刘燕飞
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 草鱼生长激素基因的克隆及原核表达研究被引量：9
- 2004年
- 应用RT PCR技术从草鱼脑垂体总RNA中克隆草鱼生长激素cDNA(cGH),全长669bp,含开放阅读框633bp,编码210个氨基酸,分子量为23.6kDa,等电点为6.28;与已报道的草鱼GH有12个碱基、3个氨基酸残基的差异,同源性为98%.将草鱼cDNA定向插入原核表达载体pGEX 4T 1,构建了重组草鱼GH基因质粒pGEX GcGH,经IPTG诱导,pGEX GcGH在大肠杆菌中可表达49.6kDa的融合蛋白.
- 殷雪龙章富巫雪艳刘燕飞李凤刘世贵
- 关键词：草鱼生长激素基因克隆原核表达
- 牛蛙生长激素基因在COS_7细胞中的转染表达
- 2007年
- 应用RT-PCR技术克隆牛蛙生长激素(BfGH)的cDNA,T-A克隆法构建反向插入的pMD18-T/BfGH重组质粒,回收BamHⅠ酶切的BfGH cDNA片段,并与去磷酸化处理的真核表达载体VR1020/BamHⅠ,酶切鉴定方法筛选BfGH正向插入的重组真核表达质粒VBfGH.脂质体法介导质粒VBfGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实BfGH基因在COS7细胞中得到了正确的转染表达.
- 尉研喻麟崔佳杨土凤刘燕飞刘世贵龙章富
- 关键词：真核表达质粒转染COS7细胞
- 猪生长激素基因的克隆及在哺乳动物细胞中的表达被引量：7
- 2005年
- 应用RT-PCR技术克隆了猪生长激素(pGH)cDNA,该基因编码蛋白的信号肽序列与已有报道的pGH基因存在2个氨基酸残基的差异,而成熟肽却无差异。将 pGH cDNA定向插入真核表达载体VR1020,构建了重组真核表达质粒VpGH;利用脂质体法转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光分析,分别在转录和翻译水平证实了目的基因在COS7细胞中得到正确转染表达。
- 刘燕飞尉研付若彬丁秀琼谭俊杰孟亚鹏刘世贵龙章富
- 关键词：猪生长激素基因克隆真核表达
- 猪生长激素基因的克隆及在COS-7细胞的表达研究
- 本研究以长白猪垂体总RNA为模板，通过RT-PCR克隆了猪生长激素(pGH)基因编码区cDNA。1.0％琼脂糖电泳检测RT-PCR产物，胶回收PCR产物并通过T-A法亚克隆到pMD18-T载体中转化到DH5αE.coli...
- 刘燕飞
- 关键词：生长激素克隆转染真核表达COS-7细胞
- 文献传递
- 猪生长激素基因的原核表达及其抗体制备被引量：7
- 2005年
- 通过构建pGH基因的原核表达质粒,转化大肠埃希氏菌TOP10,经IPTG诱导,成功表达了重组猪生长激素的融合蛋白。经SDS PAGE分析,在分子质量50.4ku处有1条新的特异蛋白质条带。对以包涵体形式表达的融合蛋白进行SDS PAGE分离,并经透析得到了重组融合蛋白,以此融合蛋白免疫家兔,制备并纯化了抗pGH多克隆抗体,经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹分析和免疫组织化学方法检测,此抗体具有较高效价和特异性。成功地表达了pGH基因并获得了多克隆抗体。
- 李凤孟亚鹏刘燕飞谭俊杰付若彬刘世贵龙章富
- 关键词：生长激素原核表达多克隆抗体
