李平 作品数:134 被引量:264 H指数:9 供职机构: 军事医学科学院生物工程研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 建筑科学 环境科学与工程 更多>>
α粒子和NNK联合作用的细胞毒性研究 被引量:5 2006年 目的研究α粒子和NNK联合作用的细胞毒性。方法指数生长期永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D细胞)分为正常对照组(NC)、α粒子单纯照射组(α)、NNK染毒组(NNK)、NNK染毒(100μg/ml)后α粒子照射组(NNK+α)和α粒子照射后NNK染毒(100μg/ml)组(α+NNK)。用低密度接种细胞的克隆形成率测定细胞存活分数;用分子探针二氯荧光素双乙酸盐(DCFH-DA)和氢化乙啶(HE)检测细胞内活性氧(ROS)水平;通过测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性评价细胞膜通透性损伤。结果与相同剂量NNK或α粒子单独作用比较,α粒子和NNK联合作用BEP2D细胞的存活率明显下降,细胞内ROS水平和细胞培养液中LDH活性显著增高。扣除NNK效应后,α粒子和NNK联合作用BEP2D细胞的存活率明显低于α粒子单独照射组,而细胞内ROS水平和细胞培养液中LDH明显高于α粒子单独照射组。此外还发现α粒子照射后NNK染毒的细胞存活率明显低于NNK染毒后α粒子照射组。结论α粒子合并NNK的细胞毒作用具有协同性,且两者作用顺序不同对细胞存活率有影响。 李平 杨陟华 潘秀颉 曹珍山 米娜 陈忠民 刘刚 魏菡 李慧颖 朱茂祥关键词:NNK BEP2D细胞 细胞存活率 细胞膜损伤 SCT-OGP的融合表达与活性的初步研究 被引量:2 2006年 根据天然鲑鱼降钙素(Salmoncalcitonin,SCT)和骨生长肽(OsteogenicGrowthPeptide,OGP)的序列,人工合成了6个DNA片段,进行退火、连接和转化后,获得含有SCT与OGP融合基因的pPIC9-SCT-OGP表达载体,经测序后将此重组质粒电击转化毕赤酵母GS115,通过培养、筛选以及SDS-PAGE鉴定,在毕赤酵母中获得了SCT-OGP融合蛋白的可溶性表达,经分子筛纯化后在5kD左右可见单一条带。将此条带进行了N端氨基酸组分分析,证实此目的蛋白为SCT-OGP融合蛋白。MTT法显示SCT-OGP融合蛋白在体外可以促进成骨细胞和成纤维细胞增殖,以小鼠为模型的试验显示SCT-OGP融合蛋白在体内可以提高碱性磷酸酶活性和降低血钙,表明该融合蛋白具有抑制破骨细胞的活性和刺激成骨细胞增殖的活性,从而提示该融合蛋白具有治疗骨质疏松症的药用潜力。 刘煜 杨小莉 何湘 彭英方 李平 张艳红 马清钧 钟辉关键词:鲑鱼降钙素 骨质疏松症 CLIP相关技术的研究进展 被引量:1 2013年 在真核生物基因表达的转录后调节中,RNA结合蛋白(RBP)起着关键作用,很多RBP的异常与人类疾病的发生密切相关。自2000年的RNA免疫沉淀和芯片分析方法(RNA immunoprecipitation with differential display or microarray analysis,RIP-ChIP)出现以来,人们开始就RBP与RNA相互作用进行了系统而广泛的研究。经过改良和发展,基于体内实时紫外交联免疫沉淀法(ultraviolet crosslinking and immunoprecipitation,CLIP)、交联免疫沉淀cDNA文库高通量测序法(high-throughput sequencing of CLIP cDNA library,HITS-CLIP)、光催化核糖核苷增强交联和免疫沉淀法(photoactivatable-ribonucleoside-enhanced crosslinking and immunprecipitation,PAR-CLIP)以及提高个别核苷酸分辨率交联和免疫共沉淀法(individual nucleotide resolution CLIP,iCLIP)等RIP-ChIP衍生方法相继产生,使用这些方法,可以解析RBP的RNA识别特异性,而且通过与高通量测序技术结合,可以实现转录组尺度的RBP的靶序列的鉴定,分辨率也得到极大提高。该文就RNA与蛋白的相互作用的基本原理及其研究进展、相关技术存在的问题以及发展趋势进行简要综述。 邢伶越 张彦 黄静 李平 王洋 师明磊 赵志虎关键词:CLIP 免疫沉淀法 CTB与HCV抗原决定簇融合蛋白的抗原性及其在抗HCV ELISA试剂盒中的应用 1994年 系统研究了通过霍乱毒素B亚基与HCV的4个抗原决定簇进行基因融合所表达的12种融合蛋白中HCV抗原决定簇的反应原性,探索了以融合蛋白为抗原,进行抗-HCV检测的途径。结果表明,多数融合蛋白中HCV抗原决定簇均能与对应的HCV抗体结合。以融合蛋白95082为抗原研制的抗-HCV ELISA试剂检测122名献血员血清,结果与美国雅培公司抗-HCV ELISA试剂检测的结果完全一致,经药品生物制品检定所检定,其特异性、灵敏度、精密性及稳定性均达到国家卫生部抗-HCV ELISA试剂的暂行检定标准。 曹诚 马清钧 于公义 石成华 李平 李杰之 佟义贞 张艳红 张京生关键词:基因融合 丙型肝炎病毒 中国汉族人群MASP2基因单核苷酸多态性的连锁不平衡和单体型分析 2009年 目的:探讨中国汉族人群甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶(MASP2)基因单核苷酸多态性(SNP)的连锁不平衡和单体型,为相关研究提供更为详实的数据。方法:选取30例广州汉族无关个体,用重新测序的方法进行MASP2基因SNP的发掘,构建连锁不平衡(LD)模式,与HapMap公布的其他4个人群数据相比,并选择4个标签SNP(tagSNP)在232例北京汉族个体和291例广州汉族个体中分析MASP2的多态性和单体型。结果和结论:对MASP2的重测序共检测出16个SNP,LD分析显示来自中国不同地区人群的LD模式基本相同,与来自美国和日本的人群存在差异;北京和广州地区汉族人群tagSNP的等位基因和基因型频率分布不存在显著差异。 王艳 朱晓辉 李平 刘传暄 刘萱 曹诚关键词:单核苷酸多态性 单体型 利用双萤光素酶报告系统研究FoxM1转录活性调控 2014年 目的:构建细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)启动子萤光素酶报告系统,用于转录因子FoxM1转录活性调控研究。方法:利用瞬时转染、实时荧光定量PCR及Western印迹,验证人胚肾HEK293细胞中FoxM1对Cyclin B1 mRNA的转录及蛋白表达的调节作用;利用PCR技术从人宫颈癌HeLa细胞基因组中钓取人源Cyclin B1的启动子序列,克隆至pGL3-Basic Vector中,构建含有Cyclin B1启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒pGL3-Cyclin B1;通过瞬时转染、Western印迹及萤火虫/海肾萤光素酶双报告系统,研究c-Abl酪氨酸激酶对FoxM1转录活性的调控作用。结果:构建了Cyclin B1萤火虫萤光素酶报告系统,该报告系统可用于FoxM1转录活性研究;c-Abl酪氨酸激酶能够显著抑制FoxM1靶向Cyclin B1启动子的转录活性,且抑制作用依赖c-Abl的激酶活性。结论:pGL3-Cyclin B1萤光素酶报告系统可用于研究c-Abl酪氨酸激酶介导的FoxM1转录活性调节。 董钦才 王广菲 蒋雪峰 李平 曹诚 刘萱关键词:细胞周期蛋白B1 启动子 非受体酪氨酸激酶c-Abl/Arg对细胞微管结构的影响 2010年 王广菲 李大培 李平 曹诚 张部昌 刘萱关键词:RNA干扰 微管蛋白 半乳凝集素-3的表达对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响 被引量:2 2007年 目的:研究半乳凝集素-3(Gal3)的表达对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响。方法:构建Gal3-siRNA的特异表达载体,转染乳腺癌细胞MCF-7,通过建立由siRNA介导的Gal3-knockdown稳定细胞株来研究半乳凝集素-3表达下调对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:利用设计的Gal3-siRNA能够使细胞中半乳凝集素-3的表达降低90%左右;当用凋亡诱导剂处理时,Gal3-knockdown稳定细胞株的凋亡率比野生型细胞株高出近20%。结论:在MCF-7乳腺癌细胞中,半乳凝集素-3具有抑制肿瘤细胞凋亡的功能。 李晓明 李平 马清钧 曹诚关键词:MCF-7细胞 细胞凋亡 骨炭与活性氧化铝除氟性能比较 被引量:14 1994年 骨炭与活性氧化铝除氟性能比较李迎凯,李君文,李平(军事医学科学院卫生学环境医学研究所)高氟水在我国分布广泛,初步统计约有5500万人在饮用高氟水(F-MI.omg/L),长期饮用可引起氟中毒。目前,我国饮水除氟主要有化学沉淀法和过滤吸附法。化学沉淀法... 李迎凯 李君文 李平关键词:活性氧化铝 骨炭 除氟 重组霍乱毒素B亚基与恶性疟原虫多表位融合蛋白的免疫原性研究 被引量:1 2000年 目的 评价霍乱毒素B亚基与恶性疟原虫多价抗原的融合蛋白的免疫原性。方法 在大肠杆菌中表达重组霍乱毒素与恶性疟原虫多价抗原的融合蛋白 ,通过免疫小鼠评价融合蛋白的免疫原性。结果 通过亲和层析纯化霍乱毒素B亚基与恶性疟原虫多价抗原的融合蛋白 ,不加任何佐剂 ,以 5 0 μg/只的剂量免疫C5 7BL/ 6J小鼠 ,3次免疫后 ,CTB抗体滴度达 1∶6 40 0 ,抗疟原虫抗体滴度 1∶16 0 0 ,其CTL活性为 2 0 7%。结论 霍乱毒素具有较好的佐剂作用 ,经融合蛋白免疫的小鼠能产生良好的体液和细胞免疫 。 李平 曹诚 钟辉 石成华 马清钧关键词:疟疾 疫苗 免疫原性 恶性疟原虫