秦庆华
- 作品数：6 被引量：30H指数：3
- 供职机构：解放军总医院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 噻唑兰法和CCK-8法检测小鼠淋巴细胞增殖反应的比较被引量：9
- 2012年
- 目的：比较噻唑兰（MTT）法和CCK-8法检测小鼠淋巴细胞增殖反应的最佳实验条件,并比较两种不同检测方法的灵敏度.方法：分离小鼠脾脏淋巴细胞,分别比较不同培养时间（69、70、71、72、73 h）、不同反应剂量（5、10、15、20、25 μl）、不同细胞数量（0、2.5×10^4、5×10^4、10×10^4、20×10^4）反应体系的MTT法和CCK-8法的吸光度值.结果：对于2×105的反应体系,MTT法的最佳培养时间为71 h,最佳反应剂量为15 μl.而CCK-8法的最佳培养时间为72 h,最佳反应剂量为10 μl.同时,通过对比两种不同检测方法对于相同细胞数量培养体系的吸光度值发现,CCK-8法的灵敏度要高于MTT法.结论：CCK-8法是一种较MTT法更优的检测小鼠淋巴细胞增殖反应的实验方法.
- 秦庆华尹承芬董宁张庆红祝筱梅姚咏明
- 关键词：CCK-8淋巴细胞增殖反应
- 调节性T细胞对脓毒症中T淋巴细胞凋亡的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)对脓毒症过程中效应性T细胞(Teff)凋亡的影响。方法:应用SPF级健康雄性BALB/C小鼠制备盲肠结扎穿孔术(CLP)脓毒症模型。小鼠随机分为正常对照组、假伤组、CLP组、CLP+PC61(Treg特异性抑制剂)组、CLP+HRPN(PC61的同型对照蛋白IgG)组。免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD4^+CD25^+Treg。采用流式细胞术观察T淋巴细胞毒性相关抗原(CTLA)-4及转录因子叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)表达以及CD25比例的变化,并检测各组小鼠CD4+CD25-T细胞的凋亡率。ELISA法检测外周血中白细胞介素(IL)-10、IL-2、IL-4和干扰素(IFN)-γ的含量变化。结果:CLP+PC61组术后48h小鼠生存率(90%)较CLP组(60%)明显升高;CLP+PC61组CD4^+CD25^+Treg中Foxp3及CTLA-4表达恢复至正常对照组水平,与CLP组差异有统计学意义(P<0.05),并且CLP+PC61组CD25表达水平最低。CLP+PC61组IL-2、IFN-γ水平显著升高,与CLP组差异明显(P<0.05),但IL-4、IL-10水平较CLP组出现不同程度地下降(P<0.05)。此外,CLP+PC61组效应性T细胞凋亡率明显低于CLP组(P<0.05)。结论:拮抗小鼠体内调节性T细胞活性可有效地减轻脓毒症状态下效应性T细胞凋亡,提高小鼠生存率。
- 栾樱译秦庆华吕奔董宁于燕姚咏明
- 关键词：调节性T细胞效应性T细胞凋亡
- 调节性T细胞通过膜结合转化生长因子β1影响效应性T细胞凋亡被引量：3
- 2013年
- 目的观察CD4＋CD25＋T细胞（效应性T细胞，Teff）凋亡情况，进-步探讨调节性T细胞（Treg）对Teff凋亡的影响及其作用机制。方法免疫磁珠法分选Balb／c小鼠脾脏的Tregs与Teff，流式细胞仪检测Tregs与抗CD3／CD28抗体刺激的Treg膜表面转化生长因子（TGF）-β1的表达、PCR技术检测其基因表达水平。将Treg与Teff共培养，然后采用抗TGF—β抗体拮抗，观察Tefr的凋亡率、线粒体膜电位变化以及胞内Smad2、磷酸化Smad2（P—Smad2）、Bim、Bcl-2蛋白表达水平。结果抗CD3／CD28抗体刺激后TregTGF—β1＋及其基因表达均明显上调（P均〈0．01）；与Treg共培养的Teff凋亡率升高（P〈0．01）、线粒体膜电位降低（P〈0．01）；胞内P—Smad2（P〈0．01）、Bim（P〈0．05）蛋白表达量增加、Bcl-2蛋白表达量降低（P〈0．01）。加入抗TGF—β1抗体后Teff凋亡率显著降低（P〈0．01）、线粒体膜电位升高（P〈0．01）、胞内P-Smad2（P〈0．01）、Bim（P〈0．05）蛋白表达水平降低、Bcl-2蛋白表达量则升高（P〈0．01），Smad2蛋白表达水平在三组之间均未见明显差异（P〉0．05）。结论调节性T细胞可通过膜结合型TGF-β1促进效应性T细胞的凋亡。
- 尹承芬秦庆华董宁祝筱梅张庆红姚咏明
- 关键词：调节性T细胞转化生长因子效应性T细胞凋亡线粒体膜电位
- 调节性T细胞促效应T细胞凋亡在脓毒症免疫抑制中的作用及机制研究
- 研究背景和目的： 严重脓毒症导致的多器官功能障碍仍然是临床上严重创伤、烧伤患者的主要死亡原因,深入理解脓毒症患者发病过程中的病理生理机制是寻找脓毒症有效治疗策略的关键手段。有资料证实,脓毒症后期免疫功能紊乱是临床脓毒症患...
- 秦庆华
- 关键词：脓毒症调节性T细胞效应性T细胞凋亡
- 文献传递
- 调节性T细胞促进效应T细胞凋亡在脓毒症免疫抑制中的作用及机制研究
- 研究背景和目的:
严重脓毒症导致的多器官功能障碍仍然是临床上严重创伤、烧伤患者的主要死亡原因，深入理解脓毒症患者发病过程中的病理生理机制是寻找脓毒症有效治疗策略的关键手段。有资料证实，脓毒症后期免疫功能紊乱是临床脓...
- 秦庆华
- 关键词：脓毒症调节性T细胞免疫抑制
- 转化生长因子β信号通路研究进展被引量：10
- 2012年
- 转化生长因子-β（transforming growth factor—β，TGF—β）是生长因子超家族中具有免疫负调控功能的一大类细胞因子家族。现已知，几乎体内所有的细胞均可分泌TGF—β并对TGF—β产生反应…；但有证据表明，Foxp3＋调节性T细胞（Foxp3＋Treg）是TGF—p的主要来源。
- 秦庆华姚咏明
- 关键词：转化生长因子Β信号通路转化生长因子-ΒTGF超家族负调控
