许根俊
- 作品数：56 被引量：96H指数：6
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家攀登计划中国科学院重点实验室基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生历史地理农业科学更多>>
- 胰岛素的体外折叠:折叠中间体的鉴定及其折叠途径
- 2007年
- 在单链胰岛素体外折叠研究的基础上,研究了胰岛素的体外折叠过程.在胰岛素的折叠过程中捕捉到6个主要的折叠中间体,分别命名为P1A,P2B,P3A,P4B,P5B和P6B.中间体的折叠实验证明6个中间体都能最终折叠成胰岛素.在中间体的鉴定和分析以及推断的过渡态中间体形成和作用的基础上,提出了胰岛素体外折叠的两步折叠途径.(ⅰ)在折叠过程的早期,完全还原的胰岛素,即A链和B链各自形成中间体:2个A链中间体(P1A和P3A),4个B链中间体(P2B,P4B,P5B和P6B).(ⅱ)在进一步的折叠过程中,推断相继产生3个过渡态中间体:首先,中间体P3A通过分子内巯基/二硫键交换反应形成过渡态中间体Ⅰ,该中间体含有1个天然二硫键A6-A11和2个巯基分别位于A7和A20;然后,过渡态中间体Ⅰ的巯基和P4B或P6B上的巯基通过氧化反应(主要以折叠体系中的GSSG为氧化剂)分别形成含有2个天然二硫键的过渡态中间体Ⅱ和Ⅲ;最后,过渡态中间体Ⅱ和Ⅲ通过分子内巯基/二硫键交换反应形成第3个天然二硫键,完成胰岛素体外折叠.
- 唐月华王帅陈衍许根俊冯佑民
- 关键词：胰岛素二硫键
- 福寿螺(Ampullaria Crossean)外切-β-1,4-葡聚糖酶/外切-β-1,4-木聚糖酶的cDNA克隆及表达
- 在对福寿螺外切-β-1,4-葡聚精酶/外切-β-1,4-木聚糖酶的研究中,我们发现了该酶的一系列特性,包 括对氯离子的依赖性,对高浓度纤维二糖的耐受性以及单独存在下水解稻草的能力.鉴于该酶所具有的良好的应用前景和较高的理...
- 王骥赵辅昆陈清西许根俊
- 文献传递
- AMP对蛇肌果糖-1,6-二磷酸酯酶pH9.2活力的激活作用——蛋白水解酶限制性酶解作用不是果糖-1,6-二磷酸酯酶变成碱性酶的唯一原因
- 1999年
- 低纯度的NADP+ 中含有一种在pH 9.2能够激活蛇肌果糖 1 ,6 二磷酸酯酶活力的物质 .经过分离鉴定 ,证明它就是 5′ AMP .该激活作用只有当较高浓度的Mg2 + 存在时才表现出来 .在AMP的存在下 ,果糖 1 ,6 二磷酸酯酶的行为很像碱性酶 .Mg2 + 激活动力学表明 ,AMP和Mg2 + 在对蛇肌酶活力调节上存在着竞争关系 .AMP能解除高浓度Mg2 + 对酶在碱性pH活力的抑制作用 .以往认为果糖 1 ,6 二磷酸酯酶由中性酶变成碱性酶均是由蛋白水解酶限制性酶解引起的 ;现报道 5′ AMP也能将蛇肌酶变成碱性酶 ,指出蛋白水解酶限制性酶解作用不是造成该酶由中性酶变为碱性酶的唯一原因 ,并且也可能有生理调节作用 .
- 赵辅昆徐松琴杜立林许根俊
- 关键词：果糖酶解
- 1997年度诺贝尔生理和医学奖评介蛋白质传染粒子理论被引量：1
- 1998年
- 传统的疾病传染理论认为,传染因子必须含有遗传物质——核酸(DNA或RNA)。病毒、细菌、真菌和寄生虫是主要的病原体,它们侵袭正常细胞并大量繁殖,破坏宿主细胞的正常功能。所有这些过程都涉及核酸的复制和转录。长期以来,生物学家总是循着这一思路想方设法寻找上述这些病原体的存在,继而揭示传染疾病的病因,研究预防和治疗的药物。然而,美国科学家普鲁西纳(S.B.Prusiner)的蛋白质传染粒子(proteinaceous infectious particles,Prion)学说则提出了一种全新的理论,可以解释一些神经系统传染性和遗传性疾病的病因。
- 胡红雨许根俊
- 关键词：病因传染因子
- 福寿螺(Ampullaria Crossean)外切-β-1,4-葡聚糖酶/外切-β-1,4-木聚糖酶的分离纯化及性质
- 纤维素酶(Cellulase)是指降解纤维素产生葡萄糖的一类酶系.按照传统观点,动物自身不能会成纤维素酶,其纤维素的消化要依靠体内共生菌分泌的纤维素酶完成.1998年Wantanabe等人已发现了节肢动物白蚁自身的纤维素...
- 王骥赵辅昆陈清西许根俊
- 文献传递
- 果糖-6-磷酸-2-激酶的色氨酸残基的研究
- 1991年
- NBS滴定PFK-2的紫外光谱的结果表明,该酶可滴定Trp残基数为4个其中2个是活性必需的。 用295nm的紫外光激发果糖-6-磷酸-2-激酶(PFK-2),在335nm附近有较强的发射荧光。该荧光能较专一反映PFK-2的Trp基团的状态。底物果糖-6-磷酸对该荧光不影响,ATP引起荧光吸灭。最大吸灭幅度为30％左右。 采用荧光滴定方法测定ATP与酶的结合,得出解离常数(K_i)在低浓度ATP时为0.033mmol/L,高度时为0.23mmol/L。表明该结合具有负协同性。Mg^(2+)、无机磷均降低ATP与酶的K_i值而表现为激活因子;果糖-6-磷酸和果糖-2,6-二磷酸酸对K_i值不影响。ATP结合后引起了该酶构象上的较大的变化。 在ATP保护下,PFK-2对NBS的失活速度稍有增加。丙烯酰胺荧光滴定的结果是,在有无ATP时的Stern-Volmer常数(K_(SV))皆为4.0。
- 李林许根俊
- 关键词：色氨酸残基协同性内源荧光
- 一种适合针刺活检样品的蛋白质组学分析方法(英文)被引量：2
- 2008年
- 针刺活检样品是一种重要的临床组织样品,其蕴涵的蛋白质信息,对了解人类疾病极为重要.然而,由于该样品的体积极小,其研究受到很大限制.本文建立和优化了适合针刺活检样品的基于双向电泳的蛋白质组学分析平台:通过直接抽提获得针刺活检组织的蛋白质样品;用24cm固定梯度干胶条(pH3-10NL)等电聚焦及12.5%SDS-PAGE分离获得蛋白质样品;感兴趣的蛋白质点经过胰酶酶解后用MALDITOF/TOF质谱分析.运用所建立的平台对3例来自3只不同大鼠的肝脏针刺活检样品进行分析,获得了多于2500个蛋白质点的高重复性的二维凝胶银染图谱.应用该方法分析人前列腺针刺活检样品的蛋白质组,同样获得了高质量、高重复性的结果.其中随机选取的包括低丰度点在内的57个蛋白质点,经胰酶酶解后进行MALDI串联质谱分析,均获得了高确定性的鉴定结果.通过建立针刺活检样品的蛋白质组学分析方法,为研究人类疾病的分子机制提供了必要的前提保障.
- 林建峰田鸿宇高霞余梅兰陈清西许根俊赵辅昆
- 关键词：针刺活检质谱蛋白质组学双向电泳
- 蛋白质卷曲研究进展(上)被引量：4
- 1993年
- 对于简单的球状蛋白来说,它形成天然态有活力的空间结构的信息都包含在氨基酸序列之中.理论上讲,从一级结构预测空间结构进而推测出蛋白质生物功能是可行的.但到目前为止,这条路尚未走通.原因之一是用一维信息编码三维结构的过程十分复杂.这个过程就称为蛋白质卷曲.文章介绍了蛋白质的体外和体内卷曲以及卷曲的起始等方面近年的研究状况.
- 石颖许根俊鲁子贤
- 关键词：卷曲密码蛋白
- 一种改进的融合蛋白亲和层析纯化方法被引量：1
- 1998年
- 用马铃薯淀粉柱可以直接分离麦芽糖结合蛋白乳酸脱氢酶辅酶结合结构域融合蛋白，并得到满意的结果．它提纯的程度和吸附量都和商品交联直链淀粉亲和层析柱相比拟，但是成本却要低很多，而且从市场上买来的马铃薯淀粉就可以应用．它可以成为大规模生产的一种工艺路线．
- 廉德君许根俊
- 关键词：麦芽糖结合蛋白融合蛋白
- 言传身教终生受益
- 2002年
- 许根俊
- 关键词：生物化学科学家学风
