董婕 作品数:34 被引量:221 H指数:8 供职机构: 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 科研院所技术开发研究专项资金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
含H5N1-HA基因重组腺病毒疫苗的构建及其诱导免疫应答的初步探讨 2009年 目的构建包含H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗并探讨其免疫效果。方法用Admax系统构建包含H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗,并用PCR、Western—Blot等方法对重组病毒疫苗进行鉴定;疫苗免疫小鼠后,通过H1实验和ELISPOT实验检测其体液免疫和细胞免疫反应,评价其免疫效果。结果成功得到了含有H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗;基因表达鉴定表明,HA基因能够在细胞中进行表达;血凝抑制实验结果显示小鼠产生的针对HA抗体滴度在1:320和1:640之间;ELISPOT结果显示实验组和对照组(PBS)相比斑点数量差异有统计学意义(P〈0.05),以上免疫结果表明重组腺病毒载体疫苗可以诱导小鼠产生良好的特异性体液和细胞免疫反应。结论含H5NA—HA的重组腺病毒疫苗可以诱导小鼠产生良好的免疫反应,为研制人禽流感疫苗打下基础。 张晓光 李魁彪 马晶 王乃福 张晓梅 桑云虎 董婕 徐红 曾毅关键词:流感病毒A型 流感病毒A型 腺病毒 疫苗 3种市售消毒剂对人感染高致病性禽流感H5亚型病毒杀灭效果的定量评价 被引量:4 2016年 目的:评价3种市售消毒剂对人感染高致病性禽流感H5亚型病毒的杀灭效果。方法通过定量悬浮试验来确定消毒剂的有效性,即定量病毒后,使用105半数组织培养感染剂量( TCID50)的病毒与不同浓度的消毒剂结合,在不同作用时间和有机物存在与否的情况下,MDCK细胞上终点滴定剩余病毒的活性。混合物加入 MDCK细胞孵育1 h后,换病毒稀释液,继续培养18-20 h,然后用ELISA方法来定量检测病毒的TCID50值。研究人感染高致病性禽流感H5病毒的同时,选择人感染H9N2低致病性禽流感作对照。结果1%的Virkon 消毒剂与100μl含有105 TCID50的病毒液作用1 min,可以将3种病毒的活性降低到检测值以下,即1.0 lgTCID50/100μl;而0.5%Vir-kon液作用1 min,H9N2和 H5N1病毒降低到检测值以下,H5N6病毒滴度降低至1.75 lgTCID50/100μl。当作用时间延长至5 min,除上述两个浓度外,0.25%Virkon液也对部分病毒有杀灭效果。10%、5%和2.5%稀释84消毒剂组在作用1 min后均将3种病毒活性降低到检测值以下。而1.25%稀释的84消毒剂将病毒的活性降至1.25-2.50 lgTCID50/100μl。1%稀释的84消毒剂在作用1 min后,对3种病毒的杀灭效果是无效的,即使将作用时间延长到5 min 作用效果也非常有限。SOLARSEPT消毒液组的原液组,1∶2、1∶4稀释组均将3种病毒活性降低到检测值以下;1∶8稀释组无效,作用时间延长至5 min得到同样结果。用胎牛血清模拟环境污染的有机物,1%的Virkon,10%和5%稀释的84消毒剂,SOLARSEPT消毒液及其50%稀释后的SOLARSEPT消毒液在作用1 min后可以将3种病毒活性降低到检测值以下。将作用时间增加到5 min,病毒的杀灭效果没有明显增加。结论即使在有机物存在的条件下,1%Virkon、10%稀释的84消毒剂以及SOLARSEPT消毒液都可以快速杀灭H5病毒。当消毒剂的杀灭病毒能力被病毒饱和作用后,即使延长作用时间消毒效果也不明显。3种消毒剂对H5� 董婕 薄洪 董丽波 张烨 王大燕 舒跃龙关键词:高致病性禽流感 H5亚型 实验室生物安全 SUBTYPE H5 中国流感监测网络发展概况 被引量:49 2008年 流行性感冒(Influenza,流感)是一种由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,临床表现为起病急、高热、肌痛、头痛伴有严重不适、干咳、咽喉痛或鼻炎,多数患者可在一到两周内恢复。流感潜伏期短、经呼吸道飞沫传播,传播迅速,抗原易变异。人群对变异株普遍易感,控制难度大。流感流行呈一定季节性, 黄维娟 董婕 舒跃龙关键词:流感病毒 监测网络 呼吸道飞沫传播 急性呼吸道传染病 流行性感冒 潜伏期短 流行性感冒病毒鸡胚高产株的遗传特性分析 被引量:2 2002年 Influenza virus strain A/PR/8/34(H1N1)acquired a high-yielding property after serial passages in fertilized eggsSix internal RNA segments of the high-yielding strain were sequenced from their cloned cDNAs and compared with the corresponding original sequences in the prime A/PR/8/34(H1N1)strainNinety-three point mutations were found accumulated in six genes(PB2,PB1,PA,NP,M,and NS),which lead to 27 amino acid changesA significant low mutation frequency without amino acid change was observed in PA geneThe mutation frequency at the amino acid level was the highest(about 3%)in M2 proteinOur data suggest that the unequal distribution of mutations among different viral proteins may correlate with individual role of each protein in viral 董婕 张立国 陈爱君 吴昆昱 孙梅生 张智清关键词:流行性感冒病毒 基因突变 共表达甲型流感病毒M1和HA双基因的重组腺病毒的构建及鉴定 被引量:4 2009年 以我国分离的首株人H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作为研究对象,通过引入内部核糖体进入位点序列(IRES),构建共表达H5N1亚型禽流感病毒膜蛋白基因M1和HA的重组腺病毒。PCR扩增禽流感病毒H5N1亚型M1和HA基因的全长可读框片段,先后亚克隆入pStar载体,然后扩增M1-IRES-HA片段并将其插入穿梭载体pShuttle-CMV,再与pAd-Easy载体在BJ5183菌中通过同源重组产生重组腺病毒载体,转化293细胞,包装出重组腺病毒Ad-M1/HA。将Ad-M1/HA感染293细胞,可观察到明显细胞病变效应,用免疫荧光及Western-blot方法均检测到M1和HA基因的表达。共表达M1和HA双基因的重组腺病毒的成功构建为开发新型重组腺病毒流感疫苗奠定了基础。 郭建强 姚立红 陈爱珺 徐一 贾润清 薄洪 董婕 周剑芳 舒跃龙 张智清关键词:血凝素 腺病毒载体 H9N2禽流感病毒反向遗传系统的构建和鉴定 被引量:2 2009年 目的建立H9N2亚型禽流感病毒反向遗传系统,为人禽流感疫苗研制以及传播和致病机制等方面的研究提供技术平台。方法使用RT-PCR方法获得禽流感H9N2亚型病毒A,Guangzhou/333/99(H9N2)的8条全长基因节段,然后克隆到双表达载体pCI-pol I中,获得H9N2禽流感病毒的8个基因节段的8质粒系统。将构建好的8质粒共转染293T细胞后,收获上清接种鸡胚,然后对鸡胚尿囊液进行鉴定;对拯救的病毒进行鉴定。结果8质粒系统转染293T细胞后可以成功拯救出H9N2禽流感病毒,血凝效价可达到2^9/50μl,生长特性与野生型病毒类似。结论成功建立了H9N2禽流感病毒反向遗传系统。 刘丽琦 董婕 薄洪 温乐英 辛丽 张烨 李梓 董丽波 王敏 郭元吉 舒跃龙关键词:禽流感 遗传学技术 Peramivir体外抗禽流感H7N9病毒有效性研究 被引量:2 2015年 目的 研究Peramivir体外抗禽流感H7N9病毒效果 方法 采用体外抗病毒实验方法和流感病毒神经氨酸酶抑制实验并结合病毒序列分析的方法 结果 体外抗病毒实验发现三个抗病毒药物peramivir,oseltamivir和zanamivir针对禽流感病毒A/Anhui/1/2013(H7N9)的抗病毒有效浓度EC50分别是0.74±0.24 μmol/L,25.5±16.0μmol/L,29.4±6.2μmol/L,但是针对A/Shanghai/1/2013(H7N9)的有效浓度分别是74.4±18.7 μmol/L,>1000 μmol/L,和37.1±11.9 μmol/L,各自有100倍,大于40倍和1.2倍的升高.体外神经氨酸酶抑制实验发现三种药物对两个实验病毒均是敏感的.序列分析发现A/Shanghai/1/2013(H7N9)神经氨酸酶基因有R292K的突变,这种突变公认是oseltamivir耐药的表现.结论 在MDCK细胞上三种抗流感病毒药物均表现出对病毒A/Anhui/1/2013(H7N9)的有效性.但针对A/Shanghai/1/2013(H7 N9)病毒peramivir,oseltamivir有一定的抗性.判断一个病毒是否是耐药毒株需要结合神经氨酸酶抑制实验、序列分析和药物的抗病毒实验结果来综合分析. 董婕 高荣保 董丽波 周剑芳 蓝雨 邹淑梅 郭俊峰 张烨 薄洪 舒跃龙关键词:流感病毒A型 抗药性 建立微量空斑减少方法测定人血清H7N9禽流感病毒中和抗体水平 被引量:1 2016年 目的建立微量空斑减少的方法测定人血清中H7N9禽流感病毒中和抗体水平。方法确定H7N9禽流感病毒感染MDCK细胞后形成空斑数目,进行病毒定量,系列稀释待测抗体,加入已定量病毒,计算病毒被抗体中和后空斑减少数目,确定中和抗体的滴度。实验中以H7N9病例血清测定该方法的灵敏度,以其他亚型流感病毒抗体阳性人群血清评估微量空斑减少方法的特异性,同时将该方法与微量中和实验进行比较分析。结果微量空斑减少方法不仅能够检测H7N9禽流感病例中和抗体水平,而且该方法检测季节性流感病毒抗体、H5N1和H9N2禽流感病毒抗体与H7N9禽流感病毒抗体之间均无交叉反应,与微量中和实验检测结果相一致。结论建立的微量空斑减少方法具有较好的灵敏度和特异性,能够用于人血清H7N9禽流感病毒中和抗体的检测。 薄洪 董丽波 张烨 董婕 邹淑梅 高荣保 王大燕 舒跃龙关键词:禽流感病毒 中和抗体 流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用,所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ... 张智清 董婕 孙梅生 徐红 张立国 吴昆昱 齐立文献传递 流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用,所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ... 张智清 董婕 孙梅生 徐红 张立国 吴昆昱 齐立文献传递