张颖
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 表达结核分枝杆菌融合蛋白的DNA疫苗构建及免疫保护被引量：5
- 2006年
- 目的评价构建的结核DNA疫苗pVS3in1免疫的小鼠体外产生细胞因子能力和抵抗结核分枝杆菌H37Rv攻击的效果。方法将结核菌mtb8.4、Mr38 000和ag85b插入pVAX1载体,构建表达结核菌Mtb8.4-Mr38 000 CTL表位-Ag85B融合蛋白的DNA疫苗pVS3in1。将雌性C57BL/6小鼠分成5组,每组20只,分别用pVS3in1、pVAX1、pIL2S和PBS免疫3次,每隔2周。另一组用BCG(105CFU)皮内免疫1次。每组10只鼠在最后1次免疫后,培养脾细胞,检测上清液细胞因子。另10只用结核菌H37Rv经静脉攻击,2周后取脾、肝和肺培养结核菌并计数。结果pVS3in1组鼠脾细胞培养上清液mIL-2和mIFN-γ含量分别为(379.6±58.2)pg/mL和(529.7±63.7)pg/mL,显著高于3个阴性对照组(P<0.001),与BCG组无显著性差异(P>0.05)。5组的mIL-6和mIL-10无显著性差异。pVS3in1组的脾、肝和肺结核菌载量分别为(17 443.6±3 202.5),(19 047.2±3 395.5)和(14 822.2±2 882.2)CFU/g,低于pVAX1、pIL2S和PBS等3组相应器官的载量(P<0.001),仅脾菌落数显著高于BCG组。结论pVS3in1能够刺激机体产生抗结核菌所需的Th1型免疫应答,诱导小鼠抵抗H37Rv攻击的能力与BCG相当。
- 朱中元王海波谢勇陈英兰郑冰冰张春发张颖
- 关键词：结核DNA疫苗融合蛋白细胞因子免疫保护
- 结核杆菌融合蛋白DNA疫苗构建及免疫保护研究
- 2006年
- 目的:评价结核DNA疫苗免疫鼠产生细胞因子和抵抗结核分枝杆菌攻击的能力。方法:将结核菌Mtb8.4基因和谷胱甘肽S转移酶基因插入pVAX1载体,构建表达Mtb8.4和GST融合蛋白的DNA疫苗pVS8.4G。小鼠分成5组,用pVS8.4G、pVAX1、pIL2S 100μg和PBS 0.1mL各免疫3次,间隔2w。另一组用BCG免疫1次。每组10只鼠在加强后,无菌取脾培养。另外10只小鼠用H37Rv攻击,2w后取脾、肝和肺培养结核菌并计数。结果:pVS8.4G免疫鼠脾细胞培养上清mIL-2和mIFN-γ平均为380.9和422.1pg/mL,显著高于阴性对照组,与BCG组无显著差异。5个组的平均mIL-6和mIL-10无显著差异。pVS8.4G免疫小鼠脾、肝和肺的平均结核菌载量分别为42 093.2、43 264.1和37 264.8CFU/g,低于pVAX1、pIL2S和PBS组相应器官的载量。结论:DNA疫苗pVS8.4G能刺激产生Th1型免疫应答,免疫鼠抵抗H37Rv攻击的能力增强。
- 朱中元王海波谢勇陈英兰郑冰冰张春发张颖
- 关键词：结核DNA疫苗免疫保护
- 结核分枝杆菌Mtb8.4DNA疫苗构建及免疫保护研究被引量：4
- 2005年
- 目的评价构建结核菌DNA疫苗pVS84免疫小鼠体外产生细胞因子的能力和抵抗结核分枝杆菌H37Rv攻击的效果。方法利用基因技术将结核菌Mtb8.4插入pVAXl载体,构建表达结核菌Mtb8.4蛋白(分泌型)的DNA疫苗pVS84。将雌性C57BL/6小鼠分成5组,每组20只,分别用pVS84、pVAXl、plL2S和PBS分别各免疫3次,每次均间隔2周,以等剂量加强免疫2次。另一组用BCG(105CFU)皮内注射免疫1次。每组10只鼠在最后一次加强免疫后,无菌取脾培养,检测上清细胞因子。另10只鼠则用结核菌H37Rv经静脉攻击,2周后取脾、肝和肺培养结核菌并进行菌落计数。结果pVS84免疫组鼠脾淋巴细胞培养上清的mIL-2和mlFN-Y平均含量分别为(290.0±112.9)pg/ml和(501.7±79.4)pg/ml,显著高于3个阴性对照组(P<0.001),与BCG免疫组无显著性差异(P>0.05)。5个组的平均mIL-6和mIL-10无显著性差异。pVS84免疫组小鼠的脾、肝和肺的平均结核菌载量分别为(39176.9±3702.6)、(18780.1±2535.8)和(24410.3±1846.8)CFU/g,分别低于pVAXl、plL2S和PBS三个阴性对照组的相应器官的结核菌载量(P<0.001),仅脾结核菌载量显著高于BCG免疫对照组。结论构建的DNA疫苗pVS84能够刺激机体产生抗结核菌所需的Thl型免疫应答,免疫鼠抵抗H37Rv攻击的能力与BCG接近。
- 朱中元刘建兵王海波谢勇张春发张颖
- 关键词：结核分枝杆菌DNA疫苗分泌蛋白免疫保护
- 结核杆菌DNA疫苗pVS84与pIL2质粒联合免疫的保护效率研究
- 2006年
- 目的用构建的人hIL-2质粒和结核杆菌DNA疫苗pVS84联合免疫后,对小鼠的细胞因子进行了测定并对抗结核分枝杆菌H37Rv攻击的能力进行了评估。方法将hil-2插入pVAX1,构建了人hIL-2的质粒pIL2。将雌性C57BL/6鼠分成6组,分别用pVS84和pIL2各50μg,pVS84,pVAX1,pIL2S和PBS免疫3次,间隔2周,加强免疫2次。另一组用BCG(105CFU)皮内免疫1次。每组10只鼠在最后一次加强后,取脾培养,检测上清细胞因子。另10只用结核菌H37Rv攻击,2周后取脾、肝和肺培养结核菌并计数。结果pVS84+pIL2联合免疫组的鼠血清hIL-2平均浓度为720.5±114.5pg/ml,显著高于其它组。pVS84+pIL2组、pVS84组的脾细胞培养上清的mIL-2和mIFN-γ平均含量显著高于3个阴性对照组(P<0.001),与BCG免疫组无显著性差异(P>0.05)。pVS84+pIL2组脾、肝和肺的平均结核菌载量分别为12471.4±2269.3,13622.6±2404.0和14742.0±2378.7CFU/g,低于pVS84组和3个阴性对照组相应器官的结核菌载量(P<0.001),与BCG对照组无显著差异。结论pIL2质粒与pVS84联合免疫能够刺激机体产生Th1型免疫应答,抵抗H37Rv攻击的能力与BCG的效果相当。
- 朱中元谢勇王海波刘建兵陈英兰郑冰冰张春发张颖
- 关键词：结核DNA疫苗联合免疫
- 结核分枝杆菌DNA疫苗pVS85B的构建及免疫保护实验研究被引量：2
- 2006年
- 评价构建的结核DNA疫苗pVS85B免疫小鼠后脾细胞体外产生细胞因子和抵抗结核分枝杆菌H37Rv攻击的能力。利用基因操作技术将结核菌ag85b插入pVAX1载体,构建表达结核菌Ag85B分泌型蛋白的DNA疫苗pVS85B。将雌性C57BL/6小鼠分成5组,每组20只,分别用pVS85B、pVAX1、pIL2S和PBS分别免疫3次,均间隔2周,以相同剂量加强免疫2次。另一组用BCG(105CFU)免疫1次。每组10只鼠在最后一次加强免疫后,无菌取脾培养,检测上清细胞因子。另10只鼠用结核菌H37Rv经静脉攻击,2周后取脾、肝和肺培养结核菌并进行菌落计数。结果是pVS85B免疫组鼠脾淋巴细胞培养上清的mIL-2和mIFN-γ平均含量分别为(311.3±46.2)和(273.6±55.4)pg/ml,显著高于3个阴性对照组(P<0.001),与BCG免疫组无显著性差异(P>0.05)。5个组的平均mIL-6和mIL-10无显著性差异。pVS85B免疫组小鼠的脾、肝和肺的平均结核菌载量分别为(47 716.6±5 689.0)、(50 113.4±6 532.2)和(51 095.3±2 788.9)CFU/g,分别低于pVAX1、pIL2S和PBS三个阴性对照组的相应器官的结核菌载量(P<0.001)。pVS85B免疫组脾、肝和肺的结核菌载量显著高于BCG免疫对照组。提示,表达结核菌分泌型Ag85B的DNA疫苗pVS85B能够刺激机体产生抗结核菌所需的Th1型免疫应答,免疫鼠获得抵抗H37Rv攻击的能力。
- 刘建兵朱中元王海波谢勇张春发张颖
- 关键词：DNA疫苗结核分泌蛋白细胞免疫免疫保护
