 骨髓基质干细胞体外复合珊瑚材料的生长和成骨活性 被引量:9 2006年 目的尝试以骨髓基质干细胞(BoneMarrowStromalCells,BMSCs)作为种子细胞,复合珊瑚体外培养,以发现适宜的细胞接种密度以及复合物体外共培养时间。方法分离犬BMSCs,成骨诱导后复合珊瑚继续培养,以无诱导BMSCs复合物为对照。进行黏附率、生长曲线、扫描电镜、碱性磷酸酶(AKP)和骨钙蛋白(OCN)生物化学定量检测。结果AKP和OCN检测均显示成骨诱导BMSCs-材料组显著高于无诱导BMSCs-材料组。复合物接种密度超过1.5×107/cm3时,黏附率显著下降;生长曲线示7天后BMSCs在材料上生长进入平台期,电镜示诱导BMSCs复合珊瑚7天后生长良好,且OCN从第7天开始表达。结论诱导BMSCs-珊瑚复合物成骨活性高于无诱导细胞-材料复合物。复合物接种密度1.5×107/cm3,体外共培养7天较适宜。 袁捷 刘广鹏 刘广鹏 祝联 翁雨来 许锋 刘伟 翁雨来关键词:骨髓基质干细胞 体外共培养 MARROW STROMAL 骨钙蛋白 骨螺钉设计、生物力学测试及临床应用研究 被引量:6 1998年 考虑骨皮质材料比金属材料弹性模量低,设计出具有大角度螺纹(α=45°,β=5°)的方头骨螺钉,并按金属松质骨螺钉浅螺纹角(α=35°,β=3°)制成一字槽骨螺钉。在牛股骨远端旋入两类骨螺钉,进行生物力学测试,结果表明:方头骨螺钉优于一字槽骨螺钉。使用方头骨螺钉手术治疗10例,随访4~12月,功能恢复良好,骨折片术后无移位,无并发无菌性炎症。说明设计制作的方头骨螺钉是关节内骨折有效的内固定物。 祝联 徐耀增 杨同其 包肇华关键词:骨螺钉 生物力学 关节内骨折 生物降解 全文增补中 股外侧肌疝一例 2016年 一、病例介绍
患者女,47岁,20年前外伤致右跟腱断裂,于当地医院取右大腿阔筋膜进行修补。术后右大腿逐渐出现局部包块,无明显疼痛,直立行走时增大,平卧后变小,移动度好,可向内推移,下肢无运动、感觉障碍。患者长期以来未就诊,但终因对右大腿外形不满意,于2015年6月就诊要求改善。体格检查:有大腿外侧可见约6cm直线瘢痕,站立时右大腿外侧可见14cm×9cm突起包块,触之表面光滑,质地柔软,移动度好,无压痛,听诊器听诊未闻及血管杂音,右髋屈曲放松后包块变小(图1)。 刘政军 祝联 赵天兰关键词:股外侧 肌疝 右大腿 跟腱断裂 体格检查 口内斜形弧线下颌骨截骨术改善下面部轮廓 被引量:1 2006年 目的为探寻更精细的下面部轮廓整形方法。方法根据术前X线评估结果及与受术者充分讨论,对52例求美者进行口内斜形弧线截骨方法,15例同期进行颧骨整形,26例同时施行了咬肌部分切除,14例同时施行了颊脂垫切除,8例同时进行隆颏手术。结果52例中40例表示非常满意,11例满意,1例截骨稍过度,觉得效果较差。非常满意的受术者表示下面部宽度变窄,不论从正面、侧面都具备了一个优美精致的轮廓线,达到了术前的期望值。结论使用口内斜形弧线截骨方法可使下面部轮廓不管是在正面上还是在侧面上都能得到理想的效果,而且操作较简单、切口隐蔽。 戴传昌 王碧菠 祁佐良 董佳生 王毅敏 祝联 王炜关键词:面部轮廓 受术者 部分切除 颊脂垫