曹始波
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨髓间充质干细胞-胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统的构建及效应被引量：1
- 2010年
- 背景:体内研究已经证实骨髓间充质干细胞能够像神经干细胞一样在脑内迁移和整合,如果骨髓间充质干细胞用于系统途径移植成为可能,将会显著简化移植的步骤。目的:构建含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因的重组表达质粒pEGFP-N3-CD,用脂质体Lipofectamine2000转染大鼠骨髓间充质干细胞,体外观察CD基因的表达及BMSCs-CD/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统对C6胶质瘤细胞的杀伤作用。方法:构建pEGFP-N3-CD质粒,酶切、DNA测序鉴定。全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,脂质体Lipofectamine2000介导重组表达质粒pEGFP-N3-CD转染大鼠骨髓间充质干细胞。G418筛选培养获取阳性克隆(BMSCs-CD细胞),免疫细胞化学染色检测BMSCs-CD细胞的CD基因蛋白表达。Transwell小室共培养BMSCs-CD细胞和C6胶质瘤细胞,24h后加入前体药物5-氟胞嘧啶,72h后TUNEL、MTT、流式细胞术检测C6胶质瘤细胞的凋亡情况。结果与结论:构建的重组表达质粒pEGFP-N3-CD含完整的CD基因序列,CD基因转染至骨髓间充质干细胞并在基因及蛋白水平有完整表达。BMSCs-CD和C6胶质瘤细胞体外共培养条件下,C6胶质瘤的凋亡率呈剂量依赖性,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.01)。结果提示体外共培养条件下,BMSCs-CD/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统对C6胶质瘤细胞生长有显著的抑制作用。
- 曹始波孟庆海金澎王洪伟栗世方窦以河孟承东阎晶杰
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶转染骨髓间充质干细胞胶质瘤基因疗法
- 脑微血管内皮细胞和脑肿瘤干细胞共培养的体外实验研究被引量：4
- 2010年
- 目的 研究体外培养条件下,脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells,BMECs）对脑肿瘤干细胞（braintumor stem cells,BTSCs）增殖、自我更新及分化功能的影响.方法 应用Transwell小室建立BMECs与BTSCs共培养模型,并建立对照组,共培养14 d后,测量肿瘤球（brain tumor sphere,BTS）直径大小,检测BTSCs增殖曲线,测定单细胞克隆形成率.在含血清的培养基中培养10 d后,行CD133、Nestin、GFAP、DAPI免疫荧光染色,计数两组的CD133、Nestin、GFAP染色的细胞数及同一视野的DAPI染色细胞核数,观察两组之间的差异.结果 共培养组BTS直径是对照组的5.05倍,增殖快,共培养组有61.4%能形成下一代BTSCs,而对照组为39.0%.在含血清的培养基中培养10 d后,共培养组的GFAP阳性率较对照组低,而CD133、Nestin阳性率较对照组高.结论 BMECs能够促进BTSCs增殖、自我更新能力,保持BTSCs未分化状态.
- 王洪伟孟庆海金澎曹始波孟承东
- 关键词：肿瘤干细胞微血管内皮细胞共培养
- MSCs-CD/5-FC自杀基因治疗系统的构建及体外抑制C6胶质瘤细胞增殖
- 目的构建含胞嘧啶脱氨酶基因(CD)的重组表达质粒pEGFP-N3-CD,用脂质体Lipofectamine2000转染rMSCs,体外观察CD基因的表达及MSCs-CD/5-FC自杀基因治疗系统对C6胶质瘤细胞的杀伤作用...
- 曹始波孟庆海金澎
