周恒 作品数:6 被引量:26 H指数:2 供职机构: 华南农业大学兽医学院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 国家自然科学基金 广东省农科院院长基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备与应用 本发明公开了一种抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备方法与应用,属于基因工程领域。该RNA干扰载体以pEGFP-C1为骨架载体,包括猪U6RNA聚合酶Ⅲ启动子和干扰猪源p53基因的shRNA的转录模板。将pEG... 沈海燕 张建峰 郭鹏举 张春红 周恒 朱余军文献传递 上海市零售禽肉制品和活禽中沙门氏菌血清型与耐药性研究 被引量:22 2014年 为掌握上海市沙门氏菌在农贸市场和超市禽肉制品和活禽中的污染状况、流行血清型和耐药情况,本试验从320份2012年采集的禽肉样本(240份)和活禽泄殖腔棉试子(80份)中共分离鉴定出沙门氏菌70株,阳性率为21.9%。血清型鉴定结果表明,共鉴定出11种不同的血清型,其中肠炎沙门氏菌占47.1%、印第安纳沙门氏菌占17.1%、鼠伤寒沙门氏菌和德尔卑沙门氏菌均占8.6%。通过纸片法对这70株沙门氏菌进行了16种常用抗菌药物的药敏试验,结果表明,沙门氏菌对奈啶酸耐药率最高,达75.7%,对磺胺异唑、链霉素和氨苄西林耐药率较高,分别为60.0%、60.0%和51.4%。除亚胺培南外,其他药物均有不同程度的耐药菌株。有40株(57.1%)沙门氏菌呈多重耐药表型,耐药性最强的菌株可以对14种抗菌药产生耐药性。本研究对沙门氏菌病的防控及指导临床合理用药具有重要的现实意义。 沈海燕 郭慧霞 许学斌 周恒 刘志成 张春红关键词:沙门氏菌 血清型 耐药性 重组猪IFN-λ3原核表达及其活性分析 被引量:2 2015年 应用RT-PCR技术从多聚肌苷酸多聚胞苷酸(poly(I∶C))刺激的ST细胞中扩增猪干扰素-λ3(PoIFN-λ3)基因。基因序列分析表明,PoIFN-λ3基因全长为588bp,与绵羊IFN-λ3基因(XM_004015683)的同源性最高(87.6%);分子遗传进化树分析表明猪IFN-λ3与牛、绵羊亲缘关系最近,与马、人、黑猩猩和鸡的亲缘关系次之。将PoIFN-λ3成熟肽序列定向插入pET-32a载体,转化宿主菌Rosetta gami B,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting检测分析表明,PoIFN-λ3基因获得表达,重组蛋白大小为32 000,以包涵体形式存在。重组蛋白经变性、纯化、复性后,用细胞病变抑制法在MDBK/VSV系统上进行抗病毒活性的测定。结果显示,复性后重组蛋白的含量约为1g/L,抗水泡性口炎病毒(VSV)活性达到2×103 U/mg,表明重组poIFN-λ3具有较高的抗病毒作用。 周恒 沈海燕 郭鹏举 张春红 张建峰 刘志成 孙俊颖 李玉谷关键词:原核表达 抗病毒活性 猪圆环病毒2型广东分离株ORF2基因的克隆和序列分析 被引量:2 2014年 为了解广东部分地区猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的基因型和遗传变异情况,本研究根据GenBank中PCV2的核苷酸序列设计针对ORF2基因的1对特异性引物,从分离于广东省的8株PCV2分离株BL、HD、Li、GD01、GD02、HD01、HD02和HD03株的细胞培养物中扩增ORF2基因,扩增片段克隆到pMD18-T上,获得重组质粒,并对其进行测序。序列分析结果表明,8株PCV2分离株ORF2基因与其他PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为89.7%~100%,氨基酸序列同源性为87.2%~99.6%,进化分析结果表明,其中7株分离株处于同一分支,属于PCV2b-1A/1B,HD01株属于PCV2b-1C。 沈海燕 刘志成 郭慧霞 周恒 朱余军 张春红关键词:猪圆环病毒2型 ORF2基因 抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备与应用 本发明公开了一种抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备方法与应用,属于基因工程领域。该RNA干扰载体以pEGFP-C1为骨架载体,包括猪U6RNA聚合酶Ⅲ启动子和干扰猪源p53基因的shRNA的转录模板。将pEG... 沈海燕 张建峰 郭鹏举 张春红 周恒 朱余军鸡贫血病毒广州株VP3和VP1基因的克隆与序列分析 2015年 采用PCR方法成功克隆了3株鸡贫血病病毒(CAr)广州株VP3和VPl的部分基因,并进行了核苷酸序列测定。序列分析表明,3株CAV广州株与国内外其他21株CAV毒株的核苷酸序列相似性在89.5%-100.0%之间;推导氨基酸序列的相似性在84.8%-98.2%之间。系统发育进化树分析显示,3株CAV广州株和中国TJBD40、SD22、SD24株都同处于一个分支上,而与马来西亚的SMSC-1株、日本的G6株以及澳大利亚的CAU269/7株的亲缘关系较远。 沈海燕 张建峰 刘志成 周恒 郭翠丽 郭鹏举 张春红关键词:鸡贫血病病毒 分子进化树