吴扬
- 作品数：14 被引量：45H指数：5
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金科技部基础研究重大项目前期研究专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人内皮抑素腺病毒联合顺铂对小鼠结肠癌肺转移治疗作用研究被引量：3
- 2011年
- 目的观察重组人内皮抑素腺病毒（Ad-hE）联合顺铂（Cis）对小鼠结肠癌肺转移的治疗作用、不良反应,并初步探讨其作用机制,探索抗血管基因治疗联合化疗的可行性。方法 6~8周龄BALB/c小鼠每只尾静脉注射接种1×105CT26细胞,建立小鼠CT26结肠癌肺转移模型,随机分成5组,分别予Ad-hE和Cis单独及联合注射,以生理盐水及空腺病毒注射为对照,观察肿瘤抑制效应、肿瘤血管生成、肿瘤细胞凋亡情况和可能发生的毒副反应。结果与对照组相比,Ad-hE和Cis单药及联合治疗组小鼠肺转移瘤数量明显减少,且联合治疗组生存期延长。各治疗组肿瘤血管生成减少,肿瘤细胞凋亡增多,均以Ad-hE联合Cis组最明显。各组均未观察到明显不良反应。结论重组人内皮抑素腺病毒和顺铂联合应用可增强对小鼠结肠癌肺转移的抑制作用,其机理可能是通过抑制肿瘤新生血管形成和诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。
- 王炼杨莉吴扬敬新蓉王莉刘焕义李秋
- 关键词：肿瘤内皮抑素腺病毒
- 乳腺癌相关基因的分子遗传学研究进展被引量：5
- 2002年
- 对乳腺癌分子发病机理的研究已取得不少进展。其中涉及多种基因异常 ,包括易感基因、癌基因、抑癌基因等 ,对于乳腺癌的诊断、治疗及预后判断均具有提示作用。乳腺癌易感基因 ,尤其是 BRCA的异常在乳腺癌发病中更具意义。
- 吴扬杨莉魏于全
- 关键词：乳腺癌相关基因分子遗传学易感基因
- 重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究被引量：8
- 2004年
- 目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。
- 吴扬杨莉赵霞宿静梅胡兵刘继彦牛挺罗彦李秋魏于全
- 关键词：腺病毒重组人内皮抑素血管内皮细胞抗肿瘤重组蛋白表达负相关
- 乳腺癌生物治疗进展被引量：7
- 2004年
- 魏于全吴扬
- 关键词：乳腺癌生物治疗免疫治疗抗体治疗肿瘤疫苗治疗
- 鸡tie-2受体胞外片段重组蛋白的制备及其抗血管生成作用的研究被引量：10
- 2004年
- 目的 设法调控血管的生长发育 ,从而达到治疗疾病的目的。方法 用 PCR方法从既往构建含鸡 tie- 2受体胞外段基因的表达质粒中扩增目的片段 ,构建 p QE质粒原核表达载体并诱导目的蛋白的表达 ;将目的蛋白进一步纯化、复性并免疫小鼠 ,获得抗血清 ,用 EL ISA和 Western印迹检测抗血清中抗体的存在 ;分离纯化抗体 ,用流式细胞仪体外观察其对血管内皮细胞生长情况的影响用体内藻酸盐包裹肿瘤细胞实验和肿瘤内微血管 CD31免疫组化观察其对血管生成情况的影响。结果 经酶切分析及测序鉴定表明获得了鸡 tie- 2受体胞外目的片段的p QE原核表达载体 ,且高效表达目的蛋白 ,其免疫小鼠可产生抗重组蛋白的抗体 ;体外细胞培养结果显示免疫后产生的抗体明显的诱导血管内皮细胞凋亡 ;藻酸盐包裹实验表明此抗体能显著降低肿瘤新生血管的形成 ;CD31微血管计数显示此抗体能明显减少肿瘤内微血管数。结论 用原核表达的方法成功制备了鸡 tie- 2受体胞外片段 (配体结构域 )的蛋白疫苗 ,且此疫苗能明显产生抗血管生成作用。
- 罗彦文艳君田聆吴扬刘继彦李秋李炯毛咏秋邓洪新阚兵何秋明杨金亮魏于全
- 关键词：TIE-2受体重组蛋白抗血管生成原核表达
- 水泡口炎病毒基质蛋白对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究水泡口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)基质蛋白(matrix protein,M蛋白)对鼠CT26结肠癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其对结肠癌治疗的可行性和意义。方法采用脂质体转染技术将已构建的水泡口炎病毒基质蛋白(VSV-M)重组真核表达质粒pcDNA3.1-M转入CT26细胞,Western blot检测M蛋白体外表达;采用噻唑蓝(MTT)法检测M蛋白质粒对CT26肿瘤细胞增殖的影响;碘化丙锭(PI)染色检测CT26肿瘤细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术定量观察104个细胞中亚G1期细胞所占比例。结果重组质粒转染CT26细胞后,Western blot检测到了M蛋白体外表达;倒置显微镜下观察到细胞形态学的改变;MTT检测到重组质粒转染CT26细胞48 h后生长明显抑制,与对照组相比抑制率达76.4%,差异有统计学意义(P<0.05);PI染色检测到CT26细胞凋亡核改变;流式细胞术检测到M蛋白诱导了CT26细胞的凋亡,凋亡率达80.2%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论VSV-M蛋白真核表达质粒pcDNA3.1-M导入小鼠结肠癌细胞CT26后诱导了细胞凋亡,对结肠癌具有治疗意义。
- 赵菊梅刘涛魏于全文艳君吴扬
- 关键词：细胞凋亡结肠癌基因治疗
- 鸡Tie-2受体胞外片段的原核表达及目的蛋白免疫原性的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 研究鸡 Tie- 2受体胞外片段 (配体结合域 )的原核表达以及目的蛋白对小鼠的抗原性。方法 用 PCR方法从既往构建的包含鸡 Tie- 2受体胞外段基因的表达质粒扩增目的片段 ,进而构建 PQE原核表达载体并诱导其目的蛋白的表达 ,将目的蛋白进一步纯化、复性并免疫小鼠 ,获得抗血清 ,用 EL ISA和 Western blotting检测抗血清中抗体的存在。结果 经酶切分析及测序鉴定表明获得了鸡 Tie- 2受体胞外目的片段的 PQE原核表达载体 ,能高效表达目的蛋白 ,将其免疫小鼠可产生抗重组蛋白的抗体。结论 用原核表达的方式可成功的获得鸡Tie- 2受体胞外目的片段的蛋白 。
- 罗彦田聆吴扬李秋刘继彦胡兵宿静梅何秋明刘成文魏于全文艳君
- 关键词：TIE-2受体原核表达抗体血清
- 糖化重组生存素腺病毒疫苗抗肿瘤作用的实验研究被引量：2
- 2007年
- 背景与目的:生存素在调控细胞凋亡和有丝分裂过程中起着重要作用,在正常分化的组织中不表达或表达极低,而在胚胎组织和大部分肿瘤组织中广泛表达,而这一特点为恶性肿瘤的基因治疗提供了很好的靶标。本研究制备糖化重组生存素腺病毒疫苗,观察其抗肿瘤作用并探讨其作用机制。方法:将重组生存素腺病毒和甘露聚糖在氧化条件下偶联,同时建立小鼠结肠癌和Lewis肺癌模型,以糖化重组生存素腺病毒疫苗治疗荷瘤小鼠,观察肿瘤体积和小鼠生存时间。对小鼠肿瘤组织作TUNEL染色观察肿瘤细胞凋亡。为了检测疫苗的保护作用,预先以糖化重组生存素腺病毒疫苗免疫接种小鼠,或合用抗CD4、CD8和NK单克隆抗体阻断相应的淋巴细胞亚群,再接种肿瘤,观察小鼠肿瘤生长情况。结果:糖化重组生存素腺病毒疫苗治疗组小鼠肿瘤生长受到明显抑制,无明显不良反应发生,小鼠的生存时间明显延长,肿瘤细胞凋亡明显增加。同时,糖化重组生存素腺病毒疫苗能诱导小鼠产生抗肿瘤免疫,这一免疫反应依赖于CD4和CD8淋巴细胞,也部分依赖于NK细胞。结论:糖化重组生存素腺病毒疫苗能诱导机体产生特异性的主动免疫反应,诱导肿瘤细胞凋亡,具有明确的抗肿瘤作用,值得进一步研究。
- 李秋文艳君吴扬罗彦卢铀
- 关键词：生存素疫苗肿瘤
- 重组非洲爪蟾和小鼠血管内皮细胞生长因子的原核表达、纯化及鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的 构建非洲爪蟾和小鼠血管内皮细胞生长因子重组表达载体,进行蛋白质原核表达,并对表达产物进行分离、纯化和鉴定。方法 首先通过限制性核酸内切酶酶切及连接反应,构建非洲爪蟾和小鼠血管内皮细胞生长因子的原核表达载体p ET- x VEGF和p ET- m VEGF。筛选的重组质粒经酶切和DNA序列测定等证实正确性后,再转染感受态大肠杆菌BL 2 1(DE3) ,经IPTG诱导蛋白质表达。表达产物经Ni- NTA亲合层析及肠激酶特异性酶切进行分离纯化,最后用SDS- PAGE和蛋白免疫印迹法进行鉴定。结果 限制性核酸内切酶酶切和DNA序列测定等显示目的基因片段和阅读框架正确无误,表明非洲爪蟾和小鼠血管内皮细胞生长因子的原核表达载体p ET-x VEGF和p ET- m VEGF构建成功。重组蛋白质在大肠杆菌中获得稳定表达,分离纯化的表达产物x VEGF和m VEGF 的纯度达到95 %以上,其相对分子质量与预期值一致。抗小鼠VEGF抗体可特异性识别x VEGF和m VEGF。结论 重组非洲爪蟾和小鼠血管内皮细胞生长因子的原核表达、分离纯化及鉴定成功,为进一步研究异种VEGF蛋白质疫苗抗小鼠肿瘤模型奠定了基础。
- 牛挺刘霆贾永前杨莉田聆刘继彦胡兵吴扬魏于全
- 关键词：血管内皮细胞生长因子重组蛋白质原核表达
- 小鼠干扰素-γ（mIFN-γ）基因克隆及其腺病毒载体的构建
- ＜正＞目的:构建含有mIFN-γ基因的腺病毒载体,为探索IFN-γ在肝纤维化治疗中的作用研究奠定基础。方法:从含有mIFN-γ基因的质粒载体pORF5-mIFN-γ中PCR扩增出mIFN-γ基因片段,双酶切将该基因克隆入...
- 薛红利何东蔺诗佳孟文彤吴扬文艳君牛挺
- 文献传递
