王永俊
- 作品数：14 被引量：48H指数：5
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学建筑科学更多>>
- RNAi下调survivin表达诱导成人神经细胞瘤细胞凋亡被引量：6
- 2006年
- 目的利用RNA干扰技术下调凋亡抑制因子survivin在人成神经细胞瘤细胞系SH-SY5Y中的表达,并评价其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法将设计合成的寡核苷酸片段退火后连入pBSHH1构建survivin的短发夹RNA表达质粒pBSHH1-survivin;通过RT-PCR和Western印迹评价其对SH-SY5Y细胞内源性survivin表达的抑制作用;运用Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及AnnexinFITC染色检测survivin表达下调对SH-SY5Y细胞凋亡的影响。结果酶切和DNA测序证实survivin的短发夹RNA表达质粒构建成功;RT-PCR和Western印迹表明质粒转染SH-SY5Y细胞后能明显下调survivin的表达;Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及AnnexinⅤFITC染色显示下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡。结论成功构建了有效针对survivin的短发夹RNA表达质粒;下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡。
- 王永俊施小六汤建光胡治平薛志刚夏昆
- 关键词：成神经细胞瘤RNA干扰SURVIVIN凋亡
- p53对STK11的转录调控研究被引量：2
- 2007年
- PJ综合征(Peutz-Jeghers syndrome)是一种常染色体显性遗传疾病.其致病基因所编码的蛋白质为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(STK11).STK11可以激活AMPK,p53等多条信号通路.文中在克隆了STK11的基本启动子区域基础上,用生物信息学分析预测该区域内可能存在p53结合位点和Sp1结合位点.EMSA结果证实了信息学分析的预测.Sp1结合位点核心碱基定点突变后,其PGL3重组突变体质粒萤光素酶活性下降1.9倍;p53结合位点核心碱基的定点突变后,PGL3重组突变体质粒萤光素酶活性下降14.6倍,均有统计学意义.利用内源表达STK11的L02细胞株,瞬时转染pcDNA3.1-myc-his-B(-)-p53,经Real-time PCR和Western blotting检测发现,p53过表达可以上调STK11的表达,因此p53对STK11的表达有正反馈调节放大作用.
- 姚茂金王永俊沈宏伟汤建光王向平周世权宁文锋汪斐施小六
- 关键词：STK11P53转录调控
- 一种罕见X染色体改变与X连锁综合征型耳聋的关系
- 2004年
- 目的 :对一X连锁综合征型耳聋家系进行进一步的遗传学研究 ,以探讨X染色体结构异常与这种综合征型耳聋的内在关系。方法 :用G常规显带、高分辨显带和荧光原位杂交技术对家系成员进行染色体结构和数目分析 ,同时利用X染色体上的遗传标记分析该家系成员的DNA等位片段数。结果 :两例先证者表型正常的母亲及外祖母均存在X(p2 2 pter)重复 ;FISH示先证者及其母亲的X染色体全被涂染 ;DXS710 8等位片段分析示先证者III 3有两个拷贝。结论 :该X连锁综合征型耳聋家系的异常X染色体源于Xp部分重复 。
- 王永俊施小六聂俊玮倪斌殷照初戴和平
- 关键词：X染色体耳聋家系先证者X连锁显带
- β-catenin和COX-2在大肠癌中的表达及临床意义被引量：6
- 2005年
- 目的探讨β-catenin和COX-2在大肠癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化技术检测153例大肠组织标本中β-catenin和COX-2的表达水平,并对其临床意义和相互关系进行统计学分析。结果β-catenin在细胞膜上的丢失与腺癌的分化程度、Dukes分期及淋巴结转移具有相关性(P<0.05);COX-2的过表达与腺癌的Dukes分期、淋巴结转移和浸润程度具有相关性(P<0.05);β-catenin的异位表达与COX-2的过表达没有相关性。结论细胞膜上β-catenin的表达减少在分化程度低、Dukes分期晚及有淋巴结转移的患者中更明显。COX-2的表达水平在Dukes分期晚、浸润程度及有淋巴结转移的患者中增高更明显。腺癌中β-catenin的异位表达可能不是COX-2过表达的主要原因。β-catenin和COX-2可能是Dukes分期和判断淋巴结转移风险的一个较好的指标。
- 周世权施小六陈森林莫烨王永俊李陈婕宁文峰姚茂金汪斐
- 关键词：Β-CATENINCOX-2大肠癌免疫组化
- 七年制医学诊断学教学的困惑与对策被引量：1
- 2006年
- 针对七年制医学诊断学教学中遇到的问题,采用多媒体及师生互动教学、双语教学、扩大英文书籍阅读量、PBL(Problem-basedlearning)模式教学等多种方法进行临床见习课的教学,使学生熟练地掌握了临床基本技能及手法。
- 王永俊蒋云生黄信刚施小六
- 关键词：师生互动双语教学临床见习课高等医学教育
- 丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶基因真核表达载体的构建及抑瘤功能研究
- 2007年
- PJ综合征（Peutz-Jeghers syndrome）是一种常染色体显性遗传疾病。临床表现以唇、颊黏膜、指（趾）黑色囊性斑、多发性胃肠息肉以及肿瘤易患性增加为特征。其疾病基因丝氨酸／苏氨酸激酶（STKⅡ／LKBⅠ）基因于1998年被克隆，基因所编码的STKⅡ／LKBⅠ蛋白在细胞内广泛表达，行使多种重要复杂的生理功能，参与细胞生命活动的调节。我们拟构建STKⅡ／LKBⅠ真核表达载体，将其转入STKⅡ／LKBⅠ表达阴性的官颈癌HeLa细胞中，筛选稳定表达的细胞单克隆，对其抑瘤功能进行初步研究。
- 姚茂金沈宏伟王永俊汪斐易鑫王向平汤建光施小六
- 关键词：基因真核表达载体苏氨酸蛋白激酶丝氨酸抑瘤常染色体显性遗传疾病HELA细胞
- LOH12CR1互作蛋白GPS2的筛选及鉴定被引量：1
- 2013年
- 12号染色体短臂杂合子缺失的现象存在于多种血液科肿瘤和实体瘤患者中,提示此区域中可能存在抑瘤基因,LOH12CR1是此区域中已鉴定的基因之一。为探讨LOH12CR1的生物学功能,首先采取酵母双杂交系统筛查其互作蛋白,鉴定到转录调控因子GPS2是其互作蛋白。进一步在HEK293细胞中运用免疫共沉淀方法证实GPS2与LOH12CR1在体内存在相互作用;免疫荧光共定位结果显示GPS2与LOH12CR1在细胞核内存在共定位信号。
- 王永俊王迎伟施小六林若蘅张文婷沈宏伟
- 关键词：酵母双杂交蛋白质相互作用免疫共沉淀
- Peutz-Jeghers综合征患者中STK11基因启动子区序列多态性分析被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨STK11基因启动子-1543～-1160区域序列变化与Peutz-Jeghers综合征(PJS)的关系。方法:采用PCR产物直接测序的方法,对15例PJS患者和42例正常个体的STK11基因启动子区进行序列分析。结果:发现STK11基因启动子区的1个新的单核苷酸多态性(SNP)位点(-1275)G/T;该位点GG,GT,TT这3种基因型在患者和正常对照者中的频率分布分别为53.3%,26.7%,20%和33.3%,64.3%,2.4%,PJS患者组GG基因型和TT基因型频率均高于正常对照组,而GT基因型低于正常对照组,差异有统计学意义(χ2=8.521,P<0.05)。结论:STK11基因(-1275)G/T是1个新的SNP,该SNP基因型与PJS发生的关系有待进一步研究。
- 易鑫姚茂金王永俊汤建光宁文锋王向平周世权李陈捷汪斐夏昆施小六
- 关键词：STK11基因启动子
- 散发性黑斑息肉综合征合并肠梗阻
- 2010年
- 患者女,21岁,湖南常德津市人.患者自述约在7岁时出现皮肤色斑,呈黑褐色,直径0.5 mm～3 mm,最先出现于唇黏膜,而后逐渐在手指及脚趾上出现,未予重视.患者在14岁时出现间歇性便秘症状,约每周排便1次,且偶有间歇性腹痛,位于脐周,呈阵发性隐痛,能忍受,可自行缓解,自觉腹痛与排便无关.16岁时,行结肠镜检查示结肠多发性息肉,为求进一步诊治,遂入湘雅二医院住院诊治.入院后行全消化道胶囊内镜检查发现其胃内可见数十个大小不等的息肉,小的直径约为0.3 cm,大的直径3 cm～4 cm,多呈圆形,部分有分叶,表面充血肿胀;十二指肠内可见多发性小息肉,直径约0.3 cm～0.6 cm空肠上段可见一直径约2.5 cm的圆形亚蒂息肉,表面充血;回肠末端可见直径在0.3 cm～0.5 cm的多发性、圆形、亚蒂的息肉样病变;而结肠内因其内容物较多,黏膜显示欠清.
- 陈琼琼李陈婕王迎伟王向平沈宏伟王永俊刘德良李代强施小六
- 关键词：黑斑息肉综合征结肠多发性息肉肠梗阻间歇性腹痛胶囊内镜检查息肉样病变
- 人STK11基因启动子区域的克隆被引量：4
- 2006年
- 通过生物信息学分析,预测人STK11基因可能的转录起始位点和重要的调控区域．以此为基础,构建含人STK11基因上游序列缺失片段的pGL3重组载体,瞬时转染L-02和HeLa两种细胞系,通过检测荧光素活性分析缺失片段的启动活性．结果显示各缺失片段在两株细胞中均有启动活性;当3′端固定在-918时,5′端由-1943——1425的移位对启动活性无明显影响,提示这一区间内不存在重要的顺式作用元件;将5′端固定在—1943时,随着3′端向5′的缩短(—918→—1039→—1160),启动活性明显增强(活性pGL3-1943A>pGL3-1943B>pGL3-1943C),提示—1160——1039和—1039——918的区间分别存在负性顺式作用元件,同时提示核心启动子的3′端位于—1160的5′末端．在pGL3-1322(—1322——918)亦观察到启动活性,提示核心启动子的5′端应该位于—1322的3′末端．因此,人STK11基因的核心启动子位于—1322——1160之间．
- 宁文锋王永俊姚茂金汤建光汪斐周世权李陈捷施小六
- 关键词：STK11基因生物信息学启动子顺式作用元件转录起始位点
