卢敏莹
- 作品数：34 被引量：99H指数：6
- 供职机构：广州医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金上海中西医结合科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞因子诱导的杀伤细胞上清液的细菌内毒素检测被引量：1
- 2007年
- 目的:通过试验建立细胞因子诱导的杀伤细胞(cyto-kine induced killer cells,CIK细胞)上清液细菌内毒素的检查方法。方法:参照中国药典(2005年版二部附录ⅪE)细菌内毒素检查法进行干扰试验。结果:用灵敏度0.25EU.mL-1的鲎试剂,同时将样品稀释40倍,进行细菌内毒素检查,可消除干扰作用。结论:细菌内毒素检查法可以用于CIK细胞上清液的细菌内毒素检测,对CIK细胞制剂进行质量控制。
- 杨波祁岩超卢敏莹潘东晓
- 关键词：细菌内毒素鲎试剂
- 血清HSP27在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用被引量：5
- 2011年
- 目的探讨热休克蛋白27(HSP27)在原发性肝细胞癌(HCC)早期诊断中的应用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测正常人、乙肝病毒携带者和HCC患者血清中HSP27的含量,并结合化学发光免疫分析法进行血清甲胎蛋白(AFP)的平行检测。结果 HCC患者平均HSP27水平明显高于正常对照组和HBV携带者。其中大/小肝癌组、或AFP阴性/AFP阳性HCC组与正常对照组、慢性HBV感染组及急性HBV感染组比较,差异均有统计学意义。所有肝癌组与AFP阳性的HBV感染组相比差异也有统计学意义。并且,当HSP27与经典标志物AFP相结合检测HCC时,诊断的敏感性、特异性、阳性预测值均大大提高。结论 HSP27可以作为HCC的早期血清学诊断的生物标志物。HSP27和AFP平行试验可提高敏感度,减少误诊率,有利于临床诊断工作。
- 王金龙胡树珍潘东晓卢敏莹李志阳杨素冰申鸿卓罗凯罗凯崔书钟
- 关键词：热休克蛋白27原发性肝细胞癌生物标志物
- 肿瘤患者外周血树突状细胞亚群的变化及意义
- 2007年
- 目的探讨肿瘤患者外周血树突状细胞亚群的变化及临床意义。方法采用流式细胞术检测23例肿瘤患者和19例健康人外周血CD11c^＋、CD123^＋的树突状细胞亚群和淋巴细胞的数量。结果正常对照组外周血CD11c^＋DC占白细胞比例为0．19％±0．08％，绝对数为（9．3±3．9）×10^5个／L；CD123^＋Dc点白细胞比例为0．15％±0．07％，绝对数为（7．5±3．5）×10^6个／L。肿瘤患者组外周血CD123^＋DC占白细胞比例为0．09％±0．06％，绝对数为（4．7±3．1）×10^6个／L；CD123^＋DC占白细胞比例为0．10％±0．06％，绝对数为（5．3±3．2）×10^6个／L。与正常对照组比较，肿瘤患者CD11cDC比例和绝对数显著下降（P〈0．05）；而CD123^＋DC比例和绝对数下降无显著性差异。另外，与正常对照组比较，肿瘤患者外周血T、Th、TS、NK细胞数增均减低（P〈0．05）；B细胞绝对数无显著差异。结论肿瘤患者外周血CD11c^＋DC数量下降，伴随T、Th、TS、NK细胞数降低，可能与肿瘤的发生发展有关。
- 杨波祁岩超卢敏莹潘东晓申鸿卓
- 关键词：肿瘤树突状细胞亚群流式细胞术
- 一种KRAS基因突变检测方法的建立及初步应用被引量：2
- 2013年
- 目的建立一种KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法,并初步探讨其临床应用价值。方法以KRAS基因热点突变区域12、13密码子为研究位点设计特异性扩增、测序引物,利用已知野生型、突变型样品以TA克隆技术构建相应质粒作为标准品,建立KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法,并进行方法学和应用评估。结果成功构建了KRAS基因12、13密码子野生型、突变型质粒。建立了KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法,该方法灵敏度高(9.39×101copies/uL),重复性好(实时荧光定量PCR部分批内、批间变异系数分别为1.60%、2.54%)。该法与传统Sanger测序法同时检测40例临床样品,结果符合率为100%。结论本研究成功建立了可用于临床样品检测的KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法。
- 罗凯王倩潘东晓卢敏莹贺智敏
- 关键词：KRAS突变基因测序实时荧光定量PCR
- 扶正培本法对乳腺癌患者树突状细胞的影响研究被引量：2
- 2007年
- 目的:从细胞、分子水平上初步探讨中医扶正培本法对机体免疫功能的损害的修复作用及其机理。方法:用流式细胞术检测乳腺癌患者癌组织、引流淋巴结中CD83、CD80、CD86蛋白表达水平及在化疗前、后的改变。结果:乳腺癌患者癌组织、腋窝淋巴结细胞CD83、CD80、CD86蛋白与良性对照组比较明显降低(P<0.05或0.01),化疗前、后对比癌组织、腋窝淋巴结细胞CD83、CD80、CD86水平明显降低(P<0.05或0.01)。加中医扶正培本治疗后,化疗前、后对比癌组织、腋窝淋巴结细胞CD83、CD80、CD86水平没有显著性差异(P>0.05)。结论:肿瘤本身、化疗对机体免疫功能产生不良影响,扶正培本法可能参与激活树突状细胞功能,上调共刺激分子水平,帮助修复机体的免疫损伤。
- 李洪胜方驰华王远东苏旭春杨波祁岩超刘城林卢敏莹
- 关键词：乳腺癌新辅助化疗细胞免疫功能扶正培本
- 脐血来源CIK细胞的体外扩增培养
- 2006年
- 目的 研究人脐血来源的细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）体外培养扩增，并检测其功能。方法 应用Ficoll-Hypaque离心获得界面细胞，贴壁培养2h，获得悬浮单个核细胞，体外以重组人白介素-1、重组人白介素-2、γ-干扰素和CD3抗体诱导培养15d。在CIK发育过程中，在光镜下观察其生长情况，应用流式细胞仪检测CIK表型。采用MTT法检测CIK对肿瘤细胞的杀伤性。结果 CIK前3d细胞扩增不明显，在培养4d后，细胞增殖，呈团，可观察到不规则形的细胞．细胞体积增大，胞质少、胞核大、圆．有时可观察到细胞分裂相。培养12d后CIK细胞高表达CD3^＋CD56^＋，CD3^＋CD8^＋细胞缓慢增长，CD3、CD4细胞有所增加，在d7之后有所下降，CD3^＋细胞维持高水平且变化不明显。CIK细胞对2种来源于不同组织的肿瘤细胞均产生了明显的杀伤性。结论 人脐血经重组人白介素-1、重组人白介素-2、γ-干扰素和CD3抗体体外诱导培养，能诱导出CIK，并对恶性肿瘤细胞有明显的杀伤活性。
- 祁岩超姜鸿南王远东杨波卢敏莹申鸿卓潘东晓
- 关键词：CIK脐血
- miR-181b/c靶向调控SRGN抑制乳腺癌细胞侵袭转移被引量：4
- 2014年
- 目的 研究糖蛋白丝甘蛋白聚糖（SRGN）的表达与乳腺癌细胞侵袭转移的关系,及小分子RNA在SRGN表达调控中的作用.方法 应用实时定量PCR和Western blot检测SRGN在侵袭转移增强的乳腺癌MCF-7/5-Fu细胞与亲本转移能力弱的MCF-7细胞中的表达差异,利用siRNA干扰技术结合体外Transwell实验检测SRGN对乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响.运用生物信息学软件预测可靶向SRGN的miRNA,并对接乳腺癌细胞MCF-7 vs MCF-7/5-Fu的miRNA差异表达芯片数据,同时利用miRNA定量PCR确定候选miRNA的表达差异.通过转染miRNA模拟物结合western blot实验验证候选miR-NA对SRGN靶向调节作用,最后通过Transwell实验检测候选miRNA对肿瘤细胞侵袭转移的影响.结果 SRGN在侵袭转移增强的MCF-7/5-Fu细胞中表达明显增高,干扰SRGN可抑制肿瘤细胞的侵袭转移.此外,miR181b/c在MCF-7/5-Fu细胞中表达明显降低与SRGN表达呈负相关,并且miR181 b/c可靶向抑制SRGN表达,进而抑制肿瘤细胞的侵袭转移.结论 miR181 b/c可靶向抑制SRGN表达,抑制乳腺癌细胞的侵袭转移.
- 张志杰邓印根尹江卢敏莹贺智敏
- 关键词：微RNAS蛋白聚糖类肿瘤浸润
- 热化疗对肺癌术后患者淋巴细胞绝对数值的影响
- 2007年
- 目的分析热化疗对肺癌术后的近期疗效及其对患者外周血淋巴细胞绝对数值的影响。方法采用流式细胞术检测36例肺癌术后患者热化疗前后外周血淋巴细胞绝对数值，并与正常对照作比较。结果患者热化疗前后淋巴细胞绝对数值均低于正常对照值（P〈0.05）。热化疗有效者总T细胞（CD3^＋）、辅助T淋巴细胞（CD3^＋,CD4^＋）、NK细胞（CD16^＋CD56^＋）均显著升高（P〈0．05），抑制T淋巴细胞（CD3^＋,CD8^＋）降低但差异无统计学意义（P〉0．05），B细胞（CD19^＋）变化不显著（P〉0.05）。热化疗无效者CD3^＋、CD3^＋,CD4^＋、CD16^＋,CD56^＋显著降低（P〈0．05），而CD3^＋,CD8^＋、CD19^＋变化不明显（P〉0．05）。结论肺癌患者免疫功能低下，有效热化疗能提高患者的淋巴细胞免疫功能。临床上对患者外周血淋巴细胞绝对数值的观察，有助于对患者的治疗进行监测。
- 杨波祁岩超卢敏莹潘东晓申鸿卓祁中浩史强
- 关键词：肺肿瘤淋巴细胞化学疗法
- 荷CEA-rV的DC增强CD3AK对CEA阳性肿瘤的特异杀伤作用
- 2005年
- 癌胚抗原(carcino embryonic antigen,CEA)是一种常见的肿瘤相关抗原,是目前国际上公认的肿瘤标记物.在人体上皮细胞恶性肿瘤中,包括90%的胃肠道肿瘤、胰腺癌、80%以上的非小细胞肺癌和50%左右的乳腺癌,都呈CEA阳性.人们称这类肿瘤为CEA阳性肿瘤[1].罗超权等[2]用牛痘病毒构建的CEA-重组基因痘苗病毒(CEA-rV)既有CEA抗原的高表达,又可刺激机体产生CEA抗体.
- 祁岩超王新帅扬波卢敏莹潘东晓
- 关键词：树突状细胞CD3AK细胞
- 两种不同抗原致敏方式负载DC疫苗对Lovo细胞的体外杀伤作用被引量：2
- 2010年
- 目的比较重组痘苗病毒负载人癌胚抗原(CEA)基因转染方式与Lovo细胞裂解物诱导方式对产生DC疫苗的影响。方法分别采用重组痘苗病毒负载CEA基因转染方式及Lovo肿瘤细胞裂解物转染方式转染未成熟DC,诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。体外培养CTL并检测其活性;MTT法检测两组CTL对Lovo细胞的杀伤作用。结果两种方式致敏DC均可诱导激活CTL并分泌INF-γ,而重组痘苗病毒转染DC组CTL诱导率高于细胞裂解物组;重组痘苗病毒转染组诱导的CTL对Lovo细胞的特异性杀伤活性显著高于细胞裂解物组。结论两种不同抗原致敏方式负载DC疫苗均能够诱导高效而特异的CTL杀瘤活性,而使用重组痘苗病毒转染CEA至DCs的方式明显优于肿瘤细胞裂解物的抗原负载方式,为DC疫苗用于结肠癌的免疫治疗奠定基础。
- 刘季芳祁岩超杨波卢敏莹潘东晓申鸿卓
- 关键词：树突状细胞细胞毒性T淋巴细胞
