杨东昌
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人膜连蛋白A2基因重组慢病毒载体的构建及其在肝癌细胞株中的表达
- 2011年
- 目的:构建重组慢病毒载体pWPT-ANXA2-Flag,并检测其在小鼠肝癌细胞系Hepa 1-6的表达情况。方法:利用DNA重组技术将人膜连蛋白A2(annexin A2,ANXA2)基因克隆入慢病毒表达载体pWPT中,通过酶切、测序验证后,将重组慢病毒载体pWPT-ANXA2-Flag与包装质粒pCMV-dR8.91、pCMV-VSV-G共转染人胚肾上皮细胞株293T,包装重组慢病毒LV-ANXA2-Flag,并感染小鼠肝癌细胞株Hepa 1-6,用RT-PCR检测ANXA2 mRNA转录水平,Western blot法检测ANXA2-Flag蛋白的表达情况,应用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果:经酶切及测序结果证实,构建了重组慢病毒载体pWPT-ANXA2-Flag;RT-PCR及Western blot结果显示慢病毒感染Hepa 1-6细胞后,ANXA2基因能够在细胞内正确的转录、翻译并稳定表达ANXA2蛋白;经过LV-ANXA2-Flag感染后,Hepa 1-6细胞S期细胞比例明显高于对照细胞。结论:成功建立ANXA2基因慢病毒表达载体pWPT-ANXA2-Flag,包装的慢病毒能够成功感染小鼠肝癌细胞系Hepa 1-6,并使ANXA2基因得以稳定表达,并通过ANXA2促进肿瘤细胞增殖。
- 杨东昌母小新刘巧玉邓蕾陈云孙倍成
- 关键词：慢病毒载体肝癌
- 肿瘤坏死因子受体1在肝细胞肝癌中的表达及其意义被引量：2
- 2011年
- 目的 探讨肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学方法（SP法）检测76例HCC患者肿瘤组织和癌旁组织中TNFR1的蛋白表达,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测其mRNA表达水平.结果 TNFR1在HCC中表达阳性率（39.5%）,显著低于癌旁组织（89.5%,P＜0.05）,并且随着肿瘤分级的增加,TNFR1在癌旁组织中表达量也递增;在基因水平TNFR1 mRNA的2-△△C1值在癌旁组织和癌组织中分别为0.0730±0.0200和0.0287±0.0079（P＜0.05）,也同样得以验证.结论 TNFR1介导的凋亡在HCC的发展中占优势作用,TNFR1的表达增强与肝癌的发生及分化密切相关,在肝癌的发生发展中发挥重要作用.
- 刘巧玉王海孙倍成杨东昌王学浩
- 关键词：肝细胞肝癌肿瘤坏死因子受体1凋亡
