铁保贤 作品数:7 被引量:5 H指数:1 供职机构: 淮南市肿瘤医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省科技攻关计划 安徽省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
6 kD早期分泌型抗原靶点(ESAT6)抑制巨噬细胞的自噬并促进BCG的增殖 被引量:1 2017年 目的 6 kD早期分泌型抗原靶点(ESAT6)能够促进卡介苗(BCG)的增殖,巨噬细胞的自噬功能能有效杀伤BCG,研究ESAT6与自噬的相互作用,为揭示ESAT6介导的免疫逃逸提供实验依据。方法分别观察对照质粒pCMV-HA和重组质粒pCMV-HA-ESAT6转染以及Earle平衡盐溶液(EBSS)处理的小鼠RAW264.7巨噬细胞中BCG的生长情况,Western blot法检测转染pCMV-HA-ESAT6的RAW264.7细胞0、8、12、24、32 h后,微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白水平。转染pCMV-HA、pCMV-HA-ESAT6、氯喹(CQ)单独处理和CQ与pCMV-HA-ESAT6转染联合处理条件下,Western blot法检测LC3的水平,Lyso Tracker Red染料法计数溶酶体数量,观察罗琴培养基上BCG的情况。结果 pCMV-HA-ESAT6转染的RAW264.7细胞中BCG的生长旺盛,而EBSS处理组生长受抑制;在0、8、12、24、32 h,pCMV-HA-ESAT6转染的RAW264.7细胞中LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转换逐渐增强;与对照组相比,溶酶体荧光探针Lyso Tracker Red染色法显示pCMV-HA-ESAT6、CQ以及CQ与pCMV-HA-ESAT6转染处理组的溶酶体较多且体积大,但后三组间均无显著性差异;pCMV-HA-ESAT6、CQ以及CQ与pCMV-HA-ESAT6转染处理组的BCG生长旺盛。结论 ESAT6抑制RAW264.7细胞内的自噬水平,并且能够促进RAW264.7细胞中感染BCG的生长。 徐雪维 赵润鹏 张荣波 吴静 胡东 邢应如 倪升发 铁保贤关键词:巨噬细胞 自噬 ESAT6通过mTOR抑制自噬并促进BCG增殖 2017年 目的研究mTOR在结核杆菌毒力因子ESAT6诱导的自噬抑制以及促进BCG增殖中的作用。方法 PCMV-HA-ESAT6质粒转染Raw264.7细胞,用蛋白免疫印迹检测LC3、P62、P-mTOR和P-70S6K表达水平;用mTOR阻断剂Torin1联合ESAT6转染以及分别作用于Raw264.7细胞后,免疫印迹检测P62和P-mTOR表达水平,LysoTracker Red染色观察溶酶体变化,BCG增殖实验计数各组菌落数。结果 ESAT6转染细胞后,细胞P62、P-mTOR和P-70S6K表达水平显著增高,LC3I完成向LC3II的转化;联合Torin1的ESAT6转染组和Torin1处理组的P-mTOR和P62无显著变化,溶酶体无变化,BCG菌落数减少。结论 ESAT6诱导的自噬抑制和BCG的增殖依赖于mTOR的活化。 赵润鹏 徐雪维 李文月 邢应如 倪升发 铁保贤 吴静 胡东关键词:ESAT6 MTOR 自噬 结核杆菌 腹腔肠壁隐睾继发巨大精原细胞瘤2例 2010年 目的:探讨腹腔肠壁隐睾继发精原细胞瘤的临床病理特点及鉴别诊断。方法:回顾性分析2例腹腔肠壁隐睾继发精原细胞瘤的临床特点、组织病理学和免疫表型,并复习相关文献。结果:腹腔隐睾继发精原细胞瘤,临床以影像学发现腹腔肿块入院。瘤细胞较一致,核圆形或椭圆形,核膜清楚,染色质呈丝网状或小团块状,核仁明显,分裂象易查见,胞质透明,由纤维间质分隔呈明显的巢状或团块状,间质内尚有多量淋巴细胞和少数散在的Langhans型或异物型多核巨细胞;部分区域伴坏死,间质血管丰富,部分呈肉芽肿样。瘤细胞表达PLAP、CD117,AFP、CD30、CK、α-inhibin、vimentin、CD45均阴性。多核巨细胞vimentin阳性、未见hCG阳性表达。结论:腹腔精原细胞瘤大多继发于隐睾。 铁保贤关键词:睾丸肿瘤 隐睾 精原细胞瘤 医学免疫学专业研究生综合素质培养的探讨 被引量:1 2016年 医学免疫学是基础医学中一门重要学科,高素质医学免疫学人才培养,是适应社会发展、满足社会需求、促进医学创新型人才建设的关键。作者在实际工作中,开展多种形式的教学,注重引导学生学习态度和思维模式的转变,使其掌握一定的科研思路与科研方法;探索高素质医学免疫学研究生培养的新模式。 吴静 张荣波 胡东 邢应如 倪升发 徐从景 铁保贤关键词:病原生物学 SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM和Rab7的相互作用 2016年 目的研究Rab7在结核分枝杆菌毒力因子分泌性酸性磷酸酶(SapM)诱导的自噬体-溶酶体融合阻断中的作用。方法采用Rab7小干扰RNA(si Rab7)转染Raw264.7细胞,Western blot法检测P62蛋白水平。m Cherry-SapM转染Raw264.7细胞后免疫荧光检测SapM与Rab7共定位情况,免疫共沉淀分析SapM与Rab7的关系。用3种SapM的突变体SapM△ARCA,SapM△FRED和SapM△CT转染Raw264.7细胞,分析SapM的不同突变体与Rab7的关系。结果 si Rab7处理后,细胞P62水平显著增高;免疫组织化学染色结果显示SapM与Rab7在胞内共定位;免疫共沉淀分析显示SapM与Rab7可相互沉淀;3种不同突变形式的SapM中,只有SapM△CT不能与Rab7相互作用。结论 SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM与Rab7的相互作用。 胡东 王婉 赵润鹏 徐雪维 邢应如 倪升发 徐从景 铁保贤 张荣波 吴静关键词:自噬 自噬在结核病中的研究进展 被引量:1 2016年 1963年,著名的细胞生物学家和生物化学家Christian De Duve提出了自噬(autophagy)这一概念,用来描述细胞内容物由囊泡包裹被送入溶酶体的过程。挪威生物化学家Per Ottar Seglen在20世纪80年代时发现氨基酸及很多激酶抑制剂能够抑制自噬发生并且细胞营养状态可以影响自噬。 徐雪维 赵润鹏 邢应如 倪升发 铁保贤 吴静 胡东关键词:自噬 溶酶体 生物化学家 激酶抑制剂 AUTOPHAGY 清道夫受体 个体化医疗现状及对检验医学教学的影响 被引量:2 2016年 伴随着人类寿命的延长和生活质量的提高,人们对医学的期望值也日渐增高,传统的循证医学已经不能继续满足人们在医疗方面的需求,个体化医疗(personalized medicine)也因此应运而生。与此同时,近年来迅速发展的分子生物学,使得现代医学发生了巨大的变化,已经由传统的医疗模式向个体化医疗模式逐渐发展。检验医学作为医学领域的一门重要学科,毫无疑问地也将参与到个体化医疗中,也将激发检验医学教学的新思考。 胡东 张荣波 吴静 邢应如 倪升发 徐从景 铁保贤关键词:个体化医疗 教学